唐力军
- 作品数：14 被引量：44H指数：4
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- 体外诱导人骨髓多能成体祖细胞向肝样细胞分化的实验研究
- 骨髓源干细胞具有多向分化潜能,特别是具有向肝脏干细胞、肝细胞及血管内皮细胞分化的潜能.由于其取材方便,可以来自患者自身,无排斥反应,具有重要的临床应用价值,因此成为当前肝组织工程学中的一大热点。Catherine M.V...
- 高毅慕宁唐力军
- 文献传递
- 两种细胞因子诱导人骨髓多能成体祖细胞向肝样细胞分化的作用
- 骨髓源干细胞具有多向分化潜能，特别是具有向肝脏干细胞、肝细胞及血管内皮细胞分化的潜能,由于其取材方便，可以来自患者自身，无排斥反应，具有重要的临床应用价值，因此成为当前肝织工程学中的一大热点。Catherine M．Ve...
- 高毅唐力军慕宁
- 关键词：肝样细胞分化细胞因子诱导分化肝细胞移植
- 文献传递
- HGF+FGF4体外定向诱导人骨髓来源的多能成体祖细胞向肝样细胞分化的特征性表型鉴定被引量：9
- 2004年
- 目的 探索人骨髓来源多能成体祖细胞 (hMAPCs)在肝细胞生长因子 (HGF) +成纤维生长因子 4 (FGF 4 )诱导下分化为肝细胞的可行性 ,为肝组织工程提供新的种子细胞来源。方法 取健康成人适量骨髓 ,采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞并行贴壁培养 ,获取骨髓间充质干细胞(MSCs) ,将MSCs通过CD4 5、GlyA免疫微磁珠负分选得到hMAPCs;将获取的hMAPCs用HGF(2 0ng/ml) +FGF 4(10ng/ml)进行诱导分化 ,L 0 2人肝细胞株为阳性对照 ,未加任何诱导因素的hMAPCs为阴性对照 ;免疫细胞化学染色鉴定不同诱导分化阶段细胞的ALB、AFP、CK 18、CK 19等肝细胞特征的表型变化 ,并计数阳性细胞比率 ;Westernblot检测诱导分化第 2 1天、35天后细胞的ALB表达。结果 ALB、CK 18在诱导组中基本为阳性着色 ,CK 19均为阴性着色 ,AFP仅在诱导第 7天有阳性着色。在诱导分化第 2 1天、35天 ,ALB均有阳性表达。
- 唐力军高毅张志李浩单毓强
- 关键词：多能成体祖细胞成纤维生长因子细胞分化
- 人骨髓来源的多能成体祖细胞分离纯化及体外培养的实验研究被引量：9
- 2005年
- 目的:建立体外分选纯化人多能成体祖细胞(multipotentadultprogenitorcillsfrombonemarrow,MAPCs)的方法,用自行配制的细胞培养基对MAPCs进行体外培养,了解其生长、增殖特性。方法:取健康志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,对单个核细胞行贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45,Gly-A免疫微磁珠负分选,流式细胞仪鉴定分选后细胞纯度;培养观察细胞生长情况,对传代到不同阶段的细胞进行流式细胞分析,初步了解MAPCs在培养、增殖过程中的免疫学稳定性。结果:①通过免疫磁性分离(magneticactivatedcellsorting,MACS)分选,平均每1×109L骨髓贴壁细胞可分选出约(5.1±2.8)×107L数量级的-1-1MAPCs,分选前后细胞活力分别为96.7±1.7)%和96.0±2.4)%,差异((无显著性意义。②用自制的培养基培养分选后的MAPCs,细胞生长良好,最长传代到第16代。③流式细胞仪分析获取的CD45-,Gly-A细胞纯度-大于98%;流式细胞仪分析传代第4,8,12代MAPCs,CD45-,Gly-A细胞-纯度大于98%。结论:①CD45,Gly-A免疫微磁珠负分选可从骨髓细胞中分选出高纯度的MAPCs。②自行研制的人MAPCs培养基能成功体外培养MAPCs。
- 唐力军高毅李浩单毓强姜晓丹柳晓秋
- 关键词：全能干细胞细胞培养
- 肝细胞生长因子联合成纤维细胞生长因子-4诱导人骨髓来源的多能成体祖细胞向肝样细胞分化被引量：19
- 2005年
- 目的探索肝细胞生长因子(HGF)+成纤维生长因子-4(FGF-4)诱导人骨髓来源多能成体祖细胞(hMAPCs)分化为肝细胞的可行性,为肝组织工程提供新的种子细胞来源。方法(1)取志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心+贴壁培养获取骨髓间充质干细胞(MSCs),将MSCs通过CD45、GlyA免疫微磁珠负分选得到hMAPCs。(2)将hMAPCs用HGF+FGF-4进行诱导分化。实验分组:A组:HGF (20 ng/ml)+(FGF-4)10ng/ml诱导hMAPCs;B组(阳性对照组):L-02人肝细胞株; C组(阴性对照组):未加任何诱导因素的hMAPCs。(3)免疫细胞化学鉴定不同诱导分化阶段细胞的白蛋白(Alb)、甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白-18(CK-18)等肝细胞特征的表型变化并计数阳性细胞比率。(4)逆转录-聚合酶链反应检测不同诱导分化阶段细胞的Alb、AFP、CK-18的mRNA转录。(5)Western blot检测诱导分化第21、35天后细胞的Alb表达。结果(1)免疫细胞化学结果:Alb、CK-18在诱导组中不同时间段基本为阳性着色;AFP在诱导分化第7天为阳性着色,在诱导第14、21天为阴性着色。(2)逆转录-聚合酶链反应结果:作为不成熟肝细胞表型的AFP,在诱导分化的第7天有mRNA阳性表达;作为成熟肝细胞表型的Alb及CK-18,在不同时间段mRNA均为阳性表达。(3)Western blot检测诱导分化第21、35天后细胞的Alb表达。结论hMAPCs在一定诱导条件下具有向肝样细胞分化的潜能。
- 唐力军高毅张志李浩单毓强
- 关键词：肝细胞生长因子骨髓祖代细胞肝细胞多能成体祖细胞细胞分化人骨髓MRNA转录
- 体外诱导人骨髓多能成体祖细胞向肝样细胞分化的实验研究
- 骨髓源干细胞具有多向分化潜能,特别是具有向肝脏干细胞、肝细胞及血管内皮细胞分化的潜能。由于其取材方便，可以来自患者自身，无排斥反应,具有重要的临床应用价值，因此成为当前肝组织工程学中的一大热点。Catherine M．V...
