祁贤
- 作品数：168 被引量：1,356H指数：20
- 供职机构：江苏省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省医学重点人才培养基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 基于一体化系统的呼吸道合胞病毒分型即时检验检测技术的建立及应用
- 2024年
- 目的研发一款一体化呼吸道合胞病毒(RSV)分型即时检验(point-of-care testing,POCT)检测试剂并评估其性能。方法以RSV A和B亚型及ON1和BA9基因型的基因组保守序列设计特异性的引物和探针,优化PCR反应体系和条件,整合试剂玻璃化技术和多重检测平台,开发RSV分型POCT检测试剂,并对该产品的敏感度、特异度、重复性和临床性能进行评估。结果一体化RSV分型POCT检测试剂敏感度可达500拷贝/ml,特异度好,与临床上表现相似的病原体无交叉反应,试剂批间和批内重复性Ct值的变异系数均<5%,具有较好的重复性,检测试剂应用于53例临床样本测试,检测结果与对比试剂具有较高的一致性和符合率,阳性符合率高达98.11%。结论本研究开发的一体化RSV分型POCT检测试剂集成了"核酸提取-纯化-检测",实现了"样本进,结果出",操作简单,检测结果准确、可靠、稳定,可用于RSV A和B亚型的分型即时检验,为RSV的防控和诊疗提供助力。
- 邓斐朱立国许可祁贤余慧燕王慎骄鲍倡俊
- 关键词：呼吸道合胞病毒一体化
- 甲型H1N1(2009)病毒变异株的发现及其流行病学意义
- 自2009年3月份，源于北美的流感疫情向全球迅速扩散，最终演变为1968年以来新世纪首次流感大流行。此次大流行的病原属于甲型H1N1流感病毒，但在遗传特性和抗原等方面都有别于人群中流行多年的季节性H1N1流感病毒，人群普...
- 汪华祁贤
- 关键词：流行病流感病毒变异株
- 猪伪狂犬病病毒S1株的分离与鉴定被引量：12
- 2002年
- 从上海某猪场发病仔猪体内分离到 1株病毒 ,该毒株能在鸡胚成纤维细胞、RK、Vero、BHK2 1、ST、PK15细胞上增殖并产生细胞病变。通过蚀斑克隆对其进行纯化 ,克隆毒株在BHK2 1细胞上的TCID50 为 5 0 μL 10 -6.68稀释液。该病毒能被伪狂犬病毒 (PRV )阳性血清中和。接种细胞经PRV荧光抗体染色呈阳性反应。电镜观察可见直径 110～ 180nm的典型疱疹病毒粒子。用该病毒接种兔和仔猪均出现典型的伪狂犬病症状。表明该分离毒株为PRV。
- 祁贤张婉华叶向阳朱永军
- 关键词：伪狂犬病毒克隆
- 慢病毒介导的H7N9禽流感病毒血凝素基因快速真核表达系统的建立被引量：1
- 2014年
- 目的利用慢病毒载体构建新型H7N9禽流感病毒血凝素(HA)基因的快速真核表达体系,在人胚肾细胞(HEK293T)中表达并进行功能鉴定。方法提取H7N9禽流感病毒基因组RNA,采用反转录PCR技术扩增HA读码框全长基因,将HA基因连接pMD18-T载体构建pMD18-T-HA重组载体。设计含Kozak序列的引物从pMD18-T-HA质粒中扩增出平末端HA基因,采用Topo克隆构建表达载体pLenti-HA-V5。将表达载体转染HEK293T细胞,通过间接免疫荧光法(IFA)和Western blot法鉴定HA蛋白的表达,通过血凝实验鉴定重组蛋白的生物学活性。结果经反转录PCR获得1 683 bp的HA全长基因,完成真核表达载体的构建并表达出相对分子质量(Mr)为70 000的重组蛋白。IFA和Western blot法结果显示该蛋白与阳性血清具有良好的免疫反应,同时血凝实验证实其具有血凝活性。结论成功利用慢病毒载体建立了HA蛋白的快速真核表达系统,为研制H7N9病毒亚单位疫苗、中和表位研究、假病毒包装奠定基础。
- 张黎彭海燕周明浩余慧燕曾晓燕祁贤崔仑标焦永军史智扬
- 关键词：血凝素基因慢病毒载体真核表达系统
- 猪流感病毒流行特点及其新型甲型H1N1流感病毒的基因来源分析被引量：9
