马建 作品数:9 被引量:31 H指数:3 供职机构: 黑龙江八一农垦大学农学院 更多>> 发文基金: 黑龙江省普通高校骨干教师创新能力资助计划 博士科研启动基金 大庆市科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
纹枯病菌诱导水稻表达的WRKY基因克隆及分析 被引量:2 2011年 [目的]克隆纹枯病菌诱导的水稻上调表达基因。[方法]对应用抑制差减杂交技术(SSH)获得的纹枯病菌诱导水稻表达的EST序列K16进行电子克隆,根据电子克隆产物设计引物进行RT-PCR、克隆测序,利用生物信息学技术对克隆产物进行功能预测。[结果]克隆出一个长度为1079bp的序列,结构功能分析显示该基因编码236个氨基酸的蛋白,存在多个功能位点,含有2个典型的WRKY结构域和1个C2H2锌指型结构,该基因与水稻WRKY8、WRKY24和WRKY30基因有较高的同源性。[结论]经电子克隆获得的纹枯病菌诱导表达的基因为典型的WRKY家族基因,该基因可能在水稻抗纹枯病中起重要作用。 姜述君 马建 范文艳 戴凌燕 张国庆 于涵 刘朝关键词:水稻 水稻纹枯病菌 电子克隆 WRKY基因 水稻纹枯病菌胞外蛋白酶分离纯化及部分特性分析 被引量:1 2010年 [目的]为深入研究水稻纹枯病菌的致病机理奠定基础。[方法]水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solaniKhn)发酵液经硫酸铵沉淀,用离子交换柱层析、疏水层析和分子筛层析方法分离纯化胞外蛋白酶。[结果]从水稻纹枯病菌发酵液中分离纯化到一个分子量约为49.5ku的胞外蛋白酶。其活性最适温度为30℃,最适pH为6.4。Zn2+、Fe3+、Cu2+对酶活性有抑制作用,Mg2+、Mn2+对酶活性无影响,Ca2+在低浓度下对酶活性有激活作用。[结论]水稻纹枯病菌可产生胞外蛋白酶,该胞外蛋白酶与水稻纹枯病菌致病性的关系还有待深入研究。 范文艳 陈瑾 文景芝 马建 石园园关键词:水稻纹枯病菌 胞外蛋白酶 水稻纹枯病菌胞外蛋白酶分离纯化及部分特性分析(英文) 2010年 [目的]为深入研究水稻纹枯病菌的致病机理奠定基础。[方法]水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani Kühn)发酵液经硫酸铵沉淀,用离子交换柱层析、疏水层析和分子筛层析方法分离纯化胞外蛋白酶。[结果]从水稻纹枯病菌发酵液中分离纯化到一个分子量约为49.5ku的胞外蛋白酶。其活性最适温度为30℃,最适pH为6.4。Zn2+、Fe3+、Cu2+对酶活性有抑制作用,Mg2+、Mn2+对酶活性无影响,Ca2+在低浓度下对酶活性有激活作用。[结论]水稻纹枯病菌可产生胞外蛋白酶,该胞外蛋白酶与水稻纹枯病菌致病性的关系还有待深入研究。 范文艳 陈瑾 文景芝 马建 石园园关键词:水稻纹枯病菌 胞外蛋白酶 纹枯病菌诱导水稻病程相关基因的克隆及生物信息学分析 为了获得受纹枯病菌诱导水稻抗病的相关基因,进一步了解水稻抗纹枯病菌过程中的基因表达情况。本研究以通过差减杂交得到的EST序列为信息探针,对三个水稻基因进行电子克隆得到含有完整ORF的序列,通过生物信息学的方法对其进行分析... 马建关键词:电子克隆 RAS WRKY 文献传递 水稻抑制差减杂交技术中叶片总RNA提取方法的探讨 被引量:7 2009年 为建立水稻抑制差减杂交技术中叶片总RNA最佳的提取方法,以5叶期水稻品种合江19为提取总RNA的材料,对Trizol法和两种改良Trizol法提取的水稻叶片总RNA纯度和完整性进行了比较研究。