- 高毅慕宁唐力军
- 关键词：肝样细胞分化
- 文献传递
- 体外诱导人骨髓来源的多能成体祖细胞向肝样细胞分化的实验研究
- <正>目的和背景:人骨髓来源的多能成体祖细胞(MAPCs)具有向肝细胞分化潜能,由于其取材方便,可以来自患者自身,无排斥反应,具有重要的临床应用价值,因而有望成为肝组织工程新的种子细胞来源。本
- 徐小平唐力军高毅
- 关键词：骨髓移植细胞分化
- 文献传递
- 双阴性选择法纯化培养人骨髓多能成体祖细胞被引量：15
- 2005年
- 目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式细胞术鉴定分选后细胞纯度;对传代到不同阶段的细胞进行CD45、GlyA流式细胞分析,初步了解MAPCs在培养、增殖过程中的免疫学稳定性.结果通过miniMACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约(5～10)×104/ml的MAPCs,分选前后细胞活力分别为(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,无明显差异;自制的培养基培养分选后的MAPCs生长良好,最长传代到第16代;流式细胞仪分析获取的CD45、G1yA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪分析传代第4、8、12代MAPCs,CD45-、G1yA-细胞纯度大于98%.结论CD45、GlyA miniMACS负分选可从骨髓中分离高纯度的MAPCs;MAPCs在本室自制的人MAPCs培养基中体外有较强的增殖能力,且能保持较长时间的稳定状态.
- 慕宁高毅唐力军
- 关键词：免疫磁珠分离法分离纯化细胞培养流式细胞术
- 两种细胞因子诱导人骨髓多能成体祖细胞向肝样细胞分化的作用被引量：3
- 2005年
- 本实验用免疫磁性分离(MACS)方法分选骨髓间充质干细胞(MSCs)亚群MAPCs[1],用成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)及肝细胞生长因子(HGF)诱导其向肝细胞方向分化,并采用不同方法鉴定了细胞分化能力.
- 高毅唐力军慕宁
- 关键词：细胞分化免疫磁珠分离法多能成体祖细胞细胞因子诱导人骨髓免疫磁性分离
- 人骨髓多潜能成体祖细胞分化后细胞移植治疗兔心肌梗死被引量：1
- 2006年
- 目的:体外分选纯化人骨髓多潜能成体祖细胞(MAPCs),诱导分化,观察其分化后细胞移植治疗心肌梗死的疗效,初步探讨MAPCs移植治疗心肌梗死的可行性。方法:取适量志愿者骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞并行贴壁培养,将获取的细胞通过CD45、GlyA免疫微磁珠负分选(MACS)分离出MAPCs;锥虫蓝拒染试验测定分选后细胞活力,流式细胞仪鉴定分选后细胞纯度;传代后的细胞与10μmol.L-1浓度5-氮杂胞苷(5-aza)共孵育24 h,通过透射电镜对诱导后的细胞进行鉴定,并将诱导后的MAPCs移植于兔心肌梗死部位,观察其对兔心功能的改善情况。结果:MACS分选前后MAPCs细胞活力分别为(96.7±1.7)%(、96.0±2.4)%,无显著差异;获取的CD45-、GlyA-细胞纯度大于98%。分选后传代的MAPCs经5-aza诱导后,透射电镜检查可见大量的粗大肌丝;细胞移植治疗心肌梗死兔4周后,MAPCs移植组左室射血分数、左室侧壁运动幅度、左室收缩期室壁增厚率,以及左心室最大压力上升速率(dp/dt),均明显高于心梗模型组和空白对照组(P<0.05或0.01),但低于假手术组(P<0.05);空白对照组与心梗模型组相比无显著差异。结论:MACS分离出的高纯度人MAPCs在体外经5-aza诱导后能够向肌源性细胞分化,兔心梗区内植入诱导后的MAPCs能够改善心功能。
- 王晓华吴中海唐力军
- 关键词：细胞分化细胞移植心肌梗塞
