楼觉人
- 作品数:101 被引量:247H指数:9
- 供职机构:上海生物制品研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学历史地理化学工程更多>>
- 凝血因子Ⅶ研究进展
- 2007年
- 人体血浆凝血因子Ⅶ按分子结构和生物活性可分为两种:以酶原形式存在的因子(FⅦ)和以活化形式存在的因子(FⅦa)。FⅦa作为凝血级联反应的起始酶,在正常生理性与治疗性止血中发挥重要作用,并且与多种出、凝血疾病的发生和进程有关,因而日益受到重视。本文就 FⅦ的生物学功能以及重组活化 FⅦ(rFⅦa)的临床应用等方面的研究进展作一综述。
- 蔡蓓蓓楼觉人朱威
- 关键词:血液凝固
- 透明质酸复合人骨形态发生蛋白-2转染兔骨髓基质干细胞的体内外成骨研究被引量:4
- 2004年
- 目的观察透明质酸(HA)复合腺病毒介导的人骨形态发生蛋白(AdvhBMP)2基因转染的兔骨髓基质干细胞(BMSCs)的体内外诱导成骨活性。方法(1)体外成骨活性研究方法分成4组,AdvhBMP2转染细胞+HA组、AdvhBMP2转染细胞组、未转染细胞+HA组和未转染细胞组,采用免疫沉淀法(IP)、Western印迹法检测hBMP2表达、逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法检测骨涎蛋白mRNA表达、ALP和vonKossa染色及ALP定量检测;(2)裸鼠肌内诱导成骨实验裸鼠12只(共24侧)分4组注射AdvhBMP2转染细胞+HA组(n=8)、注射AdvhBMP2转染细胞组(n=8)、注射未转染细胞组(n=4)和单纯注射HA组(n=4),观察方法采用X线、成骨计量对照、组织学观察法。结果(1)AdvhBMP2转染细胞+HA组和AdvhBMP2转染细胞组BMSCs表达hBMP2和骨涎蛋白mRNA,两组的ALP活性均高于未转染细胞+HA组和未转染细胞组(P<0.01),并有明显的钙结节形成;(2)AdvhBMP2转染细胞+HA组和AdvhBMP2转染细胞组均有成骨,两组差异有显著性(P<0.01),未转染细胞和单纯注射HA组均未见成骨,局部以纤维和脂肪组织为主。结论HA复合AdvhBMP2基因转染的BMSCs在体外有较好的诱导成骨活性,在裸鼠肌内有良好的诱导成骨和成软骨的作用,是可注射性的骨缺损修复方法。
- 章军辉陈永强汤亭亭楼觉人郝永强郁朝峰戴戎
- 关键词:透明质酸骨形态发生蛋白骨髓基质干细胞
- BMP2基因修饰犬脂肪源性基质细胞修复自体大段骨缺损被引量:2
- 2008年
- 目的评价BMP2基因修饰的犬脂肪源性基质细胞(ADSCs)与β-磷酸三钙(β-TCP)复合修复白体大段骨缺损的疗效。方法从比格犬背部脂肪组织中提取基质细胞,转染腺病毒介导的人BMP2基因(Adv—hBMP2),通过ELISA和裸鼠体内异位成骨实验鉴定BMP2的表达及异位成骨活性;取比格犬11只,制作双侧尺骨2.5cm骨缺损模型。缺损处旷置(4侧)或随机填充:单纯TCP(6侧),ADSCs+TCP(6侧),Adv—hBMP2-ADSCs+TCP(6侧)。所有动物16周后处死。结果ELISA显示犬ADSCs被腺病毒转染后可高表达具有成骨活性的BMP2;裸鼠体内异位成骨实验证实所分泌的BMP2具有骨诱导活性。骨缺损修复的X线片显示,单纯TCP和ADSCs+TCP组至16周时,骨缺损均未愈合;BMP2基因修饰ADSCs+TCP组6例中2例愈合,4例部分愈合。显微摄片和组织学观察示:单纯TCP和ADSCs+TCP组仅在骨缺损断端形成编织骨,缺损中央被纤维组织填充,而Adv—hBMP2-ADSCs+TCP组骨缺损处皮质连续,新生骨组织主要为编织骨,部分改建形成板层骨。组织形态学分析示BMP2基因修饰ADSCs明显促进了新骨形成。结论BMP2基因修饰ADSCs可以修复犬尺骨大段骨缺损。
- 李慧武戴魁戎汤亭亭张晓玲唐坚孙晓江张双燕楼觉人
- 关键词:骨形态发生蛋白质类脂肪组织间质干细胞
- 聚乙二醇修饰重组人干扰素α1b的制备及其性质被引量:8
- 2010年
- 目的制备聚乙二醇(PEG)修饰的重组人干扰素α1b(rhIFNα1b),并分析其部分性质。方法采用PEG修饰rhIFNα1b,通过离子交换层析分离纯化修饰混合物,单点修饰产物经超滤浓缩后,经Lowry法检测蛋白的浓度,SDS-PAGE和RP-HPLC检测蛋白的纯度,等电聚焦电泳检测蛋白的等电点,质谱法检测蛋白的相对分子质量,细胞病变抑制法检测蛋白的体外活性,ELISA法检测蛋白的抗原性。结果单点修饰产物的蛋白得率为33%;SDS-PAGE分析纯度为96.1%,RP-HPLC分析纯度为98.1%;等电点为6.22;相对分子质量为39946;比活为1.28×106IU/mg,活性保留率为14.4%;抗原性至少降至原来的1/625。结论制备的单点修饰rhIFNα1b药学性质获得改善,有望开发为安全、长效的新型干扰素。
- 杨宇峰路煜石玮马相虎秦洁朱威楼觉人
- 关键词:聚乙二醇基因修饰重组人干扰素Α
- 载脂蛋白A-I的研究进展
- 载脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)作为人体血浆HDL分子中载脂蛋白的主要成分,在人体生理和病理过程中发挥着重要的作用。早年的研究表明其具有胆固醇的逆向转运功能,从而对动脉粥样硬化有抵抗与治疗作用。最新研究表明,其还具有其它显...
