高玉婧
- 作品数：28 被引量：50H指数：4
- 供职机构：宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 三七总皂苷对糖尿病早期大鼠视网膜功能的保护作用被引量：10
- 2014年
- 目的观察三七总皂苷对糖尿病大鼠早期视网膜电图(ERG)及视网膜组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法采用链脲佐菌素(65 mg·kg-1)一次性腹腔注射SD大鼠建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组、三七总皂苷组(35 mg·kg-1)及导升明组(167 mg·kg-1),另设正常对照组。灌胃给药,20周后测定ERG后应用免疫组织化学法、蛋白印迹和逆转录PCR法检测大鼠视网膜中GFAP蛋白及mRNA的表达。结果糖尿病大鼠视网膜ERG a波、b波和OPs振幅降低,a波潜伏期延长,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。三七总皂苷组大鼠视网膜ERG b波和OPs的振幅明显升高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。同时,与正常组相比,糖尿病大鼠视网膜GFAP蛋白及mRNA的表达明显增加;与糖尿病模型组相比,三七总皂苷可降低糖尿病大鼠视网膜中GFAP蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。结论三七总皂苷能够保护糖尿病大鼠视网膜,这一作用可能是通过降低视网膜GFAP的表达来实现的。
- 姚青马晓东张茜杨怡李建宁高玉婧芦小红孙玉宁
- 关键词：糖尿病视网膜病变三七总皂苷胶质原纤维酸性蛋白
- 结核分枝杆菌TB10.4亚单位疫苗的构建及免疫原性研究
- 2015年
- 目的构建结核分枝杆菌TB10.4基因的原核表达载体,表达和纯化该蛋白,构建亚单位疫苗,并对其免疫原性进行研究。方法从重组质粒p ET-SUMO-TB 10.4获得基因片断后,将其插入到载体p ET-28a(+),转化Ecoli DH5α感受态细胞,随机筛选阳性克隆,测序正确后并将该重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析后,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化并复性。随机将C57BL/6雌性小鼠分为Tris-HCl组、TB10.4组(佐剂为DDA/Poly I∶C)及卡介苗(BCG)3组,每组10只,每只小鼠每次免疫200μL,其中DDA250μg及Poly I∶C 25μg,蛋白量为20μg,而BCG为5×106CFU,分别于1、4、7周皮下免疫小鼠。末次免疫4周后,用特异性抗原TB10.4刺激脾淋巴细胞,检测其分泌IFN-γ水平;用ELISA检测血清特异性抗体Ig G2b、Ig G1。结果构建了原核表达重组质粒p ET-28a-TB10.4,并在分子量约为10.4k Da处观察到蛋白条带;小鼠血清中产生特异性抗体Ig G2b与Ig G1,体外脾淋巴细胞受TB10.4刺激时分泌IFN-γ水平显著高于Tris-HCl组(P<0.05)及BCG组(P<0.05)。结论 TB10.4蛋白与佐剂构建了亚单位疫苗,该疫苗可在C57BL/7小鼠中诱导抗原特异性免疫应答,可作为新型结核亚单位疫苗的候选疫苗予以进一步研究。
- 胡健裴秀英苏芹苏芹王博高玉婧蒲静
- 关键词：结核分枝杆菌免疫原性
- 人感染H7N9病毒血凝素基因分析被引量：3
- 2016年
- 为研究2015年人感染H7N9流感病毒血凝素基因变化带来的病毒感染力、致病力等特征变化,从GISAID和GenBank上获取我国2015年人感染H7N9流感病毒HA核酸序列,经BLAST在线比对后下载选用的2013年和2014年人、家禽感染H7N9流感病毒HA核酸序列;利用MEGA6.0分析HA蛋白关键位点氨基酸残基的变化,比较HA核苷酸序列同源性,构建系统进化树,探讨我国2015年人感染H7N9流感病毒HA基因变化和引起的病毒感染力、致病力变化。2015年人感染H7N9病毒HA蛋白均具有能使其与人呼吸道受体特异性结合的Q226L,各样本HA蛋白氨基酸替换位点比2013年样本氨基酸替换位点增多,2015年人感染H7N9病毒出现分化。新增的氨基酸变化可能加强了H7N9病毒对人的毒力,2015年人感染H7N9病毒出现分化并具有地域性特征。
- 张继荣姚青高玉婧
- 关键词：血凝素基因分析
- 一种人呼吸道博卡病毒半巢式PCR检测试剂盒及其非诊断性检测方法
- 本发明公开了一种人呼吸道博卡病毒半巢式PCR检测试剂盒及其非诊断性检测方法。该试剂盒包括：1)病毒保护液，其成份为青霉素200U/ml、链霉素200U/ml、两性霉素B200U/ml和BSA0.125％；2)病毒裂解液，...
