王耀耀 作品数:32 被引量:45 H指数:3 供职机构: 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 石家庄市科技局科技攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 化学工程 生物学 更多>>
一种发酵生产两性霉素B的方法 本发明属于发酵工程领域,具体涉及一种提高微生物发酵生产两性霉素B产量的方法。该方法通过优化有机复合氮源和发酵条件,降低不同批次间氮源对发酵代谢的影响;通过添加前体物质,促进两性霉素B生物合成。发酵结束后,两性霉素B的发酵... 段宝玲 张雪霞 王耀耀 任风芝 李宁 耿文飞 高任龙 郑智慧 路新华文献传递 雷帕霉素产生菌的诱变育种及发酵条件优化 目的:雷帕霉素(rapamycin,RPM)是一种由三十一元环组成的三烯大环内酯类抗生素,见Fig.1,主要由吸水链霉菌发酵产生。雷帕霉素最初确定为一种抗真菌抗生素,随着对此类结构化合物免疫抑制和抗肿瘤作用的深入研究,目... 王耀耀关键词:雷帕霉素 吸水链霉菌 菌种诱变 发酵条件优化 原生质体技术 基因组重排 文献传递 那他霉素产生菌的ARTP诱变育种及发酵工艺优化 被引量:10 2016年 采用常压室温等离子体(ARTP)诱变处理那他霉素产生菌纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis),使用脂酶活性筛选平板筛选突变株,得到1株那他霉素高产菌NCPC-N187,发酵效价较出发菌株提高了32.5%。针对发酵碳源代谢不稳定进行工艺优化,改进配方采用马铃薯淀粉替代白糊精,并加入玉米油0.5%,使菌种发酵水平进一步提高48.6%。于500 L发酵罐中进行工艺放大,优化补油工艺,结果发酵效价达到13 054 mg/L,较摇瓶发酵水平提高9.6%。 王耀耀 朱研研 付美红 王昂 张雪霞关键词:那他霉素 发酵 一种利用狐粪青霉菌发酵生产7-羟基丁苯酞的方法 本发明公开了一种利用狐粪青霉菌发酵生产7‑羟基丁苯酞的方法。其采用NCC3421菌株,并对摇瓶种子培养液、一级罐种子液以及发酵培养基配方及工艺参数等进行特别设计,尤其是在摇瓶种子培养基中增加鱼粉、玉米浆等高磷有机氮源,缩... 王耀耀 宋盼 王昂 任风芝 张雪霞 李红珍 郝惠云 王亚莉 李业英 路新华 崔晓兰 张雪莲 李国超一种发酵生产去甲万古霉素的方法 本发明属于发酵工程领域,具体涉及一种发酵生产去甲万古霉素的方法。该方法通过1)优化发酵培养基配方;2)在发酵合成去甲万古霉素期间添加超顺磁性微球,降低发酵产物对产生菌的反馈抑制,促进去甲万古霉素的生物合成。发酵结束后,去... 张雪霞 任风芝 李晓露 王耀耀 赵颖 耿文飞 王海燕 李丽红 李宁 高月麒 郑智慧 段宝玲 路新华 高任龙去甲基万古霉素菌种低温冷冻、冷干保藏条件优化及10年菌种保藏效果 被引量:1 2016年 【目的】针对去甲基万古霉素产生菌不耐保藏的问题,改进菌种保藏方法,对超低温液氮保藏、-80°C低温冷冻保藏、冷干保藏方法跟踪考察10年保藏稳定性,评价不同保藏方法对去甲基万古霉素产生菌的保藏适用性。【方法】采用甘油作基础保护剂进行超低温液氮保藏和-80°C低温冷冻保藏,采用脱脂牛奶作基础保护剂进行冷干保藏,针对超低温液氮保藏进行降温速率考察,研究非渗透性冷冻保护剂海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等对3种保藏方法的冻存影响,对优选出的保藏方法进行10年跟踪考察。【结果】3种保藏方法冻后菌种存活率依次为:-80°C低温冷冻保藏>超低温液氮保藏>冷干保藏。