聂浩
- 作品数：18 被引量：75H指数：6
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家教育部博士点基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 弓形虫微线体蛋白MIC3基因的克隆及原核表达被引量：16
- 2006年
- 根据编码MIC3的已知基因序列设计并合成一对引物,应用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的全长基因,克隆入pGEX-KG表达载体,转化入E.coliDH5α感受态细胞,经含氨苄青霉素琼脂平板筛选,小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定。然后阳性重组质粒转化入E.coliBL21-CodonPlus,IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定。结果显示,扩增的MIC3基因与GenBank中相应基因序列(AJ132530)的同源性达99.6%,表达的MIC3融合蛋白表观分子量约为66 ku,且可被兔抗弓形虫免疫血清识别。说明所获得的表达蛋白质具有一定的反应原性,为下一步利用重组蛋白建立弓形虫的诊断方法和研制弓形虫的亚单位疫苗奠定了基础。
- 江涛周艳琴刘琴聂浩姚宝安赵俊龙
- 关键词：龚地弓形虫基因克隆
- γ-干扰素对弓形虫MIC3的基因免疫效果研究被引量：5
- 2007年
- 将编码弓形虫微线蛋白3(MIC3)的真核表达质粒pcMIC3和编码γ-干扰素(IFN-γ)的真核表达质粒pcIFN-γ各100μg混合肌肉注射,间隔2周、3次免疫Balb/c小鼠,同时设相同剂量的pcMIC3、pcDNA和PBS免疫对照组。分别以酶联免疫吸附试验(ELISA)、四氮甲唑蓝(MTT)比色法和乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测试验小鼠血清的特异性抗体、脾淋巴细胞的增殖应答和细胞毒性T细胞(CTL)活性,并观察腹腔接种弓形虫RH株速殖子后质粒的免疫保护效果。结果表明:与其它试验组相比,pcMIC3+pcIFN-γ组试验小鼠在免疫8周后的ELISA抗体水平、脾淋巴细胞的增殖应答和CTL活性显著或极显著提高,免疫小鼠45 d时的生存率为100%,能有效抵抗小剂量弓形虫强毒株的攻击。
- 江涛周艳琴聂浩陈声国方瑞姚宝安赵俊龙
- 关键词：刚地弓形虫Γ-干扰素基因免疫
- 弓形虫-伪狂犬病毒重组二价基因工程疫苗研究
- 弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的、在世界范围内广泛流行的人兽共患寄生虫病。猫是弓形虫的终末宿主,会排出感染性的卵囊,卵囊被认为是弓形虫感染的主要来源之一。人...
- 聂浩
- 关键词：刚地弓形虫SAG1重组伪狂犬病毒
- 文献传递
- 检测牛血吸虫病的重组LHD-Sj23蛋白乳胶凝集试验的建立被引量：2
- 2009年
- 利用原核表达的日本血吸虫重组LHD-Sj23蛋白作为抗原致敏乳胶,建立诊断牛血吸虫病的乳胶凝集试验(LAT)。用制备的乳胶抗原分别检测牛结核杆菌、牛泰勒虫、牛巴贝斯虫、牛口蹄疫、牛边虫、牛传染性支气管炎阳性血清,结果均为阴性,说明建立的乳胶凝集方法具有良好的特异性。用所建立的LAT方法与ELISA方法同时检测169份牛血清,结果表明,建立的LAT方法的特异性为94.29%,敏感性为93.10%,两种方法的符合率为94.08%(P>0.05),差异不显著。用同一批乳胶抗原检测7份牛血清,5次检测结果一致,说明致敏的乳胶抗原是稳定的。保存期试验结果表明,致敏乳胶在25℃可保存1个月,在4℃可保存3个月。这表明建立的LAT方法稳定、特异性强、灵敏度高、操作简便快速,无需昂贵仪器,适宜在临床上推广应用。
- 赵清兰李友聂浩赵俊龙
- 关键词：牛血吸虫病乳胶凝集试验
- 土壤中弓形虫的分子检测方法
- 本发明属于寄生虫分子检测技术领域，涉及一种土壤中弓形虫的分子检测方法，尤其涉及一种利用环介导的等温扩增(LAMP)技术快速检测土壤环境中弓形虫卵囊的方法。本发明的特征是，通过设计一套弓形虫的特异性引物，提取被检土壤样品中...
