温永俊
- 作品数：97 被引量：302H指数：10
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 胞内劳森菌PCR检测方法的建立及初步应用被引量：5
- 2017年
- 为建立一种用于检测胞内劳森菌的检测方法,本试验根据GenBank中公布的胞内劳森菌16SrRNA设计引物建立PCR诊断方法。结果显示:获得了大小为481bp的PCR产物,核苷酸序列同源性分析结果均为99%以上;特异性试验表明该方法对大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、猪流行性腹泻病毒和金黄色葡萄球菌均为扩增阴性;敏感性试验表明该方法的最低检出量为32.8μg/L;对20份临床样品阳性检出率为15%。结果表明:该方法具有较好的特异性和敏感性,适用于临床检测胞内劳森菌。
- 孙娜刘杏陈强刘莹温永俊程世鹏
- 关键词：PCR
- 犬瘟热疫苗株CDV_3的血凝素基因的克隆与序列分析
- 2007年
- 王凤雪闫喜军邵西群柴秀丽温永俊吴威
- 关键词：犬瘟热病毒血凝素基因疫苗株基因组结构动物感染蛋白组成
- 猪瘟病毒Erns和E2蛋白重组表达及抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2022年
- 本研究将CSFV Erns和E2基因的主要抗原区进行克隆,构建pET32a-Erns和pET32aEK-E2重组质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达和纯化,以纯化的rErns、rE2重组蛋白为包被抗原,经条件优化,分别建立CSFV rErns和rE2抗体间接ELISA检测方法。SDS-PAGE结果显示,分别获得约为47 kDa和42 kDa的重组蛋白,rErns重组蛋白主要在上清液中存在,rE2重组蛋白主要以包涵体形式存在。Western blot结果显示,纯化后的重组蛋白具有良好的免疫原性。通过方阵试验进行了ELISA反应条件优化,确定了Erns蛋白最佳包被量为2.5μg/mL,rE2蛋白最佳包被量为0.625μg/mL,待检血清最佳稀释倍数为1∶100,最佳封闭液为0.25%PVA溶液,HRP标记的兔抗猪IgG二抗最佳稀释度为1∶2000,临界值分别为0.24和0.33。上述方法仅与CSFV阳性血清发生特异性反应,检测敏感性可达到1∶1600,批内重复性和批间重复性变异系数均小于10%。本研究建立的间接ELISA方法可初步应用于CSFV Erns和E2抗体的检测,鉴别E2亚单位疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,有利于猪瘟净化工作的实施。
- 张洪亮郝占武林喜平张志王凤雪解倩倩韩先杰单虎温永俊
- 关键词：猪瘟病毒E2基因蛋白表达间接ELISA
- 牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2018年
- 旨在建立一种特异性检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的RT-PCR方法,并且可以实现在同一体系中对BVDV进行分型。根据GenBank中公布的BVDV基因组序列,针对高度保守的5′UTR区域分别设计鉴定及分型引物,建立牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法。应用鉴定RT-PCR检测方法可从BVDV阳性毒株中扩增出288bp的特异性片段;而分型RT-PCR检测方法可在同一体系中从BVDV1型和2型毒株中扩增出大小分别为316bp和110bp的特异性片段,但对猪瘟病毒、牛副流感3型病毒及牛传染性鼻气管炎病毒等均为阴性,最低可检测出的病毒量分别为1TCID50/mL和10TCID50/mL。临床试验证明,建立的鉴定及分型RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,具有很高的实用价值,为进一步开展流行病学调查、病毒分离等提供可靠的技术手段。
- 李新培朱洪伟朱洪伟关平原程世鹏程世鹏
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒反转录-聚合酶链反应
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染相关受体的研究概况被引量：1
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞主要是通过敏感细胞上特异性受体介导产生的。文章对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染相关受体的研究进行了综述,硫酸乙酰肝素、唾液酸黏附素和CD163是主要的相关受体,对它们的功能特性研究将为猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病机理和预防研究提供理论支持。
- 王凤雪温永俊武华
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒受体硫酸乙酰肝素
- 鹿科经济动物抗结核病研究进展
- 动物抗病育种具有重大的经济效益,正逐渐引起动物育种专家的兴趣.随着新西兰赤鹿抗结核病育种研究的不断深入,鹿科经济动物的抗病育种也悄然兴起,本综述将重点对目前动物抗结核病育种的途径和一些抗病候选基因的研究进展进行总结,为我...
- 杨艳玲温永俊武华
- 关键词：抗病育种
- 文献传递
- 犬瘟热病毒活疫苗耐热冻干保护剂及制备方法
- 本发明涉及犬瘟热病毒活疫苗耐热冻干保护剂及制备方法，其特征在于按质量份数由以下物质混配而成：蔗糖10-30、L-谷氨酸钠0.01-5、聚乙烯吡咯烷酮1-2、水解乳蛋白10-30、蜂胶0.1-10，余量为蒸馏水。其制备方法...
- 谭斌温永俊孙娜张淑琴王凤雪杨勇
- 文献传递
- 犬瘟热病毒研究概况被引量：1
- 2012年
- 犬瘟热(CD)是由犬瘟热病毒(CDV)引起的一种急性、高度接触性传染病,流行范围广,发病率、致死率高,临床症状多样。CDV感染宿主广泛,所有日龄的犬都有可能感染。CDV属于副黏病毒科麻疹病毒属,有囊膜包裹的单股负链线性RNA病毒。CDV基因组编码6种蛋白:核衣壳(N)蛋白、磷(P)蛋白、基质膜(M)蛋白、融合(F)蛋白、血凝素(H)蛋白和大(L)蛋白。N、P和L蛋白与病毒复制有关;M蛋白与病毒的装配和出芽有关;F、H蛋白在病毒的侵染过程中起到关键作用。近年来,随着我国宠物业、毛皮经济养殖业的迅速发展,CD在我国的发病率有升高的趋势。论文对CDV分子生物学研究进展进行归纳总结。
- 胡嘉欣温永俊霍志云武华高维凡
- 关键词：犬瘟热病毒分子生物学致病机理
- 毛皮动物感染流感病毒的研究进展
- 流感病毒作为一种受全人类重视的人兽共患病病原,在我国畜禽疾病防控中占有举足轻重的地位。A型动物流感病毒H1N1（猪流感）、H5N1（禽流感）和H7N9（禽流感）均可引起人畜共患的呼吸系统疾病,毛皮动物感染流感病毒极易通过...
- 王凤雪程世鹏闫喜军温永俊
- 关键词：毛皮动物宠物流感病毒
- 文献传递
- 副流感病毒对不同宿主致病性研究进展被引量：1
- 2017年
- 副流感病毒(PIV)广泛地存在于自然界,其基因型较多,宿主范围广泛,不仅引起人的呼吸道疾病,而且使牛,羊,犬等动物感染发病,给畜牧业生产造成较大的经济损失。论文就副流感病毒的病毒学基础、致病机制、引起不同宿主动物特别是牛、羊、犬等的广泛感染流行情况进行综述,为副流感病毒致病机制的研究以及诊断和预防策略的提出提供理论依据。
- 何民辉李真光王凤雪朱洪伟张淑琴孙娜汪孟航温永俊武华
- 关键词：副流感病毒宿主动物致病机制