液氮保藏最适降温速率为快速冷冻。优选出最佳保护剂配方:超低温液氮保藏为甘油8.0%,海藻糖3.5%;-80°C低温冷冻保藏为甘油6.0%,PVP 5.0%;冷干保藏为脱脂牛奶,6.0%海藻糖。采用优化保藏条件,液氮保藏10年存活率稳定在70.6%,菌种发酵水平为入藏水平的92.9%。【结论】在优化条件下,尤以超低温液氮保藏适合于去甲基万古霉素产生菌长期保藏。 王耀耀 朱研研 郝惠云 付美红 王亚莉 张雪霞蛋白核小球藻高密度高蛋白发酵工艺研究 2023年 试验旨在提高蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)的生物量和蛋白含量,对发酵配方和发酵工艺进行优化。采用Design-Expert 12 Perfect软件对复合碳源、氮源和维生素等13种因子进行Plackett-Burman筛选,得到显著效应因子为复合碳源(葡萄糖+淀粉,按2.5∶1.0的比例添加能够增加核蛋白小球藻发酵产量)、有机氮源(尿素)、维生素B_(12)(VB_(12))。对上述3个显著效应因子进行Box-Behnken试验设计,通过响应面分析获得最优添加量为复合碳源7.4 g/L、尿素8.8 g/L、VB_(12) 0.4 g/L。经250 mL和1 000 mL三角摇瓶培养基试验验证以及50 L发酵罐补料工艺验证,得出3个不同水平发酵的效果均高于对照组,藻体密度分别提高38.9%、31.1%、42.5%,蛋白浓度分别提高29.8%、31.0%、31.4%。研究表明,优化补料条件下,蛋白核小球藻50 L发酵罐OD_(680 nm)值为0.929,干重91.64 g/L,蛋白含量达43%。 孙术超 王耀耀 任风芝 任风芝 王会会 张雪霞 葛鹍鹏 郝惠云关键词:蛋白核小球藻 发酵工艺 复合碳源 红树林免疫增强真菌的筛选及菌株PH0016的鉴定探讨 2015年 目的:探讨红树林免疫增强真菌的筛选及菌株PH0016鉴定。方法:对采集获得的红树林土壤样本进行分离和培养,选取单独的菌落群,使用分区划线法进行纯化。将选取的单独菌落群接种在海水马丁氏的培养基平板上,对接种的培养基进行环绕式烧灼以达到灭菌目的。对纯化后的菌株进行编号,置于实验菌种库中进行保存,恒温4℃。取单独的菌落,置于发酵培养基中,以每分钟250转的速度进行离心,置于恒温28℃的摇床中进行连续5天的培养。采取四甲基偶氮唑盐方法对PH0016菌株的免疫活性进行检测。观察菌株的菌落情况、形态以及r DNA ITS序列,对菌株PH0016进行鉴定。结果:本次分离出325株真菌,其中12株真菌具有免疫增强作用。通过r DNA ITS序列分析联合同源性检索,PH0016与拟青霉属的相似性达到100%。结论:菌株PH0016具有较强的免疫增强活性,能够促进外周血单个核细胞的增殖。菌株PH0016为拟青霉属丛梗孢科菌株,能够有效增强免疫功能。 付美红 王耀耀 朱研研 郝惠云 王亚莉关键词:红树林 真菌 菌株鉴定 一种替考游动放线菌的保藏方法 本发明提供一种用于促进替考游动放线菌工业生产菌株产生丰富的游动孢囊孢子的培养方法,菌种培养基配方中选用小麦胚芽粉作为孢子萌发的主要碳氮源,以天冬酰胺、硫酸铵作为补充氮源,微量元素补充铁、锰、钴、锌离子。培养温度采用分阶控... 王耀耀 张雪霞 朱研研 郝惠云 郄丽萍 王亚莉一种发酵生产两性霉素B的方法 本发明属于发酵工程领域,具体涉及一种提高微生物发酵生产两性霉素B产量的方法。该方法通过优化有机复合氮源和发酵条件,降低不同批次间氮源对发酵代谢的影响;通过添加前体物质,促进两性霉素B生物合成。发酵结束后,两性霉素B的发酵... 段宝玲 张雪霞 王耀耀 任风芝 李宁 耿文飞 高任龙 郑智慧 路新华文献传递