王团结
- 作品数:36 被引量:45H指数:4
- 供职机构:中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市科技计划项目北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 猫传染性腹膜炎病毒实时荧光定量PCR方法的建立与应用
- 2023年
- 为建立一种高效准确检测猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的实时荧光定量PCR方法,以FIPV N基因为靶基因设计特异性探针和引物,构建质粒标准品。通过优化反应条件,建立real-time PCR方法,并进行临床检测。经方法优化,所建立方法的标准曲线为y=-3.137x+42.243,R^(2)值为0.999,扩增效率E为108.0%。该方法与猫瘟病毒(FPV)、猫疱疹病毒(FHV)和猫杯状病毒(FCV)无交叉反应,特异性良好;检测最低拷贝数为9.250 copies/μL,比常规PCR方法高出100倍;组内、组间变异系数均小于5.0%,重复性好。采用建立的方法和EvaGreen real-time PCR方法对39份临床样品进行检测,结果,检出阳性样品数分别为24和22,经Kappa检验,两者高度一致。上述结果表明,本研究成功建立了高效、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,可用于FIPV的临床病例检测。
- 刘妍黄金龙杜吉革朱真朱真陈小云王团结罗玉峰孙卫东
- 关键词:实时荧光定量PCR
- 猪瘟病毒中等致病力毒株在体内的动态分布被引量:1
- 2018年
- 【目的】目前我国猪瘟的感染类型主要是亚急性感染及慢性感染,研究猪瘟亚急性感染后体内病毒RNA和蛋白的分布情况,有助于阐述亚急性病程猪瘟病毒的复制分布规律,为猪瘟的早期诊断和预防奠定重要基础。【方法】成功以中等致病力毒株(HeBHH1/95)构建了亚急性猪瘟感染动物模型,分别采集感染后第1、3、6、10、13、20、24、28天感染猪的十二指肠、脾脏、肾脏、肺脏、胰、回盲瓣6种组织器官并进行连续切片。应用建立的猪瘟病毒可视化原位杂交技术(ViewRNA ISH)研究感染组织中病毒RNA动态分布,同时采用免疫组化(IHC)、H.E染色分别检测感染组织中蛋白的分布情况及其组织损伤位置,从而在病毒核酸和蛋白水平系统性的观察病毒的分布情况。【结果】采用Mittelholzer方法进行临床计分发现感染后6—10 d感染猪猪瘟临床症状记分迅速增加,11—26 d感染猪临床记分一直维持在15分左右,直到28 d临床记分达到最高值20分。感染后8—10 d感染猪体温呈上升趋势;13—24 d感染猪体温呈现稽留热,持续在40℃左右;此后体温开始回落,至濒死前体温回落至39.5℃左右。应用CSFV ViewRNA ISH感染后第1天在十二指肠绒毛杯状细胞及胰腺的腺泡、回盲瓣的固有层、肾脏的肾小管等这些具有分泌功能的结构组织周围检测到病毒RNA阳性信号;感染后第3天在肺脏的细支气管和脾脏的椭圆体周围检测到病毒RNA阳性信号;第13天阳性信号富集显著,至第28天病毒RNA广泛分布在脾脏动脉周围淋巴鞘及胰腺腺泡和肾小管等组织周围。采用IHC和H.E染色法在连续切片的相似视野下验证ViewRNA ISH检测结果,发现感染后第1天十二指肠、胰腺、肾脏亦可检测到病毒蛋白阳性信号和相应组织的病理变化,但回盲瓣在第3天检测到病毒蛋白阳性信号和组织的病理变化,在之后的病程中各组织中病毒RNA、蛋白定位情况�
- 孙骏翔张乾义徐和敏王团结徐璐邹兴启朱元源李翠夏应菊徐嫄陈锴张玉杰赵启祖王琴
- 关键词:猪瘟病毒RNA
- 犬细小病毒BJ06/06株致病模型的初步建立
- 2023年
- 犬细小病毒在全国乃至世界范围内广泛流行,而现阶段常用的疫苗对新变异毒株的预防效果并不理想。在新型疫苗的研发过程中,亟需建立评价动物免疫效果的流行毒株攻毒标准。通过对比格犬进行犬细小病毒流行毒株的人工感染试验,从临床症状、血液生化和病理变化等对患病犬进行多维度的综合评价。结果显示,患病犬均表现出了典型的体温升高、呕吐、精神沉郁、腹泻、血便等临床症状,白细胞数量显著降低,血浆白蛋白含量降低、碱性磷酸酶和血清磷含量升高,且不同攻毒剂量组间有显著差异。本研究初步建立了犬细小病毒(BJ06/06株)的致病模型,接种方式为每只比格犬灌服5 mL病毒液(104.5 TCID 50/0.1mL),同时左右后肢各肌肉注射1 mL病毒液。本模型为后续犬细小病毒病新型疫苗的研发和免疫效果评价提供了参考依据。
