王林定
- 作品数：25 被引量：38H指数：4
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- HCMV重组嵌合抗原表达质粒构建及免疫反应的初步鉴定
- 2014年
- 目的选用人巨细胞病毒(HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒,诱导其表达,纯化目的蛋白;并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列,设计合理引物;各基因片段用Overlap方法连接,并引入BglⅡ、BamHⅠ酶切位点,使之可通过酶切与质粒pQE-80L连接。重组质粒转化入感受态BL21(DE3)菌株,经PCR、酶切鉴定目的基因后再诱导、表达、纯化,获得目的蛋白,采用Western blot法检测免疫反应性。结果诱导后的重组菌pQE80-L-UL32-UL44-UL83经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证实蛋白表达在包涵体。纯化后获得大小约为52 ku的目的蛋白,采用Western blot法检测证实重组嵌合抗原能与HCMV阳性血清有反应。结论构建了重组嵌合抗原表达质粒,并诱导、表达、纯化获得目的蛋白。Western blot法鉴定嵌合抗原是HCMV特异性抗原且有免疫反应性。
- 曾宪聪汪小五陈伟王林定
- 关键词：人巨细胞病毒免疫反应性
- 基于SpringBoot的病原生物学在线智能化实验考试系统建设探索
- 2023年
- 目的:本文介绍了在局域网基础上基于SpringBoot的病原生物学在线智能化实验考试系统的设计与实现。力求解决传统的病原生物学实验考试局限于时间、地点、考试标本等问题。方法:系统采用B/S架构设计,界面简洁、操作明了。可实现在线自动组卷、在线答题、自动阅卷、成绩查询、查看错题等功能。结果:该系统可实现在同一时间、不同地点、不同专业考生同步完成实验考试,同时该系统的防作弊功能,保障了实验考试的公平性和公正性。通过该考试系统,不仅为学生提供了更好的考核、考评方式,还跨越了时间、空间的限制,节省了资源,提高了实验教学效果。结论:该系统的建设保障了病原生物学实验考试的需要,丰富实验教学手段,改革考评机制,促进实验教学考核方式改革,提高了实验教学效果。
- 唐媛媛王晓楠李京培刘莉茵李群王林定
- 关键词：病原生物学实验教学在线考试系统教学改革
- 肠道病毒71型六安地区分离株VP1基因的生物信息学分析及B细胞表位预测被引量：10
- 2012年
- 目的对肠道病毒71型(EV71)VP1基因编码衣壳蛋白进行系统结构与功能预测,为制备EV71疫苗和诊断抗原的研究提供理论基础。方法基于编号为1404-Luan(CHN)-08的EV71六安地区分离株VP1基因编码蛋白的氨基酸序列,应用ProtParam、SigalP、TMPRED、Sosui、SOPMA、Phyre、Bepipred等生物信息学方法预测其信号肽、跨膜区、疏水性、二级结构、三级结构等性质和潜在的B细胞表位。结果 EV71六安地区分离株VP1基因编码蛋白没有信号肽,无跨膜区,是一个亲水性蛋白;VP1蛋白二级结构以无规则卷曲和β-片层为主,含有少量的α-螺旋,少见β-转角;VP1的三级结构中4～121氨基酸部分在蛋白表面形成一环状结构(VPl GH loop);EV71 VP1潜在的B细胞表位共有6个可能的抗原表位。其中,预测分值最高的线性表位区域位于157～177位氨基酸残基。结论成功预测了EV71六安地区分离株VP1二级结构、三级结构和B细胞表位,为制备EV71基因工程疫苗和诊断抗原的开发提供了理论基础。
- 俞海洋陈伟倪德群常宏伟王林定汤仁树陈灵芝丁晓娟陈敬贤王明丽
- 关键词：肠道病毒71型VP1B细胞表位
- 新疆某地区吸毒人群卡波济肉瘤相关疱疹病毒血清流行病学分析被引量：1
- 2009年
- 卡波济肉瘤相关疱疹病毒（KSHV），又称人疱疹病毒8型（HHV8），有研究发现不同地区不同人群中KSHV有不同程度的流行，新疆是少数民族聚集区，吸毒人群又是该地HIV感染的高危人群，本研究初步探讨新疆某地区吸毒人群中KSHV的血清流行病学特点，为深入研究提供基础资料。
- 杨培荣谭晓华郭淑霞付碧石曾妍王林定陈彬杨磊
- 关键词：吸毒人群卡波济肉瘤疱疹病毒血清流行病学
