田谷
- 作品数:7 被引量:9H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金:农业部农村能源综合建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 糖化酶、木聚糖酶融合蛋白在毕赤酵母中的高效表达被引量:1
- 2012年
- 通过RT-PCR方法,以埃默森篮状菌(Talaromyces emersonii)总RNA为模板,克隆出糖化酶(glucoamylase,amyA)基因的成熟肽编码序列(1 857 bp),编码618个氨基酸;以类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)H10-3基因组DNA为模板,克隆出木聚糖酶(xylanase A,xynA)基因的成熟肽编码序列(636 bp),编码211个氨基酸。通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)得到拼接片段amyA-l-xynA,并将其克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中,得到重组质粒pPIC9-amyA-l-xynA,重组质粒线性化后经电击转化到毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中,得到了表达成功的工程菌ALX2。在ALX2发酵上清液中同时检测到糖化酶活性(10.7 U/mL)和木聚糖酶活性(51.8 U/mL)。
- 王智顿宝庆顾金刚赵萱田谷路明李桂英
- 关键词:糖化酶木聚糖酶毕赤酵母
- 桔青霉木聚糖酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达及活性分析被引量:2
- 2012年
- 通过同源序列PCR克隆的方法,获得桔青霉(Penicillium citrinum)CR-2菌株的木聚糖酶编码基因xyl,该基因全长984 bp,编码327个氨基酸,无内含子序列,具有完整开放阅读框。其编码的氨基酸序列N端具有一段包含19个氨基酸的信号肽序列,并具有糖基水解酶第10家族(GH10)的保守催化域特征,推测该酶属于第10家族成员。将该基因与毕赤酵母表达载体pPIC9相连接构建重组载体pPIC9-XYL,电击转化至毕赤酵母GS115菌株中。挑选阳性重组子经测序、酶活性以及SDS电泳分析表明,xyl基因成功在毕赤酵母中分泌表达,重组酶活性可达214.15 IU/mL。该重组酶最适温度与最适pH分别为50℃和4.5,且具有良好的pH和热稳定性。
- 田谷顿宝庆王智李维维许修宏李桂英
- 关键词:桔青霉木聚糖酶毕赤酵母酶学性质
- 表面展示表达纤维素酶的酿酒酵母发酵微晶纤维素生产乙醇
- 筛选高活性纤维素酶生产菌,构建新型高效的纤维素降解工程菌被认为是目前针对能源消耗、油价上涨、环境污染等一系列问题最有效的解决途径之一。 本研究结合刚果红染色和酶活检测的方法筛选得到一株可高效降解纤维素的菌株,形态学观...
- 田谷
- 关键词:纤维素酶酿酒酵母菌株乙醇发酵生产
- 文献传递
- 一种长枝木霉菌株及其应用
- 本发明筛选出了一种新的可生产纤维素降解酶的长枝木霉菌株CD-6,所述长枝木霉CD-6培养方便,生长繁殖迅速;对于内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和木聚糖酶都具有较高的生产能力,且具有较高的酶活性。
- 顿宝庆田谷王智
- 文献传递
- 米根霉糖化酶、类芽孢杆菌木聚糖酶融合蛋白的真核分泌表达被引量:1
- 2011年
- 以米根霉(Rhizopus oryzae)3.866基因组DNA为模板,克隆得到糖化酶基因(glucoamylase gene,amyA),基因全长2049bp,编码604个氨基酸;以类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)H10-3基因组DNA为模板,克隆出基因木聚糖酶基因(xylanase A gene,xynA)的成熟肽编码序列,长636bp,编码211个氨基酸。通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)得到拼接片段amyA-l-xynA,并将其克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中,得到重组质粒pPIC9-amyA-l-xynA,重组质粒线性化后经电击转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,得到了表达成功的工程菌AX11。在AX11发酵上清液中同时检测到糖化酶活性(5.8U/mL)和木聚糖酶活性(32.3U/mL)。
- 王智宋立立顾金刚顿宝庆田谷路明李桂英
- 关键词:糖化酶木聚糖酶毕赤酵母
- 一种长枝木霉菌株及其应用
- 本发明筛选出了一种新的可生产纤维素降解酶的长枝木霉菌株CD-6,所述长枝木霉CD-6培养方便,生长繁殖迅速;对于内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和木聚糖酶都具有较高的生产能力,且具有较高的酶活性。
- 顿宝庆田谷王智
- 文献传递