王小艳
- 作品数：13 被引量：51H指数：4
- 供职机构：北京理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 一种定向生物合成GAMG的方法
- 本发明为一种定向生物合成GAMG的方法，属于生物合成与生物转化技术领域。本发明的方法是利用产紫青霉菌在发酵培养基中生产相应的β－D－葡萄糖醛酸苷酶，然后将所获的β－D－葡萄糖醛酸苷酶加入含有甘草酸底物的转化液中，在酶的作...
- 李春王小艳邹树平冯世江戴大章
- 文献传递
- Penicillium purpurogenum Li-3产β-葡萄糖醛酸苷酶的研究及其在毕赤酵母中的初步表达
- 产紫青霉P. purpurogenum Li-3所产β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS)具有高度底物特异性,能定向水解甘草酸(GL)生成单葡萄糖基甘草次酸(GAMG),但该菌株产酶过程中存在碳代谢阻遏现象影响目标酶的表达与总活...
- 郭晓晓王小艳李春
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶毕赤酵母真核表达酶学性质
- 文献传递
- β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化多样性及定向合成GAMG的酶基因克隆与表达
- 通过筛选和甘草酸转化结果分析，得到了三种不同转化类型的真菌，利用分子生物学和形态学方法进行了菌株鉴定，并对其进行了催化特性和催化动力学研究，针对定向合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的Penicillium sp．L...
- 王小艳
- 关键词：甘草酸酶活性
- 文献传递
- 产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因的克隆与原核表达被引量：14
- 2008年
- 产紫青霉(Penicillium purpurogenum Li-3)β-葡萄糖醛酸苷酶可定向转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸。根据β-葡萄糖醛酸苷酶氨基酸序列的同源保守区设计简并引物,PCR扩增克隆得到β-葡萄糖醛酸苷酶编码基因pgus(GenBank登录号:EU095019),该基因全长1815bp,编码604个氨基酸,理论单亚基分子量为67.77×103,含有4个潜在的N-糖基化位点。构建原核表达载体pET-28a(+)-pgus,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达pgus基因的重组菌。经IPTG诱导表达、Ni2+-NTA亲和层析柱纯化的重组酶PGUS-E,纯度达到95%以上,得率为25.6mg·L-1,SDS-PAGE分析检测分子量约为70×103,比酶活达到6368U·mg-1。
- 宋占科王小艳陈国强李春
- 关键词：甘草酸Β-葡萄糖醛酸苷酶克隆
- 真菌产3种β-D-Glucuronidase酶学性质被引量：16
- 2007年
- 分离筛选到能代谢甘草酸并产生不同产物的3株菌株,其中Penicillium sp.Li-3转化甘草酸生成GAMG,As-pergillus sp.Li-20生成GAMG和甘草次酸,Aspergillus sp.Li-62生成甘草次酸。对这3株菌表达β-D-葡萄糖醛酸苷酶的酶学性质进行了研究,结果表明：Penicillium sp.Li-3、Aspergillus sp.Li-20和Aspergillus sp.Li-62β-D-葡萄糖醛酸苷酶最适催化pH分别为4.2~4.6,5.8和6.2,最适催化温度为50、45和55℃。Penicillium sp.Li-3表达的β-D-葡萄糖醛酸苷酶Km为0.328μmol/L,Vmax为0.003 5 mmol/（L.min）;Aspergillus sp.Li-20β-D-葡萄糖醛酸苷酶Km为3.61 mmol/L,Vmax为0.034 mmol/（L.min）;而Aspergillus sp.Li-62β-D-葡萄糖醛酸苷酶Km为0.43 mmol/L,Vmax为0.106 mmol/（L.min）。
- 王小艳冯世江文先军李晖李春
- 关键词：酶学性质多样性甘草酸
- 一种人工设计糖基修饰提高酶热稳定性的方法
- 本发明提供了一种人工设计糖基修饰提高酶热稳定性的方法，属于生物工程领域。本发明通过对酶蛋白一级序列及空间结构进行组合分析，在酶蛋白亚基结合面上设计N-糖基化位点，或在其亚基内部模体结合面上设计N-糖基化位点，利用定点突变...
- 李春王小艳冯旭东樊艳爽
- 文献传递
- 葡糖酸苷酶生产菌株的筛选及其酶学特性的研究被引量：25
- 2007年
- 以生物合成单葡糖苷酸基甘草次酸为目的,建立了一种合成单葡糖苷酸基甘草次酸生物催化剂的筛选方法,并筛选到一株青霉菌属真菌,表达的葡糖酸苷酶具有高度底物特异性,能定向水解甘草酸生成单葡糖苷酸基甘草次酸,且研究了其酶学特质。结果表明:该催化反应的活化能Ea为116.072kJ·mol-1,反应动力学常数Km为0.328mmol·L-1,最大反应速度Vmax为3.53×10-3 mmol·L-1·min-1。催化体系的最适反应温度为50℃,最适反应pH为4.2。该催化剂在45℃以下较稳定,pH稳定性维持在4.6～5.8,Mg2+对催化活力有一定促进作用,而Cu2+、Fe2+、Fe3+、Ag+有较大抑制作用。
- 冯世江李春李晖王小艳
- 关键词：生物合成酶学性质
- 产紫青霉中β-葡萄糖醛酸苷酶的诱导表达被引量：3
- 2012年
- 针对产紫青霉(Penicillium purpurogenum)Li-3发酵生产β-葡萄糖醛酸苷酶存在的碳代谢阻遏现象,研究β-葡萄糖醛酸苷酶的高效诱导表达策略。在发酵条件优化的基础上,建立了新的产酶诱导工艺:葡萄糖的初始质量浓度5 g/L,在葡萄糖耗尽时加入20%诱导剂(10 g/L GL+1.2%Tween80)进行诱导,每24 h添加1次诱导剂,诱导72 h后立即转到40℃摇床发酵48 h。采用该工艺进行发酵,菌体出现了"二次生长"现象,比酶活从647.99 U/mL提高至2 356 U/mL,提高了近3倍。
- 郭晓晓王小艳冯世江李春
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶
- 利用Penicillium sp.Li-3菌株生物合成β-D-单葡萄糖苷酸基草次酸产酶特性的研究
- 甘草酸(glycyrrhizin,GL)是一种重要的天然甜味剂和药物,但对人体有一定副作用。甘草酸经生物改性后的制品β-D-单葡糖苷酸基甘草次酸(Glycyrrhetinic acid monoglucuronide,G...
- 李春冯世江王小艳
- 关键词：产酶特性
- 文献传递
- 金笋、甘薯保健酸凝乳发酵技术的研究被引量：2
- 2005年
- 以胡萝卜及甘薯的原浆、牛乳为乳酸菌的发酵基质,经加工处理、调配后进行乳酸发酵,通过正交试验确定其最适的工艺条件。结果表明:牛乳用量为75%,甘薯浆与胡萝卜汁的体积比为2∶1,糖用量5%,前发酵温度为40.5℃,前发酵时间为7.5h,接种量为5%时,制得的胡萝卜、甘薯发酵酸奶的凝乳状态、口感、色泽、风味最好。
- 冯世江徐小琳刘忆冬张根林王小艳
- 关键词：甘薯发酵技术酸凝乳保健乳酸发酵发酵酸奶
