金明
- 作品数：80 被引量：365H指数：8
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人VEGF基因的克隆及卵巢癌中VEGF基因重排的检测被引量：2
- 2000年
- 目的 探讨 VEGF高表达的卵巢癌中 VEGF基因结构有无异常 .方法 用 RT- PCR方法自胎盘中克隆 VEGFc DNA以作为杂交探针 ;收集临床卵巢癌手术切除标本 ,以正常卵巢组织为对照 ,从中提取基因组 DNA并进行 Southern印迹杂交 .结果 序列分析表明所获得基因正确 ,Southernblot分析 10 / 19呈现出大于 2 3 kb片段和 4.3 kb片段的异常片段 ,而不同于正常对照组织的大于 30 kb,6 .5 kb和 2 .5 kb.
- 金明赵君庸严瑞兰惠宏襄王剑波王成济杨安钢
- 关键词：卵巢癌VEGF基因克隆基因重排
- 新基因mcpr1在小鼠牙胚发育中的时空表达和意义被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨mcpr1在牙胚发生过程中的可能作用。方法:采用免疫组化LsAB法观察MCPR1在小鼠牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果:MCPR1在小鼠牙胚各个时期均有表达,但各期分布模式有所不同,帽状期开始在成釉器上皮细胞表达,在釉结节内亦呈现强阳性表达,在分化成熟的成牙本质细胞及成釉细胞内呈现出强阳性表达。结论:mcpr1可能通过上皮-间充质之间的信号传递及相关基因的相互调控,参与成釉器的成熟及牙胚的发育。
- 轩东英金岩金明轩昆邢向辉郑梁赵征
- 关键词：牙胚发育免疫组织化学
- 抗血管内皮生长因子发夹状核酶基因抑制卵巢癌移植瘤生长的实验研究被引量：11
- 2002年
- 目的 采用抗血管内皮生长因子 (VEGF)发夹状核酶基因 ,阻断卵巢癌中VEGF的自分泌和 (或 )旁分泌通路 ,以检测抗VEGF发夹状核酶基因对卵巢癌细胞VEGF表达及其肿瘤生长的影响。方法 采用脂质体介导的方法 ,将自行设计和构建的抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌细胞SKOV3,采用氨基糖甙庆大霉素 (G418)筛选获得阳性克隆 ;RNA斑点杂交检测核酶基因在卵巢癌细胞中的表达 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测转染前后卵巢癌细胞中VEGF的表达 ;透射电子显微镜观察卵巢癌细胞超微结构改变 ;观察裸鼠皮下成瘤实验检测转染前后细胞的致瘤能力的变化。结果 转染核酶基因后的卵巢癌细胞VEGFmRNA表达明显降低 ;透射电子显微镜观察出现凋亡细胞 ;裸鼠致瘤能力减弱 ,肿瘤组织中VEGF表达及血管形成减少。结论 抗VEGF发夹状核酶基因可显著抑制卵巢癌细胞VEGF表达 ,通过减少血管形成抑制肿瘤生长 ,为进一步开展肿瘤血管靶向基因治疗 。
- 严瑞兰辛晓燕金明惠宏襄王健王德堂
- 关键词：内皮生长因子淋巴因子实验性肿瘤
- TGFα的检测方法原理及临床意义
- 1994年
- 生长因子或/和其受体的合成失控常与某些人和动物肿瘤的发生有关.例如转化生长因子(Transforming Growth Factor,TGFα)及与此有关,成熟TGFα是由50个氨基酸残基组成的单链多肽分子,它通过与细胞的表皮生长因子受体(EGFR)结合而发挥其生理作用,除少数组织(如银屑病皮肤细胞等)外,正常组织一般难以检测到TGFα,但是,许多肿瘤和肿瘤细胞株中却有TGFα的过量合成.
