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血小板衍生生长因子D(PDGF-D)转基因鼠模型的鉴定被引量：2: 2004年; 目的 :通过SouthernBlot的方法鉴定PDGF D转基因鼠。方法 :显微注射Alpha MyHC PDGF D质粒后 ,产生的PDGF D转基因c5 7小鼠养至 4～ 6周。取 0 5～ 1 0cm的小鼠尾巴 ,蛋白酶K消化过夜 ,提取基因组DNA。PCR方法初步筛选 ,阳性鼠进行进一步的SouthernBlot验证。紫外分光光度法定量基因组DNA ,EcoRI酶切过夜 ,酶切产物经纯化后 ,电泳 ,转膜。PCR方法制备Alpha MyHC PDGF D载体上特异的hGHPolyA探针 ,然后由32 P dCTP标记探针 ,与转好的膜相互杂交 ,- 70摄氏度在X光片上曝光约 1个月 ,得到转基因鼠鉴定的结果。结果 :SouthernBlot显示 4笼共 2 0只PDGF; 王伟韩玉惠汝太; 关键词：BLOT PCR

IC53基因多态性与脑卒中的关系: 2002年; 目的:研究我们实验室从人主动脉eDNA文库克隆的新基因IC53单核苷酸多态与脑卒中的关系。方法:利用序列测定方法对IC53基因在基因组水平对96例正常人及96例脑卒中病人进行小规模SNP筛选的结果为基础,确定IC53基因Exon14终止密码子下游第213个碱基的10586位点作为大规模筛查的对象,应用PCR-RFLP方法对1461例脑卒中患者(脑卒中患者按照CT诊断标准又分为血栓性脑梗寒、腔隙性脑梗塞和高血压性脑出血三组)和1056例非脑卒中患者(即对照组.入选标准为年龄差别不超过5岁未患脑卒中的健康人或医院内其他与脑血管疾病无关的其他病人)进行比较。结果:统计分析结果显示,脑卒中组三组病人中仅血栓性脑梗塞组与对照组之间基因型频率有显著性差异(P<0.05见表),TT基因型比CT基因型、CC基因型具有更高的致病危险.CT基因型的OR值为1.361(95％CI 1.029-1.800)、TT型为1.553(95％CI 1.056-2.085)。同时,血栓性脑梗塞组分别与腔隙性脑梗塞,高血压性脑出血组基因型频率有显著性差异(P<0.05)。结论:提示IC 53基因10586位点多态性可能与血俭性脑梗塞病有关,TT基因型增加了血栓性脑梗塞的发生。; 宋莉秦宝明叶珏韩玉张震王伟石毅汪一波尚尉孙凯张红叶惠汝太; 关键词：单核苷酸多态脑卒中

FWA116基因在心衰动物模型心脏血管内皮的表达: 2003年; 建立亚急性和慢性心衰SD大鼠模型,用RNA-RNA原位杂交方法观察新基因FWA116在心脏组织的表达。以重组质粒FWA116/PGEM-T线性cDNA为模板,在T7耵或SP6RNA聚合酶作用下,体外合成地高辛(DIG)半抗原标记的FWA116cRNA探针。结果表明:与对照组相比,该基因在两种心衰大鼠心脏的中、小动脉内皮组织的mRNA表达均明显增高;与Northern blot及免疫组化的结果相一致,这提示DIG标记cRNA原位杂交方法的敏感和可靠。同时FWA116基因在心衰缺血缺氧心脏动脉内皮中的转录和翻译水平的高表达,说明该基因可能在心衰的病理过程中起到重要的作用。; 刘玉清陆立鹤韩玉陈敬洲刘宝华张禅那Huirutai; 关键词：CRNA探针原位杂交基因表达

IC53基因超表达改变系列心衰相关基因表达水平被引量：2: 2005年; 目的我们于2002年报道了IC53基因在心衰模型中高表达并能促进细胞增殖,为了进一步探讨IC53基因高表达在心衰发展过程中的作用,我们通过基因芯片分析IC53基因超表达引起的心血管疾病相关基因表达水平变化。方法将IC53基因读码框克隆到真核表达载体pCDNA3.1/Myc-His(-)A中并稳定转染ECV304细胞,分别从转染pCDNA3.1/Myc-His(-)A及pCDNA3.1/Myc-His(-)A-IC53的细胞中提取总RNA,分离mRNA,逆转录标记后与购自Clontech的人心血管疾病相关基因芯片杂交,并以Nothern杂交验证。结果IC53超表达能调控系列心血管疾病基因表达水平,显著上调的基因有PDGF-B、Vimentin、Integrinα2、Integrinα4、actinα2、desmoeollin3A/3B、14kDLectin、ecNOS等,显著下调的基因有Fosrelatedantigenl、TFP12、hDLC1、Caveolin1、Caveolin2、Caveolin3、endothelin-conveningenzyme1等。结论IC53基因超表达可以调控一些与内皮功能、炎症反应相关的基因表达,从而参与心衰发展进程。; 陈敬洲韩玉张银辉石毅汪一波张禅那郑翼惠汝太; 关键词：心衰基因芯片

IC53基因在血管及动脉粥样硬化斑块中的表达谱分析被引量：2: 2005年; 目的IC53基因是我室1998年从成人主动脉文库克隆到的新基因,前期研究发现该基因与心衰发展相关。为进一步分析IC53基因与血管性疾病的关系,我们分析了IC53基因在人血管及动脉粥样硬化斑块中的表达。方法利用本实验室自备的IC53单克隆抗体,通过免疫组化分析IC53基因的表达情况。结果IC53基因主要在血管内皮表达,在平滑肌中未检测到信号,在外膜低表达。在动脉粥样硬化斑块中,IC53基因在巨噬细胞中表达。结论IC53基因可能通过内皮细胞及巨噬细胞在心血管疾病中发挥作用。; 陈敬洲韩玉张银辉石毅汪一波王晓建惠汝太; 关键词：内皮巨噬细胞动脉粥样硬化

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韩玉