王军平
- 作品数：181 被引量：546H指数：12
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划海外青年学者合作研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- TMP-GH融合蛋白研制及其抗辐射损伤作用研究
- 通过基因重组技术,将一种TPO模拟肽与人生长激素分子进行融合,在大肠杆菌中表达制备出一种具有高效升血小板作用的融合蛋白TMP-GH.体外细胞实验结果显示,该融合蛋白能够显著促进巨核祖/巨核细胞的增殖、分化及血小板前体生成...
- 王军平粟永萍许杨王崧王艾平申明强陈芳程天民
- 人α-防御素5在毕赤酵母中分泌表达的研究被引量：5
- 2008年
- 目的探索人α-防御素5成熟肽(mHD5)在酵母中高效分泌表达的可行性。方法PCR扩增获得酵母菌偏好的mHD5密码子序列,应用基因重组方法构建表达质粒,电击转化酵母菌株GS115,应用G418浓度梯度、表型和PCR技术筛选高拷贝转化株。经摇瓶发酵和甲醇诱导,Tricine-SDS-PAGE分析重组mHD5(rmHD5)表达量,并采用Westernblot鉴定。选用琼脂扩散法检测rmHD5的抑菌活性。结果构建了pPIC9K-mHD5酵母表达质粒。筛选得到3株His+/Mut+表型,且耐受8mg/mlG418的多拷贝转化酵母菌株,成功获得表达量约120mg/L的发酵上清。rmHD5对大肠杆菌(EC25922)和金黄色葡萄球菌(SA25923)2种标准菌株均具有明显的抑菌活性。结论防御素基因可以在毕赤酵母中实现分泌型离表达,此策略可能是抗菌肽工业化开发的有效途径之一。
- 王艾平粟永萍申明强王崧程天民王军平
- 关键词：防御素酵母表达生物活性
- 小鼠腹腔巨噬细胞趋化和吞噬功能中SRC-3的作用研究
- 2014年
- 目的探讨类固醇受体辅活化子(SRC)-3蛋白在脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞趋化和吞噬功能中的作用。方法健康SPF级雌性野生型(SRC-3+/+)小鼠、SRC-3基因敲除(SRC-3-/-)小鼠各5只,分别分离和原代培养腹腔巨噬细胞,并相应分为SRC-3+/+组和SRC-3-/-组。收集并调整细胞浓度为1×106/ml,接种于6孔板,1 ml/孔,给予10μg/ml LPS刺激,分别在刺激前(0 h)、刺激后4 h和12 h收集腹腔巨噬细胞。通过Western blot测定腹腔巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)的表达,并通过transwell趋化实验和中性红吞噬实验,分别测定腹腔巨噬细胞的趋化指数(CI)和吞噬功能。结果 LPS诱导前两组腹腔巨噬细胞TLR4的蛋白表达和CI差别无统计学意义,但SRC-3-/-组的吞噬功能显著低于SRC-3+/+组(P<0.01);无论是SRC-3+/+组,还是SRC-3-/-组,LPS诱导4 h和12 h后,两组腹腔巨噬细胞TLR4的表达和CI均显著增高(P<0.01),但在相应时间点,SRC-3-/-组与SRC-3+/+组相比差别无统计学意义。LPS刺激4 h后,两组吞噬功能均显著增加(P<0.01),但SRC-3-/-组增加的程度显著低于SRC-3+/+组(P<0.01);相反,LPS刺激12 h后,两组吞噬功能均受到不同程度的抑制(P<0.05或P<0.01),且SRC-3-/-组较SRC-3+/+组抑制的程度更低(P<0.01)。结论 SRC-3调节腹腔巨噬细胞的先天性免疫功能可能与吞噬功能有关,而与其趋化功能无关。
