杨继良
- 作品数：7 被引量：100H指数：4
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 玉米大斑病抗性遗传的研究进展被引量：53
- 2002年
- 由于大斑病生理小种的变异,致使原来抗大斑病的玉米品种丧失抗性,对玉米生产造成严重危害,至今已经发现大斑病菌生理小种5个。玉米对大斑病的抗性可分为多基因控制的数量性状和显性单基因控制的质量性状,前者涉及玉米的10条染色体;后者包括Ht1、Ht2、Ht3、HtN等基因。本文对大斑病生理小种变化,玉米大斑病抗性单基因（Ht）的来源、遗传特点、染色体定位以及数量抗性基因的QTL分析等研究进展作了综述。
- 杨继良王斌
- 关键词：玉米大斑病抗性遗传
- 水稻基因APRT的克隆及其与温敏核雄性不育的关系(英文)被引量：4
- 2003年
- 在拟南芥中腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因(APRT)突变导致植株雄性不育。本文首次报道从水稻(Oryza sa-tiva subsp.indica)中克隆了基因APRT(GenBank登录号AY238894),并将其定位于水稻第4染色体的一个BAC克隆(AL606604)的58000 bp至63 000 bp 区域。该基因长4 220 bp(起始密码子至终止密码子),含7个外显子、6个内含子,编码的APRT蛋白长212个氨基酸残基,与其他物种来源的APRT序列存在很高的同源性。与大麦、小麦、拟南芥1型及其2型的该蛋白同源性分别为54.9％、54.9％、49.6％和59.5％。经保守结构域搜索发现该蛋白中存在APRT催化结构域。从DNA、mRNA两个水平分析了该基因与水稻温敏核雄性不育(TGMS)的关系,结果表明:受温度诱导,水稻“安农S-1”APRT基因的表达变化可能与温敏核雄性不育表现型具相关性。
- 李军梁春阳杨继良邢全华杨典洱邓启云翁曼丽王斌
- 关键词：水稻克隆
- Shotgun法测序制备高纯度水稻基因组DNA的方法探讨(英文)
- 2003年
- 在用散弹 (shotgun)法测定水稻 (OryzasativaL .ssp .indica)基因组全序列的过程中 ,叶绿体和线粒体DNA的污染问题非常严峻 .应用脉冲场电泳 (PFGE)技术对水稻基因组DNA进行纯化 ,结果表明它能够有效去除叶绿体和线粒体DNA ,使其污染率从 3%降低到 0 2 % .同时 ,比较了水稻绿苗和黄化苗的DNA得率 ,以及HB法和NIB法制备大分子质量(HMW)DNA的异同 .最后提出一套制备水稻基因组DNA的方法 ,包括黄化苗培养 ;细胞核的分离、包埋和裂解 ;脉冲场电泳纯化、回收聚集在低熔点 (LMP)胶中的水稻HMWDNA .用该方法所得的水稻基因组DNA ,纯度高 (无叶绿体和线粒体DNA污染 )、基因组完整 (机械剪切和降解少 )、回收率高 (操作过程中DNA损失少 ) .另外 ,首次报道在融化的低熔点(LMP)胶中对水稻HMWDNA于 38℃进行超声波处理 ,能够获得用于shotgun文库和梯度文库构建所需要的各种DNA片段(1 5～ 3kb ,3～ 12kb) 。
- 杨继良王辉王庆华李军刘斌金德敏王斌
- 关键词：测序水稻基因组DNA纯化
- 一种改进的用高拷贝质粒制备BAC载体的新方法被引量：4
- 2003年
- 介绍了一种改进的使用高拷贝质粒制备BAC载体的简便有效的方法 ,我们同时使用从高拷贝质粒 pCUGIBAC1制备的和用传统方法从单拷贝质粒 pIndigoBAC 5制备的两种载体 ,比较了这两种载体与玉米大片段DNA连接所构建的BAC文库。结果表明在使用这两种BAC载体构建的BAC文库中 ,所获得的转化体数目 ,及在BAC克隆中插入的DNA片段的大小和BAC克隆的稳定性等方面都相同 ,从而证明本文所介绍的从高拷贝质粒 pCUGIBAC1来制备BAC载体是一种更方便的方法 。
- 邓代永杨继良宣劲松张明哲翁曼丽王斌
- 关键词：高拷贝质粒细菌人工染色体DNA转化体BAC文库
- 玉米大斑病抗性基因Ht2的精细定位被引量：35
- 2002年
- 精细定位玉米大斑病抗性基因Ht2对于图位克隆该基因和探讨玉米基因组中抗病基因的分布规律及分子标记辅助选择有重要意义.以大斑病的感病自交系“获白”为母本,抗病自交系“77Ht2”为父本构建了F2作图群体.通过RFLP分析知,Ht2基因定位在第8染色体的UMC89和BNL2.369之间,与BNL2.369相距0.9 cM.然后选用在该区域的SSR标记进行了连锁分析,确定了SSR标记UMC1202BNLG1152,UMC1149与Ht2基因紧密连锁,其中UMC1149与Ht2基因的距离为7.2 cM.利用BSA法从450个RAPD引物的扩增产物中筛选出7个可能与Ht2基因连锁的标记,并将其中单拷贝标记转换为SCAR标记.连锁分析表明,一个SCAR标记(定名为SD-06633)距Ht2基因0.4 cM.在此基础上,构建了Ht2基因所在区域的分子标记连锁图.
- 尹小燕王庆华王飞张举仁杨继良金德敏王斌
- 关键词：玉米分子标记基因定位基因克隆
- 玉米自交系77Ht2细菌人工染色体（BAC）文库的构建与筛选
- 细菌人工染色体(BAC)文库已经成为基因图位克隆,基因组物理图谱构建,以及基因组测序的有力工具.然而,BAC文库构建的技术性强、工作量大,是基因组研究的一项艰苦的基础工程.其中高效BAC载体和高质量大片段DNA的制备,是...
- 杨继良
- 关键词：细菌人工染色体(BAC)文库脉冲电泳文库筛选
- 玉米大斑病抗性基因的DNA分子标记研究进展被引量：20
- 2002年
- DNA分子标记是研究植物抗病基因的有效方法 ,本文概述了利用DNA分子标记技术研究玉米大斑病抗性基因的进展 。
- 王庆华杨继良尹小燕张举仁
- 关键词：DNA分子标记玉米大斑病抗性基因染色体定位QTL定位
