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王令春: 作品数：42 被引量：70H指数：6; 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程农业科学更多>>

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重组人白细胞介素-2的研制: 1996年; 白细胞介素-2(Inter leukin2,IL-2)是由辅助性T淋巴细胞产生的一种淋巴因子,它作为一种免疫活性物质通过对杀伤细胞的诱导、扩增和分化等介导机体免疫系统,具有抗肿瘤、抗病毒和抗感染等作用。临床资料显示它用在诸如黑色素瘤、肾癌等恶性肿瘤的治疗,已取得了较好的效果。; 马清钧单传伟边疆王令春王令春刘新垣徐桂清虞建良刘新垣; 关键词：重组人白细胞介素杀伤细胞黑色素瘤免疫活性物质淋巴因子

Cre-LoxP系统在炭疽芽胞杆菌基因敲除中的应用及eag基因的敲除被引量：4: 2009年; 将Cre-LoxP系统应用于Bacillus anthracis中并成功敲除eag基因.以B.anthracis基因组为模板扩增得到上下游同源臂,联合两端带有LoxP位点的壮观霉素抗性基因片段构建好同源重组载体,转化B.anthracisAP422,通过一系列筛选得到带有抗性标记的重组菌.然后,通过转入Cre重组酶表达质粒,去除抗性标记,得到eag基因缺失的重组菌,并在DNA水平、RNA水平和蛋白质水平进行了系统的鉴定.最终建立了Cre-LoxP系统在B.anthracis中的应用方法,并成功敲除eag基因.; 王艳春姜娜展德文邱炎袁盛凌陶好霞王令春张兆山刘纯杰; 关键词：炭疽芽胞杆菌同源重组基因敲除

肠毒素大肠杆菌攻毒小鼠模型的建立以及疫苗候选株保护效果的评价被引量：6: 2006年; 目的:建立肠毒素大肠杆菌攻毒小鼠模型以及应用模型对疫苗候选株免疫效果进行评价．方法:通过鼻饲半数致死量(LD50)肠毒素大肠杆菌E44813,E44815和E11881A观察小鼠肺病理学变化、肺部细菌清除情况变化,建立肠毒素大肠杆菌鼻饲小鼠模型;应用鼻饲小鼠模型观察疫苗候选株FE1,FE3,FE6保护效果．结果:鼻饲LD50剂量肠毒素大肠杆菌小鼠的病理特征是肺组织存在大量的淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和浆细胞,为多病灶支气管肺炎,肺部细菌清除缓慢,至第7天仍能检测到105数量级的细菌．应用疫苗候选株免疫后进行攻毒,小鼠没有发病和死亡,病理特征主要是淋巴细胞少量增多,肺部细菌清除迅速,至第7天已检测不到细菌,与对照有显著性差异(0 CFU／g vs 6．2×105,5．4×105,2．3×105 CFU／g,P<0．05)．结论:肠毒素大肠杆菌鼻饲小鼠模型能够为疫苗筛选和评价提供了有效途径,同时也证实了疫苗候选株FE1,FE3,FE6具有良好的免疫保护效果．; 王志斌姜普林曾年华李淑琴王令春李燕熊仕秋张兆山; 关键词：小鼠模型

能在芽孢表面展示PA20蛋白的炭疽芽孢杆菌及其应用: 本发明公开了一株能在芽胞表面展示PA20蛋白的炭疽杆菌株及其应用。该菌株，是将pagA20基因插入到炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)芽胞蛋白bclA基因未端...; 展德文王艳春刘纯杰陶好霞袁盛凌王令春王芃; 文献传递

炭疽芽孢杆菌保护性抗原在大肠杆菌中的表达及纯化: 2005年; 按照炭疽芽孢杆菌保护性抗原(PA)基因成熟肽编码序列设计引物,从炭疽杆菌pOX1质粒中扩增出PA基因片段,将该片段定向插入到原核表达载体pET-28a中,获得了pET-PA原核表达重组质粒,限制性酶切分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为PA基因的成熟肽编码序列。将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,重组蛋白在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达;Western印迹分析表明表达产物具有良好的免疫学活性。; 展德文刘向昕陶好霞王令春张兆山; 关键词：炭疽杆菌保护性抗原

一种预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗: 本发明公开了一种预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗。该疫苗的活性成分为HP0762蛋白，所述HP0762蛋白的氨基酸序列如GenBank AccessionNo.ACM46115.1所示。首先通过反向疫苗学的方法从幽门螺...; 刘纯杰王涛陶好霞王令春袁盛凌展德文王芃王艳春; 文献传递

谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和雪腐镰刀菌烯醇的气相色谱分析被引量：7: 1989年; 本文建立了同时测定谷物中二种单端孢霉烯族毒索——DON和NIV的简便、灵敏的气相色谱方法.谷物用水打湿后,用氯仿-乙醇(8:2)提取,提取液旋转蒸发至干,残渣溶于丙酮中,经三甲基硅基咪唑衍生化后,用气相色谱外标法进行定量.; 胡绪英王令春曹金鸿; 关键词：赤霉病谷物 DON NIV 气相色谱

KBMA炭疽杆菌疫苗的研制: 炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)是一种能形成芽孢的革兰氏阳性菌,它引起的炭疽病是一种重要的人畜共患传染病。炭疽杆菌可通过皮肤、呼吸道、胃肠道三种方式侵害人类,严重影响人类的健康。目前我国主要使用减毒活...; 沈非袁盛凌展德文王艳春任敏陶好霞王芃王令春刘纯杰; 文献传递

肠毒素大肠杆菌定居因子CS6蛋白的纯化和抗体制备: 2004年; 将大肠杆菌E519/66A在CFA固体培养基上培养,收菌后经热水浴脱蛋白、硫酸铵分级盐析、超速离心及S-200柱纯化,获得了相对分子量约14600的高纯度CS6蛋白。用其免疫家兔,然后颈动脉采血。ELSIA法检测血清,测得效价为1∶32000。Western印迹证实CS6抗原蛋白可特异性结合抗CS6多克隆抗血清。本研究建立了分离纯化肠毒素大肠杆菌定居因子CS6抗原蛋白的有效方法;获得了高纯度的野生型定居因子抗原CS6蛋白及相应的多克隆抗血清。对于进一步研究肠毒素大肠杆菌腹泻疫苗具有重要意义。; 王令春罗刚李淑琴张兆山; 关键词：肠毒素大肠杆菌纯化抗体制备

大肠杆菌表面CS3菌毛展示随机肽库的构建: 2006年; 目的:在肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛表面构建 10肽随机肽库．方法:首先将原有的单酶切CS3菌毛呈现载体改造为双酶切载体,并证实改造后的载体能正确形成CS3菌毛．同时设计合成2条寡核苷酸序列,链1含有1个10肽随机编码序列(NNS)10, 链2可与链1的3′端互补．两条链经过退火、延伸、酶切和回收与经过同样酶切的呈现载体连接,连接产物纯化后分多次电击转化,获得随机肽库．随机挑选10个克隆进行测序并对测序结果进行分析．结果:获得1个库容量为1．8×106大小的随机肽库．测序结果显示,所构建肽库的基本框架与预期设计相符,4个寡核苷酸出现的频率也与理论值相接近．结论:在肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛表面成功构建库容量为1．8×106大小的10肽随机肽库．为下一步利用肽库进行筛选奠定了基础．; 刘向昕袁盛凌展德文郑继平刘纯杰王芃王令春张兆山; 关键词：随机肽库