楼宏强
- 作品数：52 被引量：97H指数：5
- 供职机构：金华职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金金华市科技计划项目浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学社会学更多>>
- 靶向敲除问号钩端螺旋体鞭毛相关fliN基因及其突变株致病性变化被引量：2
- 2009年
- 目的了解问号钩端螺旋体（简称钩体）鞭毛相关Ⅲ型分泌系统∥洲基因产物的致病性。方法构建基因打靶载体p2NIL fliN-amp，采用基于自杀质粒与染色体同源序列重组的靶基因敲除技术构建不表达FliN的问号钩体赖型56601株突变株，采用PCR、测序和Westernblot对FliN-突变株进行鉴定。采用动力试验、MTT、Fontana镀银染色法和流式细胞术，对FliN-突变株的迁移能力、培养物上清对小鼠单核-巨噬样细胞株J774A．1的细胞毒性、黏附及诱导J774A．1细胞凋亡能力的改变进行分析。结果PCR、测序和Westernblot结果均证实成功构建了FliN‘突变株，该突变株能在含100μg/ml氨苄青霉素的Korthof培养基中生长及繁殖。FliN。突变株在Korthof半固体培养基上菌落直径（2—3mm）明显小于野生株（6～8mm），表明该突变株动力消失。FliN一突变株培养物上清作用J774A．1细胞72h时虽显示有细胞毒性，但明显低于野生株（P〈0．05）。FliN。突变株作用J774A．1细胞60rain时的黏附率（25．5％）明显低于野生株（47．5％）（P〈0．05），其引起J774A．1细胞坏死和细胞凋亡率（30．6％和22．7％）也明显低于野生株（48．2％和35．2％）（P〈0．05）。结论．fliN基因产物与问号钩体黏附细胞、分泌毒力因子和诱导细胞凋亡密切相关。采用基于自杀质粒基因敲除技术可用于研究问号钩体靶基因产物的致病机制。
- 楼宏强廖苏梅胡野严杰
- 关键词：问号钩端螺旋体基因敲除突变株
- CheA／CheY二元信号系统调控空肠弯曲菌体外趋化和体内定植的研究被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨空肠弯曲菌CheA和CheY调控细菌体外趋化和体内定植中的作用及其机制.方法 分别以pET42a和E.coli BL21DE3为表达载体和表达宿主菌,构建空肠弯曲菌NCTC11168株cheA和cheY基因原核表达系统.制备重组表达的rCheA和rCheY兔抗血清并用DEAE-52离子交换法提取其IgG.采用pBiuescript-Ⅱ-SK构建自杀质粒,制备cheA基因敲除的cheA-突变株.采用基于脱氧胆酸钠硬琼脂法（DOC-HAP）的空肠弯曲菌体外趋化模型,检测cheA-突变株趋化能力的变化,同时分别观察rCheA-IgG和氯氰碘柳胺钠对细菌趋化的抑制作用.采用rCheA-IgG和CheY-IgG捕获法,测定DOC作用后空肠弯曲菌CheA和CheY磷酸化水平变化.采用小鼠感染模型比较cheA-突变株和野生株定植能力的差异.结果 所构建的原核表达系统能有效表达rCheA和rCheY.PCR和测序结果证实eheA-突变株染色体DNA中cheA基因被敲除.cheA-突变株丧失对DOC的趋化能力,rCheA-IgG和氯氰碘柳胺钠均对空肠弯曲菌野生株趋化有明显的抑制作用（P〈0.05）.在DOC作用下,空肠弯曲菌野生株CheA和CheY磷酸化水平迅速下降（P〈0.05）.cheA-突变株定植小鼠空肠的能力也明显不如野生株（P〈0.05）.结论 CheA/CheY组成了空肠弯曲菌趋化相关二元信号传导系统（Che-TCSS）,两者均去磷酸化被激活.Che-TCSS中CheA在空肠弯曲菌体外趋化和体内定植中发挥了关键作用,可作为研发抗空肠弯曲菌感染新药的靶标.