- 潜伏相关核抗原在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染过程中的作用
- 2023年
- 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明LANA蛋白在KS发病机制中的具体过程,为KS潜伏期治疗提供参考。
- 路正东晏巍振(综述)王林定王林定
- 关键词：发病机制信号通路免疫逃逸
- 儿童肺泡灌洗液肺炎支原体检出率及基因型分析被引量：1
- 2019年
- 目的:检测136例儿童肺泡灌洗液标本感染肺炎支原体(MP)的情况并初步了解安徽合肥地区MP基因型情况。方法:采用普通PCR技术从136例儿童的肺泡灌洗液标本筛查出已感染MP的标本,并通过巢式多重PCR技术对MP阳性标本进行基因型分析,对照试验采用FH-MP标准株为DNA模版。巢式多重PCR扩增后的DNA片段构建T载体重组质粒做基因测序验证。结果:普通PCR检测显示有52例MP阳性标本(136例肺泡灌洗液标本)。巢式多重PCR技术检测显示MP阳性标本基因型均为P1-Ⅰ型,而标准株FH-MP的基因型为P1-Ⅱ型。重组质粒经过测序后进行片段对比验证其扩增条带均正确。结论:合肥地区儿童MP流行株基因型为P1-Ⅰ型,感染MP的阳性率为38.2%。
- 汪小五丁圣刚王林定唐振华朱义朗高勇
- 关键词：肺炎支原体基因型儿童
- 肺炎支原体P116基因FP2片段的免疫优势和细胞黏附活性被引量：2
- 2021年
- 目的通过对肺炎支原体P116基因FP2段的453 bp片段进行了克隆表达,探讨肺炎支原体P116蛋白对A549细胞的黏附性。方法肺炎支原体感染者血清和肺炎支原体抗体用Western blot和ELISA检测纯化的P116蛋白片段的免疫原性及效价。P116-FP2多克隆抗体和A549细胞黏附试验用免疫荧光评价肺炎支原体的黏附、黏附抑制。结果 P116-FP2蛋白具有免疫原性,用该蛋白构建的ELISA方法具有较高的敏感性和特异性。制备的P116-FP2抗体可阻断肺炎支原体黏附A549细胞。随着多克隆抗体效价的增加,肺炎支原体对A549细胞的黏附率明显降低。结论初步证明P116-FP2蛋白具有免疫反应性。P116-FP2多克隆抗体能够抑制肺炎支原体对A549细胞的黏附。
- 林康文志周畅李文丽吴焕武刘丹艳朱玉林王林定
- 关键词：肺炎支原体A549细胞多克隆抗体
- “互联网+”时代医学实验教学资源科普化平台建设探索——以安徽医科大学2022年大学生创新创业大赛为例
- 2024年
- 增强社会公众的安全卫生意识,对防范疾病和促进未来可持续发展有重要作用。专业化的医学实验教学资源科普化建设,可以为社会公众养成文明的生活习惯和健康的生活方式提供专业的科普宣教窗口。以2022年大学生创新创业大赛“医学实验教学资源科普化建设”实践为例,探索医学院校开展医学科普的新模式。
- 唐媛媛王晓楠李京培王林定李群
- 关键词：实验教学科普
- 微生物学教学改革的探索与实践
- 2012年
- 微生物学是生命科学等专业学生必修的专业基础课程，既是生命科学理论研究的核心，又是是一门理论性和实践性都很强的课程。在高等教育面临着素质教育、培养创新人才的新形势下，面对教学时数少，学生的知识层次不齐、实验能力较差的实际，对该课程的教学内容、教学方法和考核方法进行了一些改革，取得了较好的效果。
- 王林定
- 关键词：微生物学教学改革
- 安徽省安庆地区卡波肉瘤相关疱疹病毒感染的危险因素分析被引量：3
- 2014年
- 目的探讨安徽省安庆地区卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在普通人群中的感染情况,并初步分析KSHV感染的危险因子。方法选择KSHV ORF65、ORF73和K8.1编码的病毒蛋白为抗原,采用酶联免疫法对1 006份普通健康人群血清进行KSHV抗体检测。结果在检测的1 006份血样中,KSHV抗体的总阳性率为5.3%,其中男性为5.6%,女性为5.5%。KSHV感染率与梅毒感染有显著相关性,但是其与年龄、性别、血型及乙肝五项间无明显相关性。结论中国安徽安庆地区的普通健康人群KSHV的感染率较低,其中KSHV的感染率与性病梅毒感染具有显著相关性。
- 段强张莹曾宪聪汪小五吴悦杜爱能刘璐璐陈振刘淑均李进王林定
- 关键词：血清阳性率