- 赵洋杜吉革朱真刘妍黄金龙王团结罗玉峰印春生
- 关键词:犬细小病毒流行毒株临床症状血液生化病理变化
- 禽结核菌素生产用菌种的制备与鉴定
- 2023年
- 为制备禽结核菌素国家标准品,研究禽结核菌素生产用菌株禽分枝杆菌的菌种特性,对1992年冻干保存的3株菌CVCC68201、CVCC68202和CVCC68203进行复苏,采用SPF鸡复壮,分离培养后冻干了新批次菌种,对菌种形态、生化特性、培养特性、毒力和抗原性进行了鉴定。结果表明,制备的菌种纯粹,形态、生化和培养特性符合禽分枝杆菌的生物学特征,免疫原性符合的兽用生物制品质量标准的规定。本研究为禽分枝杆菌的鉴定提供参考,也为制造禽结核菌素的工艺改进奠定基础。
- 王楠辛凌翔徐磊程君生王团结任小侠毛开荣李俊平
- 新型重组H7N9禽流感研究进展被引量:3
- 2018年
- H7N9禽流感病毒是威胁人类健康的主要病原之一,自2013年3月爆发至2018年3月,已造成1438人感染,病死率高达39.63%。从H7N9病毒的生物学特性和遗传演化分析、H7N9病毒流行病学调查数据、病毒致病机制方面综合系统地对H7N9禽流感的综合防控措施进行综述,预测H7N9存在人际传播的可能性,以期为新型H7N9流感病毒的监测和预防提供参考。
- 赵俊杰王团结姚文生康凯陈耀星徐和敏张乾义何伟勇
- 关键词:生物学特性流行病学调查
- 个人防护装备在高等级兽医生物安全实验室中的使用原则被引量:2
- 2019年
- 兽医生物安全实验室的个体防护包括个体防护装备和防护操作程序,其中个体防护装备是用于防止实验室工作人员受到生物性、化学性或物理性等危害因子伤害,而穿戴和配备的器材和用品的总称。实验室内不同区域面对生物因子的暴露风险等级不同,导致各区域的防护级别不同,因此应采取相应的防护措施,选择适合的个人防护装备。
- 吴思捷李增顺康凯姚文生张媛李宁王团结张一帜万建青王利永
- 关键词:兽医生物安全个体防护装备
- 单色光对鸡胚肝脏发育和IGF-1分泌的影响及其作用的信号通路
- 前期研究证实不同波长的单色光能够影响孵化期鸡胚骨骼肌卫星细胞的增殖与分化。而类胰岛素生长因子IGF-1是调控肌肉生长发育的重要因子,但是光色信息对鸡胚肝脏IGF-1分泌的影响及其作用机理尚不清楚。本研究利用鸡胚孵化期间给...
- 王团结
- 关键词:单色光鸡胚肝脏IGF-1
- 不同波长光照对鸡胚肝脏褪黑激素受体表达的影响
- 本研究旨在探究不同波长光照对鸡胚肝脏褪黑激素受体表达的影响。选用AA肉鸡鸡胚,按试验要求随机分为5组,蛋壳上的光照强度为151x,在E21取肝脏用于PCR、Westernblot和免疫组化研究。结果表明,在鸡胚孵化期给予...
- 王团结王子旭董玉兰曹静陈耀星
- 关键词:光波长鸡胚褪黑激素
- 不同波长光照对鸡胚肝脏褪黑激素受体表达的影响
- 本研究旨在探究不同波长光照对鸡胚肝脏褪黑激素受体表达的影响。选用AA肉鸡鸡胚,按试验要求随机分为5组,蛋壳上的光照强度为151x,在E21取肝脏用于PCR、Westernblot和免疫组化研究。结果表明,在鸡胚孵化期给予...
- 王团结王子旭董玉兰曹静陈耀星
- 关键词:光波长鸡胚褪黑激素
- 文献传递
- 生物安全三级实验室生物安全风险点的识别与控制?被引量:4
- 2019年
- BSL-3实验室须经国家生物安全认可和严格的实验活动审批才能开展相应活动,是国家(地区)开展高致病性病原微生物实验活动的重要技术支撑平台。实验室生物安全风险点易发生在样本及菌毒种的接收、传递和保存,动物实验,污水以及固体废弃物处理等环节,而实验室的意外事件(电力故障、火灾、积水等)与生物安保漏洞也会造成重大的生物安全事故。提示应准确地识别风险并通过人员日常监管、标准操作规程、两级屏障设施和个人防护装备等系列措施对生物安全风险点予以严格控制。
- 王团结姚文生康凯万建青王利永李阳赵俊杰
- 关键词:动物实验