- 李军白树荣林露安虹孙阳阳易晓波刘英海王军平粟永萍
- 关键词：腹腔巨噬细胞TOLL样受体4趋化
- 防原医学实验课中培养学员创新能力的几点思考被引量：4
- 2013年
- 创新能力是推动社会不断发展的根本动力,如何培养出基础理论功底扎实、创新能力强的医学专业本科生是现代医学本科教育必须认真思考的重要命题。实验课教学是联系理论与实践的桥梁,其不仅是对基础理论知识的强化与验证,
- 刘登群李蓉王军平史春梦冉新泽粟永萍
- 关键词：防原医学实验课
- 大鼠肾小球内皮细胞培养及高糖对其分泌NO的影响被引量：5
- 2007年
- 目的进行大鼠肾小球内皮细胞体外培养和鉴定,并观察高糖对其分泌一氧化氮(nitricoxide,NO)的影响。方法利用不同目数的筛网从大鼠肾皮质分离肾小球,Ⅳ型胶原酶消化后用内皮细胞培养液培养。待细胞自肾小球内长出,以套环或挑克隆的方法纯化,在倒置显微镜下观察细胞形态,分别用Ⅷ因子相关抗原抗体和CD31荧光抗体对纯化后的细胞进行鉴定。不同浓度的高糖作用于培养的肾小球内皮细胞,Griess法检测各时相点培养液中NO的含量。结果倒置显微镜下观察纯化后的细胞为单层排列,似鹅卵石状,Ⅷ因子相关抗原抗体免疫组化染色和CD31荧光抗体染色阳性。高糖可以引起肾小球内皮细胞NO分泌减少,并呈浓度和时间依赖性。结论利用过筛法分离肾小球并在特定条件下进行培养、纯化,成功培养大鼠肾小球内皮细胞。高糖可以导致肾小球内皮细胞NO释放减少,这可能与糖尿病肾病的发生有关。
- 赵景宏黄岚王军平晋军宋耀明方玉强崔斌于世勇
- 关键词：肾小球内皮细胞高糖一氧化氮
- 中药膏剂“CYG”促猪大面积全厚皮肤缺损创面愈合的研究
- 2009年
- 目的观测中药膏剂"CYG"对大面积全厚皮肤缺损创面的促愈效果并探讨其促愈机制。方法贵州小型猪7只,每只背部脊柱两侧近脊柱均有全厚皮肤缺损创面(大小10.5cm×8.5cm)各2个,共28个创面。右侧的14个创面用中药膏剂"CYG"治疗作实验组,同体左侧创面作对照。观察伤后7周内各创面愈合时间、愈合率及愈合过程病理变化,并通过S-P法层粘蛋白(Laminin)免疫组化染色观测其肉芽组织内血管生成变化,免疫组化染色、RT-PCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor beta one,TGF-β1)表达。结果伤后7～44d,治疗组与对照组创面平均残留面积及愈合残留面积百分率比较,差异有统计学意义(P<0.01),治疗组于伤后32～34d完全愈合,较对照组提前10～12d,且创面质地细腻、平整。愈合过程中治疗组肉芽组织生长早且旺盛,肉芽组织中Laminin、成纤维细胞、毛细血管及胶原含量丰富;治疗组各时相点创面TGF-β1表达较对照组低,同组TGF-β1表达:中期(伤后15～35d)>早期(伤后7～14d)>晚期(伤后66～49d)。结论中药膏剂"CYG"对大面积全厚皮肤缺损创面有良好促愈作用,且创面愈合质量高,并可能对创面瘢痕形成具抑制作用。
- 闫国和侯爱莲孙慧勤廖彬方海立程天民王军平粟永萍
- 小鼠微小RNA miR-22真核表达载体的构建及功能初步研究
- 2007年
- 目的从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段并克隆到pIRES2-EGFP,构建miR-22的真核表达载体。方法利用PCR技术从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段,克隆到质粒pUCm-T,测序正确后构建到真核表达载体pIRES2-EGFP中,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定,并进行序列测定。