- 王媛楼宏强王欢胡玮琳严杰
- 关键词：空肠弯曲菌趋化定植
- 一种菌株专用培养装置
- 本发明公开了一种菌株专用培养装置，包括培养柜，培养柜中设有用于供液的循环输送带，循环输送带分为蛇形段、提升段和吸液段，蛇形段的各个转弯处设有第一转向支撑辊，提升段的两端转弯处设有第二转向支撑辊，蛇形段中并排固定有若干排支...
- 吴琳王岚楼宏强
- CRTH2受体拮抗剂缓解大鼠哮喘模型气道炎症被引量：4
- 2010年
- 目的:通过对大鼠哮喘模型嗜酸性粒细胞(EOS)上DP1/CRTH2受体及细胞因子变化的分析,研究DP1/CRTH2拮抗剂对大鼠哮喘模型气道炎症的影响和机制。方法:40只雄性SD清洁级大鼠,随机分为正常对照组、哮喘组、CRTH2拮抗剂BAYu3405应用组、DP1受体拮抗剂BWA868C应用组,每组10只。用卵白蛋白(OVA)雾化诱喘。放射配体分析其外周血EOS上的PGD2受体;ELISA测定大鼠血中IL-4和IL-5及IFN-γ水平;肺组织病理切片,HE染色镜检。结果:CRTH2拮抗剂BAYu3405应用组大鼠支气管壁EOS浸润显著减少,血清IFN-γ水平显著增高,IL-4、IL-5水平显著低于哮喘组和DP1受体拮抗剂BWA868C应用组(P<0.01);在肺泡灌洗液中EOS计数较哮喘组和DP1受体拮抗剂BWA868C应用组显著减少(P<0.01),外周血EOS计数与哮喘组和DP1受体拮抗剂BWA868C应用组相似,较正常对照组显著增加(P<0.01)。与正常对照组相比,哮喘组、CRTH2拮抗剂BAYu3405应用组和DP1受体拮抗剂BWA868C应用组外周血EOS上DP总结合和CRTH2受体结合容量显著增加(P<0.01),DP1无显著性差异(P>0.05)。结论:CRTH2受体(DP2)拮抗剂能缓解大鼠哮喘模型气道炎症,减少气道中EOS浸润,可能与CRTH2受体拮抗剂能通过拮抗EOS上增高的CRTH2结合容量,降低IL-4、IL-5和增高IFN-γ水平有关,DP1拮抗剂BWA868C对大鼠哮喘模型气道炎症无显著改善作用。
- 楼宏强应延风胡野
- 关键词：细胞因子类前列腺素D2嗜酸性细胞
- 基于“仁”文化的高职医护专业思政德育体系构建与实践——以金华职业技术学院医学院为例被引量：10
- 2020年
- “立德树人”是高校育人根本任务,“德术兼修”是高等职业教育人才培养的目标。金华职业技术学院医学院基于优秀传统“仁”文化,通过建设典型案例教学库、推进“医学+思政”课程教学改革,设置“课程化”活动项目、搭建第二课堂实践平台,实施量化积分制考核评价、建立多主体协同育人机制,加强育人队伍建设,发挥“他育”“自育”协同合力,形成了特色性“三仁行、三路径、三悟形”思政德育体系,取得了一定成效。
- 汪妍楼宏强
- 关键词：高职院校医护专业思政课程德育体系
- 地理信息系统在并殖吸虫中间宿主监测中的应用被引量：2
- 2011年
- 地理信息系统（Geographic information system,GIS）经过近30年的发展,已成为资源调查、环境评估、灾害预测、公共设施管理等领域进行处理、分析和可视化空间资料必不可少的工具。同样,GIS也为公共卫生领域的应用和发展提供了一个有用的研究工具[1]。
- 楼宏强余新图胡野王岚屠平光
- 关键词：地理信息系统并殖吸虫公共卫生领域资源调查环境评估设施管理
- SSR-PCR和常规PCR检测不同地区并殖吸虫遗传变异的比较研究被引量：1
- 2011年
