雷兆静
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金苏州市科技支撑计划项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：理学环境科学与工程农业科学生物学更多>>
- 基于核酸适体结构的荧光信号转变机制检测汞离子残留的方法
- 本发明涉及一种基于核酸适体结构及荧光信号转变的机制检测汞离子残留的方法，是以标记有荧光素分子的汞离子核酸适体与标记有猝灭素的互补序列构成荧光检测体系，其中：汞离子核酸适体由27~28个碱基组成的茎环结构，拥有碱基GGAC...
- 刘贤金雷兆静张存政刘媛
- 文献传递
- 毒死蜱和汞离子核酸适体的筛选、改造及检测方法的研究
- 农药残留和重金属污染是破坏自然和生态环境、危害人类健康的重要因素,而有效的检测方法是控制有害物质扩大污染的前提和基础。当前农药如毒死蜱的检测方法主要是高效液相色谱法、气相色谱法、色谱-质谱/质谱分析方法,重金属如汞离子的...
- 雷兆静
- 关键词：核酸适体毒死蜱汞离子
- 文献传递
- SELEX技术筛选毒死蜱单链DNA适体被引量：8
- 2012年
- 试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体。体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选。利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过MFOLD分析软件对亲和力较高的适体进行二级结构预测和结合位点分析。结果表明,经过15轮筛选后,DNA文库的筛选效率达到44.00%;最终获得9条ssDNA适体,其中适体N23对毒死蜱具有最高的亲和力,其结合活性显著高于N23与水胺硫磷、丙溴磷、氧化乐果的结合活性;二级结构表明茎环结构可能是毒死蜱与适体相互作用的结构基础。
- 雷兆静张存政刘媛王丽胡秋辉刘贤进
- 关键词：适体SELEX荧光毒死蜱
- 基于核酸适体结构的荧光信号转变机制检测汞离子残留的方法
- 本发明涉及一种基于核酸适体结构及荧光信号转变的机制检测汞离子残留的方法，是以标记有荧光素分子的汞离子核酸适体与标记有猝灭素的互补序列构成荧光检测体系，其中：汞离子核酸适体由27~28个碱基组成的茎环结构，拥有碱基GGAC...
- 刘贤金雷兆静张存政刘媛
- 适体SELEX筛选中单链DNA的制备被引量：6
- 2011年
- 探讨建立适体SELEX筛选中单链DNA(ssDNA)的制备方法,生成适体筛选的次级库,为适体SELEX筛选奠定基础。将PCR扩增后带生物素标记的双链DNA(dsDNA)连接在链霉亲和素标记的凝胶上,用NaOH变性解链制备ssDNA。利用荧光法分析dsDNA与凝胶结合所需的时间及NaOH对生物素与链霉亲和素标记凝胶结合的影响,在优化的试验条件下制备ssDNA,用琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳对其产物进行鉴定。结果显示:生物素标记的dsDNA与链霉亲和素标记的凝胶结合的时间以40 min为佳,0.01 mol/L、0.10 mol/L和1.00 mol/L的NaOH均不影响生物素与链霉亲和素标记凝胶的结合;在优化试验条件下制备的产物为ssDNA。表明采用上述方法制备ssDNA,操作简单、方便,所需时间短,适用于适体SELEX筛选中次级库的生成。
- 王丽贺江王耘雷兆静屠康刘贤进
- 关键词：适体SELEX双链DNA单链DNA
- 核酸适体识别荧光法检测汞离子被引量：11
- 2012年
- 通过对已知的Ni2+适体的改造,发现了对Hg2+有较强结合活性的核酸适体N1,基于N1的二级结构进行改造,获得了具有较高活性的核酸适体N5,并建立了荧光检测方法。以荧光基团FAM标记核酸适体,在94℃变性5 min,室温(25℃)下复性30 min后,适配体与标记有荧光猝灭基团DABCYL的一段互补序列Q2结合(适体与Q2的浓度比为1∶3),加入系列浓度的Hg2+与互补序列竞争结合核酸适体,以荧光信号的变化定量分析Hg2+浓度。结果表明,N1与Hg2+结合呈线性,线性范围为1.25～20 mg/L;检出限为0.62 mg/L;以N1结构为基础改造合成的序列和结构均不同的适体N4,N5,N6,N7对Hg2+的识别结合活性均不同,其中适体N5与Hg2+结合活性最为灵敏,特异性高,线性范围为0.156～2.50 mg/L;检出限为78μg/L。
- 雷兆静张存政胡秋辉刘媛张强刘贤金
- 关键词：核酸适体荧光汞离子