脂质体Li-pofectamin2000法转染Hela细胞后G418筛选获得稳定转染克隆,提取总RNA,通过RT-PCR方法对neo片段进行鉴定,采用Northern blot技术检测miR-22的表达。结果PCR扩增得到的334bp片段与预期的miR-22前体对应的基因组片段序列一致;成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/miR-22,测序结果正确。重组质粒转染Hela细胞后,经G418筛选成功获得阳性克隆。Northern blot分析显示miR-22在Hela细胞内高效表达。结论本实验成功克隆了miR-22的前体对应的基因组片段,构建其真核表达载体,并在Hela细胞内获得高表达,为深入研究微小RNA miR-22的功能奠定了基础。
- 张炜炜王涛艾国平粟永萍王军平邹仲敏邓均董世武
- 关键词：微小RNA真核表达载体基因组片段HELANORTHERNBLOT
- 安定-氯胺酮麻醉对烧伤小鼠早期三种炎性细胞因子影响被引量：13
- 2004年
- 目的 研究安定 氯胺酮麻醉对烧伤小鼠早期炎性细胞因子的影响 ,初步探讨其对创伤应激早期炎症反应的调节作用。方法 雄性BALB c小鼠 ,随机分为正常对照组、烧伤对照组、麻醉对照组、预处理组 (麻醉后 15min烧伤 )及后处理组 (烧伤后 15min麻醉 )。麻醉采用安定 氯胺酮麻醉 ,背部 15 %～ 2 0 %Ⅲ度烧伤。烧伤后 4h测定血清TNF α、IL 1β、IL 10浓度。结果 烧伤后血清TNF α、IL 1β、IL 10水平均比正常对照组显著增高 ;预处理组与后处理组血清TNF α、IL 1β、IL 10的浓度明显低于烧伤对照组 ;预处理组除IL 10明显高于正常对照组以外 ,其余均与正常对照组相差不明显 ,而后处理组只有TNF α水平与正常对照组相差不显著 ,其余都显著高于正常对照组 ;血清中IL 1β后处理组明显高于预处理组 ,而TNF α、IL 10的水平两组相差不显著。结论 安定 氯胺酮麻醉对严重创伤后炎性细胞因子的表达和释放有一定抑制作用 。
- 李军粟永萍刘合年楼淑芬黄跃生蒋建新王军平
- 关键词：烧伤炎性细胞因子氯胺酮
- 大鼠严重烫伤早期糖皮质激素受体改变及其调控的分子机制研究
- 严重创伤多为突发事件，应激反应是严重创伤后机体的首发反应，目 的是使机体抵抗力增强、尽快恢复内稳态。然而，由于严重创伤对机体的 刺激过于强烈，机体往往不能作出适度的应激反应，而产生应激反应过度 或应激反应低下的内稳态紊乱...
- 王军平
- 关键词：烫伤核转位皮质酮糖皮质激素热休克蛋白90
- 文献传递
- LiCl对大鼠MSCs的动员效应及动员后细胞的分化潜能研究
- 2008年
- 为探讨LiCl动员间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的效应及动员后细胞的神经分化潜能.用LiCl动员大鼠后,以CFU-F分析其动员效应,从形态学、表型分子的检测等对动员MSCs鉴定.用β-巯基乙醇和神经元原代培养上清液诱导动员后MSCs向神经元分化.结果表明,CFU-F分析显示LiCl可有效动员外周血MSCs,形态学、表型分子等实验证实动员的细胞为MSCs,并可被β-巯基乙醇和神经元原代培养上清液诱导,表达神经元特异标志分子NSE,NF,Nestin和NeuN.全细胞膜片钳记录到诱导后的MSCs有内向钠电流.研究表明,循环MSCs可被LiCl动员,并在一定的环境下向神经元细胞分化,这为神经损伤的修复提示了广阔的前景.
- 邓均邹仲敏周桃莉艾国平王军平徐辉董世武粟永萍
- 关键词：间充质干细胞动员外周血