- 孙玉宁姚青李建宁张茜杨怡高玉婧
- 文献传递
- 维生素D受体基因多态性与宁夏结核病遗传易感性的关联性研究被引量：10
- 2008年
- 目的探讨维生素D受体(VDR)基因多态性与宁夏结核病发病的关系。方法采用以医院为基础的病例对照研究设计,选择108例临床确诊的结核病患者,平均年龄为(33.29±9.86)岁,另选择与其年龄相匹配的154例健康人群作为对照,平均年龄为(36.79±10.95)岁,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法检测VDR-FokⅠ多态性位点的基因型,计算基因型频率、等位基因频率及比值比(OR)。结果VDR-FokⅠ-FF、Ff和ff基因型在病例组中的分布频率分别为31.5%、50%和18.5%,在对照组中的分布频率分别为24.7%、61%和14.3%。以FokⅠ-ff为参照组,FokⅠ-FF和Ff与之相比,在病例组和对照组间的分布无统计学意义(P>0.05)。结论VDR基因-FokⅠ位点多态性与宁夏人群结核发病无显著的关联性。
- 高玉婧裴秀英杨华刘芳蒋学峰
- 关键词：结核VDR基因多态性遗传易感性
- 小鼠卵巢玻璃化冻存中FSH干预对移植卵巢VEGF和VEGFR-2表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的通过在玻璃化冻存液中给予重组人促卵泡刺激素(rhFSH),观察冻存卵巢异体异位移植后VEGF和VEGFR-2表达的变化,探索卵巢玻璃化冻存中的FSH干预对移植卵巢血流重建相关因子的影响。方法对4周龄C57BL/6J小鼠卵巢进行异体肾被膜下移植,实验分为新鲜移植组(FCG)、单纯玻璃化冻存移植组(VCG)和0.3IU·mL-1FSH干预玻璃化冻存移植组(VG-FSH)。通过监测受体小鼠动情周期的变化、卵巢组织切片中正常卵泡百分比、移植后2、7、14、28d卵巢VEGF及其受体VEGFR-2的表达,判断FSH干预效果。结果 FSH干预冻存组的正常卵泡数、VEGF及VEGFR-2的表达均高于单纯玻璃化冻存组(P<0.05),且均低于新鲜移植组;FSH干预冻存组动情周期恢复所需时间明显低于冻存组(P<0.05),而明显长于新鲜移植组(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH干预,有利于冻存卵巢移植后的卵泡存活及功能恢复,可能与上调促血管生成的VEGF、VEGFR-2蛋白的表达有关。
- 颜贝单园园蒲静王燕蓉高玉婧张淑雅杨延周裴秀英
- 关键词：小鼠卵巢FSH玻璃化冻存VEGFVEGFR-2
- 宿主基因与结核病遗传易感性研究进展被引量：2
- 2007年
- 高玉婧裴秀英
- 关键词：结核病世界卫生组织结核分枝杆菌人类基因组学蛋白质组学
- 慢病毒介导的犬WRD细胞p53基因沉默及稳定感染细胞系的建立被引量：2
- 2014年
- 目的构建靶向犬p53基因慢病毒干扰载体,建立稳定沉默p53基因的WRD/p53-细胞系。方法设计并构建4条针对犬p53基因的特异性shRNA干扰质粒。将构建的慢病毒表达载体(p GMLV-p53)和包装质粒(packaging mix)组成的包装系统共转染293T细胞,包装病毒,收集病毒原液,超滤浓缩,并测定滴度。包装好的慢病毒感染WRD细胞,Western blot和实时荧光定量PCR方法检测不同靶点RNA干扰载体对p53基因的干扰效果,确定有效靶点。针对有效靶点慢病毒颗粒以最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)感染WRD细胞,puromycin抗生素筛选稳定感染细胞系WRD/p53-。结果结果显示p53 RNAi慢病毒载体构建成功,成功包装四种不同靶点的p53基因RNA干扰慢病毒,病毒滴度均达到1×109TU/ml。四种干扰载体慢病毒均具有较好的干扰效果,选用沉默效果最好的p GMLV-p53A1为最优靶点,成功建立p53 RNAi慢病毒载体稳定感染细胞系WRD/p53-。结论成功构建p53 RNAi慢病毒载体,并有效干扰WRD细胞中p53 mRNA和蛋白表达,同时成功筛选并建立p53RNAi慢病毒稳定感染WRD/p53-细胞系。