- 2009年
- 祁贤朱凤才李亮祖荣强羊海涛汪华
- 关键词：猪流感病毒基因
- 2010年至2012年江苏省乙型流行性感冒病毒血凝素分子进化特征被引量：2
- 2016年
- 目的了解江苏省乙型流行性感冒（流感）病毒血凝素（HA）分子进化特征。方法取2010年1月至2012年12月乙型流感病毒40株，两步法扩增毒株HA片段，对PCR产物纯化并测序。中国疾病预防控制信息系统导出流感监测数据；应用SPSS、DNAStar、Bioedit和MEGA、BEAST等软件进行数据的统计分析。结果2010年1月至2012年12月江苏省累计报告乙型流感患者4355例，Victoria系3420例，Yamagata系935例。从HA基因进化树可以看出同一地区、同一年份的毒株同源性较高。Victoria系毒株与疫苗株相比，发生抗原位点146I→V、197D→N、129N→S替换，受体结合位点197D→N替换。Yamagata系毒株HA1与疫苗株相比，发生抗原位点198N→T、116N→K、146A→S替换。受体结合位点198N→T替换。Victoria、Yamagata系毒株各自在197、196位增加了一个糖基化位点；HA1基因尚未受到明显的正向选择压力，HAl基因核苷酸平均碱基替代率为1．05×10^-3[95％最高后验密度区间（HPD）：0．65×10^-3～1．45×10^-3]替换／（位点·年），贝叶斯轮廓曲线（BSP）模型结果和流行病学资料相符。结论乙型流感病毒分离株HA与相应的疫苗株相比发生了部分抗原位点、受体结合位点氨基酸变化，均增加一个糖基化位点。
- 李伟洪镭许阳婷王炜翔祁贤资海荣郭艳卫平民
- 关键词：流感病毒B型血凝素类进化
- 我国部分地区猪流感病毒分子流行病学及致病性研究
- 1 套式RT-PCR方法检测临床样品中的猪流感病毒 根据A型流感病毒NP基因的保守序列设计两对引物，建立了检测临床样品中猪流感病毒的套式RT-PCR方法。该法对其它猪呼吸道病原体如PRRSV、PCV-2型和猪支原体无交叉...
- 祁贤
- 关键词：猪流感病毒亚型鉴定基因重配种间传播
- 文献传递
- 江苏省肠道病毒71型分离株的分子遗传演化特征被引量：3
- 2011年
- 肠道病毒71型（EV71）是小RNA病毒科肠道病毒属成员,其感染主要引起患者手足口病（handfoot-mouth disease,HFMD）,个别患者可引起无菌性脑膜脑炎等并发症.自1998年EV71在中国台湾暴发以来,EV71病毒在亚洲的流行呈上升趋势.流行病学资料表明,不同地区不同症状的EV71病毒性疾病的暴发可能与毒株间的差异等因素有关[1].为了解EV71病毒的遗传和变异特征,本实验室对2009年在江苏手足口病流行地区分离到的一株EV71型病毒株（Jiangsu01,GenBank：FJ600325.1）的基因组核苷酸序列进行了遗传进化分析,从分子水平为EV71病毒的流行以及所致疾病的防控提供理论基础.
- 吴斌闫强汤奋扬李亮徐飞海葛胜祥崔仑标王慎骄付建光田华秦圆方邓斐祁贤朱凤才羊海涛汪华
- 关键词：肠道病毒71型分子遗传分离株EV71病毒小RNA病毒科无菌性脑膜脑炎
- 猴痘病毒进化及检测技术研究进展被引量：6
- 2023年
- 猴痘病毒是与天花病毒近亲的一种正痘病毒。2022年,猴痘病毒在全球100多个国家引起暴发和流行,成为年度国际关注的突发公共卫生事件。与之前的暴发疫情相比,引发2022年疫情的猴痘病毒明显增强了对人体的适应性,传播范围持续扩大,导致全球大流行的风险增加。现对猴痘病毒分子进化及实验室检测技术的最新进展进行综述,并对猴痘病毒未来的研究方向和防控策略提出思考和建议。
- 祁贤
- 关键词：猴痘病毒
- 甲型H1N1流感，科学预防理智应对
- 2009年
- 猪流感是由A型流感病毒引起的一种猪的急性呼吸道传染病。这种病在猪中经常发生，但很少导致猪的死亡。通常情况下，人类更是很少感染猪流感病毒，许多人甚至都没有听说过猪流感。
- 祁贤李靖
- 关键词：A型流感病毒H1N1急性呼吸道传染病猪流感病毒甲型理智
