龚理
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：福建农林大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家教育部博士点基金福建省科技计划重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应体系优化及引物快速筛选被引量：4
- 2014年
- 以国兰杂交品种(系)为材料,采用L16(45)正交试验设计对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、模板及引物等5个重要影响因素进行优化,确定国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应的最优反应体系为(25μL体系):Taq DNA聚合酶,1 U;Mg2+,1.8 mmol/L;dNTPs,0.08 mmol/L;模板DNA,100 ng;引物,上下游各0.3 mmol/L;10×PCR Buffer,2.5μL。此外,本试验采用DNA混合池技术(DNA pooling)快速筛选SRAP引物,从180对SRAP引物组合中筛选出39对扩增产物丰富、多态性高的引物组合。与常规方法相比,该技术明显缩短试验周期、节约了模板用量,为快速高效筛选SRAP引物提供了新思路。
- 龚理黄添毅王芳陈倩淑吴少华李永裕
- 关键词：引物筛选
- 部分国兰品种（系）的SRAP遗传多样性研究
- 国兰（Chinese Cymbidium）主要包括春兰（Cymbidium goeringii）、蕙兰（Cymbidium faberi）、建兰（Cymbidium ensifolium）、墨兰（Cymbidium si...
- 龚理
- 关键词：品种资源分子标记
- 文献传递
- 早熟砂梨ISSR-PCR反应体系的建立与优化
- 2013年
- 以我国南方主栽的早熟砂梨品种‘翠冠’Pyrus pyrifolia‘Cuiguan’为材料,对ISSR技术体系中的模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、退火温度、PCR循环数等7个主要因素进行优化和筛选,建立了适合早熟砂梨的ISSR-PCR反应体系。最终反应体系为20μL体系中10×PCR buffer(不含Mg2+)2μL,模板DNA浓度60 ng,TaqDNA聚合酶0.75 U,引物浓度1μmol/L,dNTP浓度90μmol/L,Mg2+浓度2.25 mmol/L。扩增程序为:预变性94℃5 min,变性94℃45 s,退火45 s,72℃延伸1 min,共42个循环,然后72℃再延伸10 min,4℃保存,用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测多态性。
- 宋燕春李永裕陈建烟黄添毅龚理吴少华
- 关键词：早熟砂梨ISSR