- 李芳闫琰张茜李建宁姚青高玉婧杨怡孙玉宁
- 关键词：P53慢病毒载体P53
- 雄激素非依赖性前列腺癌细胞系LNCaP-ADR的建立与鉴定
- 2021年
- 目的建立雄激素非依赖性前列腺癌细胞系LNCaP-ADR,为进一步研究前列腺癌的去势抵抗治疗机制奠定实验基础。方法将雄激素依赖性的前列腺癌细胞LNCaP作为亲本细胞,用含有10%木炭-右旋糖酐剥离的胎牛血清无酚红的RPMI 1640培养基进行雄激素剥夺培养,建立雄激素非依赖性的前列腺癌细胞系LNCaP-ADR。通过MTS实验和平板克隆形成实验,比较LNCaP亲本细胞和LNCaP-ADR细胞在雄激素剥夺培养条件下的增殖能力及对雄激素受体(AR)拮抗剂比卡鲁胺的敏感性;采用流式细胞术观察两种细胞在雄激素剥夺培养或比卡鲁胺处理下的细胞凋亡率,采用RT-qPCR检测AR信号通路靶基因PSA、TMPRSS2的表达变化。结果MTS实验和平板克隆形成实验结果表明,在雄激素剥夺培养条件下,雄激素非依赖性前列腺癌细胞系LNCaP-ADR的增殖能力和克隆形成能力较LNCaP亲本细胞增高(P均<0.01);细胞凋亡结果显示,LNCaP亲本细胞在雄激素剥夺培养条件下的细胞凋亡率高于LNCaP-ADR细胞(P<0.05);细胞毒性实验及凋亡检测结果表明,与LNCaP亲本细胞相比,LNCaP-ADR细胞对比卡鲁胺的敏感性降低(LNCaP IC_(50)=49.18μmol·L^(-1)、LNCaP-ADR IC_(50)=94.21μmol·L^(-1)),相同浓度比卡鲁胺诱导LNCaP-ADR细胞发生的凋亡率较LNCaP亲本细胞减少;RT-qPCR结果显示,在雄激素剥夺培养条件下,LNCaP-ADR中AR下游靶基因PSA、TMPRSS2的表达水平较亲本细胞增高(P<0.01)。结论本实验成功构建了雄激素非依赖性前列腺癌细胞系LNCaP-ADR,该细胞系对雄激素剥夺及雄激素受体拮抗剂比卡鲁胺具有较强的抵抗特性。
- 史昕艺芦晓红吴晓婷罗明秀陈捷珲王芳赵薇高玉婧
- 关键词：前列腺癌LNCAP细胞雄激素依赖性
- 模板DNA质量对单核苷酸多态性分析的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探索在单核苷酸多态性分析中模板DNA质量对实验的影响以及提高模板DNA质量的途径。方法用PCR-RFLP法研究SNP rs1024611(G/A)的基因分型,从样本保存方式、保存时间及DNA提取方法三方面进行对比实验,观察其对模板DNA质量及SNP分析的影响。结果从抗凝血中提取DNA模板的得率比非抗凝血高,在SNP分析中,EDTA抗凝血效果最好、肝素抗凝血效果不好;基因组DNA在全血中的有效保存时间比提纯的DNA有效时间长;试剂盒法提取DNA的得率和纯度均高于传统的酚-氯仿法。结论可通过以下途径提高SNP研究中DNA模板的质量:采集血样用EDTA抗凝、分装成小份在-20℃冻存,避免反复冻融。使用前在37℃水浴中快速解冻,用试剂盒法提取DNA更适合于SNP的研究,提取的模板DNA要及时实验或分装后冻存于-20℃,若需长期保存模板DNA,保存全血优于保存纯化的DNA。
- 张淑雅李岩裴秀英高玉婧刘芳蒋学锋董晓薇随瑞枝
- 关键词：单核苷酸多态性