- 目的以SSR-PCR和常规PCR对浙江省和福建省5个不同地区并殖吸虫进行遗传变异检测,比较两者对并殖吸虫的基因水平分类的差异。方法采用微卫星锚定PCR(SSR-PCR)对基因组DNA进行PCR扩增,扩增产物按Nei的方法计算遗传距离,并应用SPSS软件构建系统进化树;采用常规PCR扩增线粒体细胞色素C氧化酶亚单位(COI)及核糖体DNA第二间区(ITS2)的基因序列,测序后用BoiEdit软件分析同源性,用MEGA软件构建种系发生树。结果不同地区并殖吸虫标本的SSR-PCR产物呈多态性,浙江金华、浙江永嘉、福建周宁与福建平和、福建政和的标本存在明显的差异。前两者的遗传距离最近,为0.3333,浙江金华与福建平和的标本遗传距离最远,为0.8667。常规PCR基因序列分析显示浙江金华、浙江永嘉、福建周宁的标本之间在种系发生树上比较接近,浙江金华和浙江永嘉的标本最为接近。结论利用SSR-PCR和常规PCR进行并殖吸虫的遗传变异分析结果基本一致。SSR-PCR是一种比常规PCR更方便的并殖吸虫遗传变异研究方法。
- 单小云楼宏强胡野楼景屠平光方萍
- 关键词：SSR-PCR常规PCR并殖吸虫
- 钩端螺旋体外膜蛋白GroEL优势T-B联合抗原表位及其免疫原性鉴定
- 2015年
- 致病性钩端螺旋体（以下简称钩体）感染引起的钩体病是全球流行的人兽共患传染病。现行钩体疫苗保护力微弱且有较大副作用。多抗原肽（ multiple antigenic pep-tides，MAP）疫苗具有能同时提呈多种抗原表位、提呈作用强、形成共价表位提高抗原性等优点。本研究中我们检测了groEL基因在我国流行的致病性钩体血清群中分布、筛选并确定了GroEL分子中优势T和B细胞（ T-B）联合抗原表位及其激活T细胞亚群的能力，以期为今后研制通用型钩体MAP疫苗提供候选抗原表位。
- 张金良李阳楼宏强严杰胡玮琳
- 关键词：致病性钩端螺旋体抗原表位免疫原性外膜蛋白人兽共患传染病
- 胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒的制备及性能评价
- 2022年
- 目的:胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒的制备及性能评价。方法:对反应体系中的主要成分定标,校准品溯源,质控品定值,参考区间确定,并对试剂准确度、精密度、稳定性、干扰物实验等相关性能指标进行评价,检测临床标本评价研制的试剂盒效能。结果:羧基微球粒径采用108 nm,羧基微球与环瓜氨酸肽抗原比例为3∶1,交联时间为60分钟,BSA封闭时间为60分钟,这时方法学灵敏度最佳。标准品溯源至北京九强生物技术股份有限公司试剂盒,两者线性回归y=1.010x-0.420(r=0.981)。质控品定值分别为20.0 U/mL±4.0 U/mL,50.0 U/mL±10.0 U/mL。参考范围95%可信区间为<35 U/mL。在2℃~8℃环境下,产品校准品贮存12个月和质控品开封16天后检测结果变化不显著。干扰物胆红素≤200 mg/L、甘油三酯≤3 g/L、血红蛋白≤2.5 g/L时,对三批试剂结果均无显著干扰。对照试剂和考核试剂检测临床标本,线性回归y=0.9607x-0.3451(r=0.9763),偏倚分析在允许误差范围内,说明考核试剂完全达到临床检测要求。结论:制备的胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒符合临床诊断要求。
- 金耀建黄信用高素华叶均楼宏强张艳芳孙义凯
- 关键词：胶乳增强免疫比浊法抗环瓜氨酸肽抗体环瓜氨酸肽
- 一种空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选及功能鉴定方法
- 本发明涉及医学检测或疫苗研究领域，一种空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选及功能鉴定方法是基于空肠弯曲菌主要外膜蛋白OMP18的B细胞抗原表位筛选来进行的并包括如下步骤：(I)采用TMpred和TMHMM...
- 楼宏强单小云宋春涵胡野盛秀胜王岚
- 文献传递
