陈鑫
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 小单孢菌40027菌株内源质粒pJTU101的特性及其抗性标记被引量：1
- 2015年
- 从稀有放线菌小单孢菌40027菌株中分离到2个内源质粒p JTU101和p JTU112,用Bam H I单酶切质粒p JTU101确定其大小,通过同源片段之间发生单交换实现内源质粒p JTU101的抗性标记,并对其稳定性进行了初步研究.结果表明：小单孢菌40027菌株内源质粒p JTU101拷贝数为1-2,大小约为36.6 kb,被阿泊拉霉素抗性基因标记且在小单孢菌40027菌株中比较稳定.
- 李晓华杨振飞李阳陶新园吴金龙刘涛陈鑫梅枫马婷婷
- 关键词：小单孢菌40027菌株稳定性
- 小单孢菌40027菌株质粒pJTU112复制区的克隆与序列特性被引量：2
- 2013年
- 福堤霉素A产生菌——小单孢菌40027菌株含有两个质粒pJTU101和pJTU112。【目的】对质粒pJTU112复制区进行克隆,并对质粒pJTU112复制区序列进行测定和分析。【方法】克隆质粒pJTU112的不同DNA片段导入消除质粒的小单孢菌40027菌株,通过复制功能的测定,确定质粒pJTU112的复制区,并进行测序和生物信息学分析。【结果】质粒pJTU112的复制区定位在约4.7 kb的SacI-KpnI DNA片段上,测序和生物信息学分析表明:4.7 kb的SacI-KpnI DNA片段包含5个ORFs(open reading frames),其中pJTU112.1和pJTU112.2与质粒接合转移有关,pJTU112.3、pJTU112.4和pJTU112.5与质粒复制有关。【结论】质粒pJTU112的复制区定位在约4.7 kb的SacI-KpnI DNA片段上。
- 耿旭梅陈鑫杨晓潼郭佳翟贵发李晓华
- 关键词：小单孢菌40027菌株克隆
- 抗农作物病原真菌微生物的筛选及其聚酮合酶基因的分析被引量：1
- 2014年
- 以5种农作物病原真菌为指示菌,从湖北省神农架地区的土壤中筛选得到1株抗真菌放线菌,命名为ⅡR21菌株.经过形态观察、培养特征、生理生化分析和16S rDNA序列同源性分析,初步鉴定该菌株属于链霉菌属.发酵液稳定性研究表明：ⅡR21菌株发酵液在-20℃～80℃范围内具有较强的稳定性;在pH 4.0～7.0范围内,ⅡR21菌株发酵液的抑菌活性比较稳定;紫外光照射对发酵液的抑菌活性没有影响.对放线菌ⅡR21菌株中Ⅰ型PKS基因族中KS基因进行PCR扩增和分析,与其他KS序列相似性比较低,与其系统分类最近的Streptom yces natalensis相似性达77％.
- 郭佳吴金龙唐颜苹谭晖赖树锦李阳杨振飞陶新园陈鑫李晓华
- 关键词：链霉菌RDNA
- 稀有放线菌小单孢菌与大肠杆菌接合转移体系的构建被引量：1
- 2015年
- 为将外源基因导入小单孢菌,建立小单孢菌(Micromonospora)与大肠杆菌两亲接合转移方法,将包含小单孢菌内源质粒pJTU112复制区的4.7kb片段插入质粒pOJ260的BamHⅠ酶切位点,构建了能在大肠杆菌和小单孢菌中复制的穿梭载体pSCU207,将质粒pSCU207转化大肠杆菌ET12567/pUZ8002,再与小单孢菌LXH20进行两亲接合转移,挑取接合转移子,并进行验证。结果表明:质粒pSCU207通过大肠杆菌与小单孢菌新鲜菌丝之间接合转移导入小单孢菌中,并可稳定遗传;大肠杆菌与小单孢菌新鲜菌丝之间的最佳接合转移体积是40μL和400μL。
- 陈鑫杨振飞朱芮肖延辉郭利王晓丽李晓华
- 关键词：小单孢菌质粒稳定性
- 四种水体微生物总DNA提取方法的比较被引量：5
- 2014年
- 用Roling法、SDS法、CTAB改进法和Crump改进法提取水体微生物总DNA,并以细菌的16S rDNA通用引物进行PCR扩增。研究结果表明,四种提取方法提取的水体微生物总DNA大小都在23 kb以上,Roling法提取的水体微生物总DNA的浓度明显小于其他3种方法,Crump改进法提取的水体微生物总DNA的A260 nm/A280 nm和A260 nm/A230 nm比值高于其他3种方法,Crump改进法所提取的微生物总DNA可以直接用于后续的PCR扩增试验。
- 赖树锦郭佳陶新园李阳杨振飞陈鑫李晓华
- 关键词：总DNA提取PCR扩增
