张剑
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：军队杰出人才基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测被引量：3
- 2006年
- 目的:获得大量重组人α防御素(HDα)并检测其活性,为其深入研究提供必要的材料。方法:体外化学合成得到带有羟氨裂解位点编码序列的HDα基因片段,克隆入pBV220-IL-4表达载体构建重组表达载体pBV220-IL-4-HDα。测序正确后将重组质粒转入大肠杆菌DH5α中进行温度诱导表达。经羟氨裂解去除IL-4后,对所得蛋白进行纯化、复性,以SDS-PAGE和生物学活性检测鉴定其特性。结果:经温度诱导后,融合蛋白主要以包涵体的形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的20%;羟氨裂解切除IL-4后,所得目的蛋白的纯度约为99.8%。抑菌活性试验和克隆形成试验显示,所得HDα对细菌生长有明显的抑制作用。结论:成功地构建了HDα基因的重组表达质粒,获得稳定表达的工程菌,并建立了复性与纯化技术,为进一步对其进行功能研究与应用奠定了基础。
- 傅海燕张剑路凡蒲勤王孝功卢兹凡徐俊卿赵忠良
- 关键词：纯化生物学活性
- Restin与转录因子的相互作用被引量：6
- 2004年
- Restin 是从维甲酸诱导分化的白血病细胞中克隆的一种黑色素瘤相关抗原家族基因,对细胞增殖具有抑制作用.由于该基因定位于细胞核,且其同源基因Necdin(神经细胞生长抑制因子)与转录因子p53和E2F1具有强烈的相互作用,推测Restin也可能作用于某种转录因子.为此,克隆了转录因子p53,AP1,ATF和E2F,研究Restin与这些转录因子的相互作用.结果发现Restin与ATF3表现出强烈的相互作用.ATF3是细胞应激反应中非常重要的转录因子,推测Restin对细胞增殖的抑制作用可能与ATF3活性的抑制有关.
- 吴有盛路凡齐颖新王瑞华张剑卢兹凡赵忠良
- 关键词：转录因子相关抗原E2F1神经细胞生长相互作用
- 人防御素-α克隆表达纯化及生物活性初步检测被引量：2
- 2005年
- 张剑傅海燕杨瑞静蒲勤王孝功路凡赵忠良
- 关键词：生物活性克隆表达纯化杀灭作用细菌感染
