王小非
- 作品数：83 被引量：184H指数：7
- 供职机构：山东农业大学园艺科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家苹果产业技术体系建设专项山东省农业良种工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 苹果乙烯响应因子MdERF3促进花青苷和原花青苷积累被引量：11
- 2019年
- 以’嘎拉’苹果(Malus×domestica’Royal Gala’)为材料,克隆乙烯响应因子(Ethylene Response Factor 3)基因MdERF3。构建酵母载体pGBKT7-MdERF3和原核表达载体PET32a-MdERF3,酵母转化试验表明,MdERF3转录因子具有转录激活活性。电泳迁移率试验分析显示,MdERF3-HIS原核诱导蛋白能够直接结合GCC和DRE序列。构建pCAMBIA1300-MdERF3超表达载体,转化苹果愈伤组织和拟南芥植株,并瞬时转化苹果叶片,转基因材料花青苷和原花青苷积累显著高于野生型。以上结果表明MdERF3转录因子具有转录激活活性以及对GCC和DRE序列的结合能力;MdERF3在调控花青苷和原花青苷积累过程中发挥重要作用。
- 毕思琦安建平王小非郝玉金芮麟李彤韩月彭由春香
- 关键词：苹果ERF花青苷
- 一种低温冷冻研磨机
- 本实用新型公开了一种低温冷冻研磨机，属于研磨机领域，一种低温冷冻研磨机，包括工作台，工作台上固定连接有壳体和导轨，壳体的内壁上铺设有保温层，壳体的底端固定连接有制冷装置，导轨内转动连接有螺纹杆5，滑轨的上端固定连接有与螺...
- 郝玉金冯资权由春香孙卫健王小非
- 文献传递
- 苹果生长素响应因子(MdARF)基因克隆与表达分析被引量：4
- 2018年
- 【目的】克隆苹果(Malus domestica‘Zihong Fuji’)MdARF基因,研究其在生长素和逆境处理下的表达特性。【方法】以‘紫弘富士’叶片c DNA为模板,采用RT-PCR技术克隆得到10个MdARF基因;运用Array技术检测MdARF在不同组织中的表达特性;运用qRT-PCR技术检测MdARF在生长素、盐和甘露醇处理条件下的表达特性。【结果】克隆得到10个MdARF基因(MdARF4-13,GenBank登录号为MG021615~MG021624),其开放阅读框分别为2 136、3 345、2 052、2 400、2 532、2 691、1 782、2 532、3 342和2 034 bp。进化分析表明,MdARF3/7属于AtARF3/4-like,MdARF4/10属于AtARF10/16/17-like,MdARF1/6/11/13属于AtARF1/2-like,MdARF5/9/12属于AtARF5/7/19-like,MdARF2/8属于AtARF6/8-like。亚细胞定位预测分析表明,10个MdARF蛋白均定位于细胞核。MR结构域氨基酸组成预测分析表明,MdARF2/5/8/9/12可能为转录激活子,MdARF1/3/4/6/7/10/11/13可能为转录抑制子。Array结果显示,MdARF在被检测的组织中均有表达。在IAA处理条件下,MdARF1/7/9/10转录水平受到诱导,MdARF2/3/4/6/8/11/12转录水平降低;在盐处理条件下,MdARF9转录水平受到诱导,而MdARF1/5/7/10/12/13转录水平下调;在甘露醇处理条件下,MdARF6/9转录水平受到诱导。【结论】克隆得到10个MdARF基因,其表达水平受IAA、盐或甘露醇诱导或者下调,可能参与调控生长素信号转导以及逆境响应等过程。
- 李慧峰张文芹董庆龙王小非冉昆
- 关键词：苹果
- 苹果细胞分裂素O–糖基转移酶基因MdZOG1的分离与功能鉴定被引量：4
- 2016年
- 以‘嘎拉’苹果为材料,采用同源克隆和PCR技术分离了苹果细胞分裂素O–糖基转移酶基因MdZOG1。MdZOG1的开放阅读框(ORF)长度为762bp,编码含有253个氨基酸的蛋白。系统进化树分析显示,MdZOG1与PbZOG1亲缘关系最近。基因表达分析显示MdZOG1主要在苹果根和茎中表达,在花和果实中的表达量较低。通过农杆菌介导的遗传转化获得转MdZOG1拟南芥和烟草。干旱处理试验结果显示:超量表达MdZOG1显著提高拟南芥和烟草植株的抗旱能力,表明苹果细胞分裂素O–糖基转移酶在植物抗旱胁迫中发挥重要作用。
- 安建平宋来庆赵玲玲由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果
- 苹果RING E3连接酶MdMIEL1通过泛素化降解MdMYB1抑制花青积累
- MdMYB1是调节花青苷积累和果实着色的关键转录因子.本文中,我们通过酵母双杂筛库的方法筛选到一个与MdMYB1互作的E3泛素连接酶MdMIEL1.Pull-down,双分子荧光互补(BIFC),免疫共沉淀(CO-IP)...