基因定量仪检测结果表明,Trizol法、改良Trizol法Ⅰ和改良Trizol法Ⅱ提取的RNAOD(260/280)分别为1.529、1.755和1.991;琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,改良Trizol法Ⅱ提取的RNA具有28 s、18 s和5 s 3条清晰的条带,且无降解,而其他两种方法提取的RNA质量较差,均有降解。该研究结果说明改良Trizol法Ⅱ提取的RNA完整性好和纯度较高,该方法优于Trizol法。 金丽娜 姜述君 戴凌燕 马建 范文艳关键词:水稻叶片 总RNA提取 TRIZOL法 水稻纹枯病菌胞外蛋白酶特性研究 被引量:2 2010年 植物病原菌产生蛋白水解酶被认为是病原菌侵染寄主的一个重要策略。作者对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani Kühn)产生的胞外蛋白酶的特性进行了研究。结果表明,水稻纹枯病菌产生一个分子量约为49.5ku的胞外蛋白酶。该酶对胰蛋白酶专一性底物Benz-Phe-Val-Arg-NA有较高的活性,并能从羧基端降解Arg和Lys。胰蛋白酶抑制剂对该酶活性有较强的抑制作用,表明该蛋白酶是一种类胰蛋白酶。在离体试验下,该蛋白酶可以降解水稻细胞壁蛋白并释放羟脯氨酸。SDS-PAGE电泳分析显示,至少有4个多肽被降解,分子量范围分别在14.4~20.1、20.1~31ku和31~43ku范围内。说明该胞外蛋白酶具有降解水稻细胞壁的能力,因此,该蛋白酶可能在水稻纹枯病菌的致病过程中起重要作用。 范文艳 文景芝 马建 陈瑾 石园园关键词:水稻纹枯病菌 细胞壁蛋白 胞外蛋白酶 黑龙江省水稻纹枯病菌的致病力分化与AFLP分析 被引量:8 2008年 为了明确黑龙江省水稻纹枯病菌遗传多样性,为水稻抗病育种和水稻纹枯病的综合防治提供依据。本文对采自13个水稻种植地区的29个水稻纹枯病菌菌株进行了致病力测定和AFLP分析。结果表明9对AFLP引物对供试菌株扩增出396条带,其中多态性带187条,占总扩增带数的47.22%。黑龙江省水稻纹枯病菌的遗传距离变化在0.50~0.92之间,平均为0.71,群体遗传多样性较为丰富。UPGMA法可以将供试菌株分成4个AFLP聚类组群(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ),相同地理来源的菌株基本上聚集在同一组群内,表明AFLP类群划分与菌株的地理来源有较强的相关性。黑龙江省水稻纹枯病菌致病性分化较为明显,并且AFLP类群划分与菌株的致病性鉴定之间存在一定相关性。 范文艳 文景芝 金丽娜 马建 陈瑾关键词:水稻纹枯病菌 AFLP 致病力 复合型丸粒剂对防风种子萌发的影响 被引量:8 2010年 研究了复合型丸粒剂对防风种子发芽和发芽生理的影响。结果表明,防风种子经复合型丸粒剂处理后,种子活力、过氧化物酶和脱氢酶活性显著提高。丸粒化防风种子发芽集中度较裸种子显著提高,为裸种子的1.39倍。这说明复合型丸粒剂可有效改善防风种子的萌发。 范文艳 马建 陈瑾 李忠魁 朱丹 姜述君关键词:防风 丸粒化 种子萌发 过氧化物酶 脱氢酶 纹枯病菌诱导水稻表达的WRKY基因克隆及分析(英文) 被引量:3 2011年 [目的]克隆纹枯病菌诱导的水稻上调表达基因。[方法]对应用抑制差减杂交技术(SSH)获得的纹枯病菌诱导水稻表达的EST序列K16进行电子克隆,根据电子克隆产物设计引物进行RT-PCR、克隆测序,利用生物信息学技术对克隆产物进行功能预测。[结果]克隆出一个长度为1079bp的序列,结构功能分析显示该基因编码236个氨基酸的蛋白,存在多个功能位点,含有2个典型的WRKY结构域和1个C2H2锌指型结构,该基因与水稻WRKY8、WRKY24和WRKY30基因有较高的同源性。[结论]经电子克隆获得的纹枯病菌诱导表达的基因为典型的WRKY家族基因,该基因可能在水稻抗纹枯病中起重要作用。 姜述君 马建 范文艳 戴凌燕 张国庆 于涵 刘朝关键词:水稻 水稻纹枯病菌