- 杜芬赵俊龙周艳琴聂浩涂攀张庆丽李法财
- 文献传递
- 二丙酸咪唑苯脲对猪附红细胞体病的疗效试验被引量：10
- 2008年
- 目的验证新药二丙酸咪唑苯脲对猪附红细胞体病的治疗效果。方法以PCR检测阳性的断奶仔猪为对象,注射免疫抑制剂诱导发病后进行治疗,设二丙酸咪唑苯脲高中低剂量组,血虫净治疗组,阳性对照组和阴性对照组。结果二丙酸咪唑苯脲在2.0 mg/kg剂量时,对附红细胞体有一定的抑制和杀灭作用,效果最好,优于血虫净。结论本实验的结果为临床应用二丙酸咪唑苯脲治疗猪附红细胞体病提供了重要依据。
- 陈声国索勋聂浩李友周艳琴方瑞王正松赵俊龙
- 关键词：附红细胞体疗效
- 猪弓形虫病的研究进展被引量：8
- 2005年
- 弓形虫病是一种分布广泛、危害严重的人畜共患病,不但在公共卫生上有很重要的意义,对养猪生产也曾造成过巨大经济损失。近年来,各国学者在猪弓形虫病的流行病学、临床表现、诊断方法以及防治等方面都进行了研究,本文就该病进行简要概述。
- 聂浩江涛邓中清姚宝安赵俊龙
- 关键词：弓形虫病流行病学猪弓形虫病人畜共患病公共卫生经济损失
- 检测多种动物弓形虫抗体的SPA-ELISA方法的建立及初步应用被引量：4
- 2009年
- 利用重组弓形虫MIC3作为包被抗原，SPA作为偶联物建立了可检测多种动物弓形虫抗体的SPA—ELISA方法。确定了抗原最适包被质量浓度为2．6mg／L；血清最适稀释度为1：160，作用时间为45min；优化了酶标SPA工作浓度，作用时间及底物显色时间。对已知阳性血清的检测下限可达1：6400，其敏感性是IHAT方法的50～100倍。对临床4种动物共332份血清进行检测，阳性率由高到低依次为：SPA-ELISA（39．4％）〉MAT（39．1％）〉IHAT（13．1％）。以上结果表明，SPA-ELISA不失为一种适用于多种动物弓形虫抗体检测的理想方法。
- 张东林惠煜周艳琴董海岚方瑞聂浩王正松赵俊龙
- 关键词：弓形虫
- 蛋白AG检测多种动物弓形虫抗体AG-ELISA的效果评价
- 2008年
- 利用建立的可检测多种动物弓形虫抗体的AG-ELISA方法,检测了人工感染及自然感染4种动物血清中的弓形虫抗体。对人工感染猪血清的检测结果表明,AG-ELISA法可于感染后第10天全部检出阳性,早于MAT方法的第14天,其检出率、敏感性及准确度等指标亦优于MAT法。在对临床上304份动物血清检测中,AG-ELISA法对猪、羊血清的阳性检出率高于MAT法,而对犬、猫血清的检出率则与MAT法相同。Kappa一致性试验表明,AG-ELISA法与MAT法符合良好。上述结果证实AG-ELISA法可用于多种动物弓形虫抗体的检测。
- 张东林惠煜周艳琴王玉海方瑞聂浩王正松赵俊龙
- 关键词：弓形虫
- 湖北省规模化猪场弓形虫病动态流行病学调查
- 弓形虫病是由刚地弓形虫感染人和动物而致病的一种人畜共患病。刚地弓形虫感染具有宿主多、分布广等特点，尤其对养猪业造成了巨大的经济损失。本研究运用AG-ELISA方法对湖北省11个规模化猪场进行了为期9个月的弓形虫病动态流行...
- 王正松聂浩方瑞肖犟冯辉辉涂攀周艳琴赵俊龙
- 关键词：弓形虫规模化猪场流行病学