- 安建平刘鑫李浩浩由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果花青苷泛素化ROS
- 苹果MdCYP707A家族基因表达分析和MdCYP707A1的功能鉴定被引量：7
- 2019年
- 对苹果MdCYP707A家族4个成员的蛋白序列进行比对,并进行保守结构域分析发现,MdCYP707A家族成员都含有细胞色素P450单加氧酶结构域。利用荧光定量PCR检测其在苹果不同组织(根、茎、叶、花、果实、种子)中的表达,4个基因在种子中的表达量最高,并且在果实发育不同时期的表达量有明显差异。在苹果种子吸水膨胀和层积过程中的表达分析表明,MdCYP707A家族成员参与了种子萌发过程中ABA的降解。通过检测MdCYP707A基因对不同非生物胁迫(干旱、盐、渗透胁迫)和对ABA的响应,初步认为其在种子萌发中有重要作用,其中,MdCYP707A1对ABA的响应最为明显。另外,利用农杆菌介导的遗传转化的手段,鉴定了MdCYP707A1基因在苹果愈伤组织和拟南芥中的功能,过表达MdCYP707A1能够降低对非生物胁迫的抗性,说明其可能参与ABA的降解过程,同时在拟南芥中异源表达MdCYP707A1能够提高拟南芥种子的萌发率。
- 张婷婷康慧付璐璐由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果非生物胁迫
- 一种苹果MdNRT2,4‑1基因及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种苹果中一种促进硝酸盐吸收的MdNRT2,4‑1基因及其应用，所述MdNRT2,4‑1基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，利用强启动子驱动原理的转基因技术，将MdNRT2,4‑1基因的超量表达载体转...
- 王小非郝玉金刘鑫
- 文献传递
- 苹果多肽激素及其编码基因MdCEP1调控拟南芥根系发育被引量：2
- 2017年
- 植物多肽激素是一类经剪切后形成具有特殊功能的成熟的多肽。以‘嘎拉’苹果(Malus×domestica‘Royal Gala’)为研究试材,初步探讨多肽激素C-TERMINALLY ENCODED PEPTIDE1(CEP1)调控根系生长发育的机理,为苹果多肽激素的研究奠定基础。扩增获得多肽激素基因MdCEP1(MDP0000886459),其开放阅读框为366 bp,编码121个氨基酸。进化树分析表明,苹果MdCEP1与白梨的PbCEP1亲缘关系最近。表达分析显示MdCEP1在苹果根和茎中表达量最高,在叶和果实中相对较低;基因表达响应显示MdCEP1表达受到生长素的调控,低浓度生长素明显上调,而高浓度生长素显著抑制MdCEP1表达。外施人工合成小肽MdCEP1p^(Hyp)对拟南芥根系发育起到明显抑制作用,主根变短,侧根数减少。在拟南芥中异位表达MdCEP1,同样表现出主根变短,侧根数减少。qRT-PCR分析结果显示,外源MdCEP1p^(Hyp)处理和过表达MdCEP1均明显抑制了拟南芥根系生长素合成与转运相关基因的表达。研究结果表明MdCEP1在根系生长发育过程中起到了负调控作用。
- 李睿李浩浩安建平由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果多肽激素根系生长发育
- 用于得到对盐胁迫具有增强抗性的植物的质粒载体和方法
- 本发明涉及一种用于得到对盐胁迫具有增强抗性的植物的质粒载体，其特征在于，包含MdRCD1基因表达框和筛选标记，所述MdRCD1基因表达框由包含在植物中组成型表达的强启动子和由所述强启动子控制表达的MdRCD1基因，所述M...
- 郝玉金王小非李浩浩由春香
- 文献传递
- 苹果细胞分裂素氧化酶基因MdCKX7.2的克隆及抗性鉴定被引量：2
- 2019年
- 采用同源克隆和PCR技术从‘嘎拉’苹果(Malus×domestica Borkh.)中克隆细胞分裂素氧化酶基因MdCKX7.2(基因序列号:MDP0000279125)。该基因含有1 542 bp的完整开放阅读框,编码513个氨基酸。利用Plant CARE数据库对MdCKX7.2启动子顺式作用元件进行预测分析,发现MdCKX7.2启动子序列中存在光、干旱、脱落酸、水杨酸、茉莉酸甲酯等响应元件。基因表达分析发现,‘嘎拉’幼苗中MdCKX7.2的表达明显受干旱和ABA的诱导。通过农杆菌介导的遗传转化获得MdCKX7.2转基因拟南芥植株。抗性试验表明,异位表达MdCKX7.2基因明显提高了拟南芥对干旱胁迫的抗性。拟南芥种子萌发试验表明,在拟南芥中异位表达MdCKX7.2提高了植株对ABA的敏感性,种子萌发率和幼苗鲜质量明显下降,与种子萌发相关基因的表达量明显上调。以上试验结果表明,MdCKX7.2在植物非生物胁迫响应中发挥重要作用。
- 姚继芳安建平由春香王小非郝玉金
- 关键词：苹果基因克隆非生物胁迫耐旱性