- 惠宏襄赵小宁金明
- 特异性转移因子拮抗人AFP抑制鼠脾淋巴细胞蛋白质合成的作用被引量：4
- 1991年
- 用亲和层析法从3-5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP。用纯化AFP免疫小鼠，取其脾脏按匀浆透析法制备AFP抗原特异转移因子（SP-TF）。密度离心法分离鼠脾淋巴细胞，体外用^3H-亮氨酸参入法，从翻译水平观察SP-TF对AFP抑制鼠脾淋巴细胞生长的拮抗效应。结果表明，所提纯AFP有非常显著抑制鼠脾淋巴细胞蛋白质合成作用（P<0.001)。SP-TF和AFP抗体能非常显著拮抗AFP抑制鼠脾淋巴细胞^3H-亮氨酸参入效应—（P均<0.001)，两者对AFP的拮抗作用无显著差异（P>0.05)，而正常小鼠脾制备的转移因子（N-TF）无此拮抗效应。SP-TF对AFP的拮抗效应并非是SP-TF本身对淋巴细胞作用的结果。
- 许卫民牛立国柴玉波金明王易伦苏成芝
- 关键词：特异性转移因子甲胎蛋白脾淋巴细胞蛋白质合成
- mcpr1基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2004年
- 目的 :构建mcpr1基因原核表达载体 ,表达MCPR1蛋白。 方法 :采用多聚酶链式反应 (PCR)扩增出mcpr1基因的蛋白编码序列 ,克隆到中间载体中 ,再经双酶切 ,亚克隆到表达载体中 ,构建该基因的融合表达载体pGEX 4T mcpr1,在大肠杆菌中用IPTG诱导表达 ,SDS PAGE电泳。 结果 :酶切和测序鉴定 ,表明融合表达载体内插入片段正确 ,在大肠杆菌中诱导后 ,出现一条 3 60 0 0的新蛋白带 ,主要存在于细菌沉淀中 ,占总蛋白的3 9 %。结论 :研究表明mcpr1基因编码的蛋白质能够在原核细胞中表达 。
- 轩东英金岩金明轩昆张蓉
- 关键词：基因表达融合蛋白蛋白纯化
- 克隆PCR产物用T载体的制备
- 1998年
- 金明赵小宁惠宏襄王成济
- 关键词：聚合酶链反应克隆分子
- 转染野生型MTS1基因的膀胱癌细胞中p16蛋白的可控表达及意义被引量：6
- 2000年
- 目的 研究 p16蛋白的可控表达 .方法 通过可诱导的真核表达载体 p MDNA3- p16将野生型多肿瘤抑制基因(multiple tumor suppressor1,MTS1)转染至该基因表达功能丧失的人膀胱癌细胞 T2 4中 .应用免疫细胞化学和 m RNA原位杂交的方法检测 p16蛋白的表达 .结果 经重金属离子诱导前与诱导后 ,T2 4细胞中 p16蛋白的表达有明显差异 .结论 通过重金属离子的诱导 ,可以调控 T2 4细胞中 p16蛋白的表达 .
- 金向阳金明王中琨王建波
- 关键词：膀胱癌P16蛋白T24细胞
- NT3基因工程细胞经脑脊液途径的耳蜗内生物学效应的初步证明被引量：15
- 2002年
- 目的 通过脑脊液途径移植神经营养因子 - 3(NT3)基因工程细胞 ,初步观察其耳蜗内听觉生物学效应。方法 将体外构建的NT3基因工程细胞扩大培养 ,收集浓缩培养上清中的蛋白 ,用印迹杂交鉴定其分泌蛋白的生物学效应 ,再将适当的细胞直接移植到 2 0天龄近交BALB/C小鼠的脑脊液中 ,4 0天后比较移植前后的畸变产物耳声发射 (DPOAE)幅值。结果 体外构建NT3基因工程细胞是可行的 ,其具备分泌NT3的功能 ,经脑脊液途径注射后观察到BALB/C小鼠耳蜗功能的老化在高频范围内得到了延缓 ,DPOAE高频范围幅值下降减缓。结论 NT3基因工程细胞具有较好的体外体内生物学效应 ,可以用于进一步实验治疗感音性聋的研究 ;
- 高下王锦玲杨安钢金明许彦鸣王枫
- 关键词：生物学效应神经营养因子-3基因转染基因工程细胞耳蜗感音性聋
- 抗人TGF_α发夹状核酶基因逆转录病毒表达载体的构建及鉴定
- 1998年
- 目的：构建抗人ＴＧＦα核酶基因逆转录病毒表达载体．方法：用二异丙基亚磷酰胺法合成抗人ＴＧＦα核酶基因的两条互补单链，将其退火后克隆人ｐＵＣ１８，用ＥｃｏＲＩ及ＢａｍＨＩ切下该基因，定向克隆人逆转录病毒表达载体ｐＤＯＲ．结果：酶切后经琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明，所构建重组克隆载体ｐＵＣ１８ＴＲＺ及重组表达载体ｐＤＯＲＴＲＺ正确．结论：成功构建了抗人ＴＧＦα发夹状核酶基因逆转录病毒表达载体，为下一步运用核酶对肿瘤进行基因治疗打下了基础．
- 赵锦荣惠宏襄金明王成济
- 关键词：转化生长因子Α发夹状核酶
