汪国忠
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 供职机构：浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅资助项目浙江省科技厅重点资助项目浙江省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新型载基因微泡的制备及其在心肌细胞报告基因转染中的应用被引量：5
- 2006年
- 为了提高基因黏附微泡的稳定性和基因携带容量,采用改良超声声振法将质粒-多聚乙酰亚胺(PE I)复合物整合至微泡包膜上而制备出新型载基因微泡。电泳分析及细菌转化实验表明PE I能降低超声声振对质粒结构及功能的破坏。新型载基因微泡具有良好的声学及血液流变学性能,其基因携带量明显高于基因黏附微泡。分别采用超声破裂新型载基因微泡及基因黏附微泡介导心肌细胞β-半乳糖酶基因转染。结果表明,超声破裂载基因微泡能增强裸质粒转染效率达107倍,其基因表达水平为超声破裂基因黏附微泡组的6.85倍。提示经改良法制备的新型载基因微泡是一种安全高效的基因转运载体,超声破裂载基因微泡能明显增强心肌细胞的基因转染效率。
- 汪国忠胡申江郑哲岚孙坚郑霞朱朝晖李江姚宇玫
- 关键词：超声微泡基因转染心肌细胞
- 载基因微泡介导β-galactosidase质粒转染心肌细胞的对照研究被引量：2
- 2004年
- 目的 观察不同的载基因微泡介导体外培养心肌细胞报告基因转染与表达,探讨微泡性质 与浓度在超声破裂微泡介导基因转染过程中的效应。方法 以β galactosidase质粒为报告基因,制备两 种不同性质的载基因微泡,利用诊断性超声破裂微泡进行体外心肌细胞基因转染,测定β galactosidase表 达水平并进行细胞活性检测。结果 超声载基因破裂氟烷气体微泡(PESDA)转染组心肌细胞β galactosidase表达约为单纯质粒转染组80倍(P<0.01),并在一定范围内随微泡浓度增加而增高。超声 破裂载基因PESDA转染组基因表达水平明显高于超声破裂载基因声振白蛋白微泡(ASDA)转染组(P< 0.05),而两组对细胞活性影响却无明显差异(P>0.05)。结论 超声微泡性质及浓度对超声破裂微泡介 导基因转染效率具有重要影响,低能量诊断性超声破裂载基因PESDA较超声破裂载基因ASDA能更为 有效地介导基因转染,是一种安全高效的基因传输方法。
- 汪国忠胡申江郑哲岚童紫莺郑霞姚宇玫李江
- 关键词：心肌细胞
- 靶向传输基因的载基因微泡及其制备方法和用途
- 本发明提供一种能靶向传输基因的新型基因传输载体—载基因微泡，这种载基因微泡主要由包膜构成物、含氟惰性气体内核、基因保护剂、表面活性剂、质粒构成。本发明还提供了这种载基因微泡主要采用同步声振法制备而成。本发明为基因治疗提供...
- 胡申江汪国忠
- 文献传递
- 腺相关病毒载体介导的PLB基因反义RNA对大鼠心肌细胞肌浆网Ca^(2+)-ATPase活性和[Ca^(2+)]i的作用被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨腺相关病毒载体介导的磷酸受纳蛋白(PLB)反义RNA对肌浆网Ca2+-ATPase活性以及细胞内钙浓度([Ca2+]i)的作用。方法:构建PLB反义RNA的重组腺相关病毒载体(rAAV-asPLB)和携带报告基因LacZ的重组腺相关病毒载体(rAAV-LacZ)。分别转染培养的大鼠心肌细胞,测定PLBmRNA和蛋白质表达,检测肌浆网Ca2+-ATPase活性和[Ca2+]i。结果:RT-PCR和Westernblotting显示,感染rAAV-asPLB的心肌细胞的PLBmRNA和蛋白质表达低于正常对照和感染rAAV-LacZ组;而Ca2+-ATPase活性大于正常对照和感染rAAV-LacZ组。激光共聚焦显微镜检测显示,静息状态时,rAAV-asPLB感染组[Ca2+]i降低;异丙肾上腺素刺激后,各组[Ca2+]i均升高,但是rAAV-asPLB感染组[Ca2+]i变化幅度大。结论:腺相关病毒介导的PLB反义RNA对大鼠心肌细胞PLB表达具有抑制作用,增强Ca2+-ATPase活性,降低静息状态的[Ca2+]i,增加异丙肾上腺素刺激后[Ca2+]i的变化幅度。
- 李江胡申江赵晓燕汪国忠郑霞姚宇玫陈乃云孙坚朱朝晖
- 关键词：磷酸受纳蛋白腺病毒科
- 超声破裂载基因微泡增强心肌细胞报告基因的转染与表达被引量：4
- 2005年
- 目的:通过超声破裂载基因微泡介导报告基因心肌细胞转染,探讨其能否增强心肌细胞外源基因转染与表达。方法:以-βgalactosidase质粒为报告基因,将其与自制氟碳气体微泡粘附,制备载基因微泡。利用诊断性超声破裂微泡进行体外心肌细胞基因转染;以磷酸钙共沉淀转染为阳性对照并将其以不同方式与超声破裂微泡技术联合应用,以期进一步增强基因转染效果。分别采用原位染色及酶学定量检测-βgalactosidase表达水平,同时进行细胞活性检测。结果:超声破裂载基因氟碳气体微泡(PESDA)转染组心肌细胞-βgalactosidase表达水平可达单纯质粒转染组60倍(P<0.01)。磷酸钙共沉淀转染3.67倍(P<0.01)超声强度、微泡浓度对超声破裂介导基因转染效果有明显影响。超声破裂微泡技术与磷酸钙共沉淀联合应用可进一步提高报告基因的表达(P<0.05),即使在磷酸钙转染后6 h,超声破裂微泡仍能明显增强报告的基因的表达(P<0.05)。结论:超声破裂微泡技术是一种高效基因转染方法,其不但能增加DNA转染,而且增强入胞后基因的表达。超声破裂微泡与其它基因转染技术联合应用能进一步增加基因转染效率。
- 汪国忠胡申江郑哲岚孙坚李江郑霞朱朝晖姚宇玫
- 关键词：超声造影剂基因心肌细胞
- 靶向传输基因的载基因微泡及其制备方法和用途
- 本发明提供一种能靶向传输基因的新型基因传输载体—载基因微泡，这种载基因微泡主要由包膜构成物、含氟惰性气体内核、基因保护剂、表面活性剂、质粒构成。本发明还提供了这种载基因微泡主要采用同步声振法制备而成。本发明为基因治疗提供...
- 胡申江汪国忠
- 文献传递