- 卞炯楼觉人朱威
- 关键词:分离纯化
- 文献传递
- 透明质酸对BMP-2转染的羊BMSCs增殖、分化的影响被引量:3
- 2007年
- 目的观察透明质酸(HA)对携带人骨形态发生蛋白-2的腺病毒(Adv-BMP-2)转染的羊骨髓基质干细胞(BMSCs)体外增殖、分化的影响。方法将羊骨髓体外分离、扩增BMSCs,分成5组:转染Adv-BMP-2的BMSCs+HA组(Ⅰ组),转染Adv-BMP-2的BMSCs组(2组),BMSCs+HA组(3组),BMSCs组(4组),转染携带β半乳糖苷酶的腺病毒(Adv-β-gal)的BMSCs组(5组)。采用细胞计数、绘制细胞生长曲线和流式细胞分析观测细胞增殖;采用碱性磷酸酶(ALP)检测以及RT-PCR检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、骨连接素(ON)和骨涎蛋白(BSP)的mRNA表达。结果①细胞增殖:3 d后各组细胞增殖无显著差异,1周后第1组和第3组的细胞增殖明显高于其他组。②ALP活性:3 d后第3组ALP活性明显低于第4、5组,而第1、2组则显著高于第4、5组;7 d后前3组ALP活性较后两组均显著增加,而第1、2组ALP活性增加更为显著。③Col-Ⅰ、ON和BSP的mRNA表达:3 d和7 d后前3组较后两组均有不同程度的增多。结论HA与BMSCs体外复合培养后可促进BMSCs的增殖、增加ALP的活性以及Col-Ⅰ、ON和BSP基因的表达。
- 林在俊朱振安孟凡琳汤亭亭楼觉人戴尅戎
- 关键词:透明质酸骨髓基质干细胞骨形态发生蛋白质类细胞分化
- 巴斯德毕赤酵母启动子研究进展
- 2016年
- 目前,巴斯德毕赤酵母表达系统是非常成功的外源蛋白表达系统之一,其启动子的开发和利用也备受关注。醇氧化酶1启动子(alcohol oxidase 1 promoter,PAOX1)在巴斯德毕赤酵母中应用最为广泛。鉴于外源蛋白表达的需要,不断有启动子被发现和利用,如三磷酸甘油醛脱氢酶启动子(glyceral—dehyde-3-phosphate dehydrogenase promoter,PcaP)、甲醛脱氢酶1启动子(formaldehyde dehydrogenase1promoter,PFLD1)等。此文列举了多种巴斯德毕赤酵母启动子,并对启动子的来源、特点以及外源蛋白的表达等方面进行综述,以期为启动子的选择提供参考。
- 薛亚慧楼觉人
- 关键词:毕赤酵母启动子转录
- 骨形态发生蛋白2基因转染的骨髓间充质干细胞修复羊胫骨干骨缺损被引量:9
- 2004年
- 目的评价腺病毒介导的人骨形态发生蛋白2(Adv-hBMP-2)基因转染的羊骨髓间充质干细胞(BMSCs)对长骨干骨缺损的修复效果。方法22只羊,体重18.1~29.5kg。制造羊胫骨干骨缺损(2.1cm),分为4组Ⅰ组,Adv-hBMP-2转染BMSCs组(8只);Ⅱ组,腺病毒介导的β半乳糖苷酶(Adv-βgal)转染BMSCs组(6只);Ⅲ组,未转染BMSCs组(6只);Ⅳ组,未治疗组(2只)。细胞自身分泌的细胞外基质作为细胞载体。分期行X线、计量组织学检查和生物力学测定。结果X线检查示Ⅰ组的羊胫骨干骨缺损内有明显骨痂形成;24周,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的愈合率分别为6/7、1/5、2/5及0/1,X线疗效评分显示Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ组的评分比较,差异有显著性意义。组织学检查显示,与其它组相比,Ⅰ组的新生骨量最多,并有皮质骨形成。生物力学测试示Ⅰ组的力学强度最大。结论Adv-hBMP-2基因转染的BMSCs在缺乏骨传导性支架的条件下可修复长骨干骨缺损。
- 徐小良汤亭亭戴尅戎朱振安郁朝锋徐旻朱六龙楼觉人
- 关键词:骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞
- N端信号肽残余氨基酸对人凝血因子Ⅷ蛋白在毕赤酵母中表达的影响
- 目的:比较N端信号肽残余氨基酸对人凝血因子Ⅶ蛋白在毕赤酵母中表达的影响。
方法:构建表达蛋白N端信号肽残余氨基酸不同的两种重组表达质粒pPIC9K/FⅦ和pPIC9K/Clu-A1a-Clu-Ala-FⅦ,电转...
- 蔡蓓蓓楼觉人朱威
- 关键词:毕赤酵母外源蛋白
- 文献传递
- 凝血因子Ⅶ的研究进展
- 人体血浆中凝血因子Ⅶ按分子结构和生物活性可分为两种:一是以酶原形式存在的因子(FⅦ),二是以活化形式存在的因子(FⅦa)。FⅦa作为凝血因子Ⅶ反应的起始酶,在正常生理性与治疗性止血中发挥重要作用,并且与多种出凝血疾病的发...
- 蔡蓓蓓楼觉人朱威
- 关键词:生物学功能
- 文献传递