胡采红
- 作品数:4 被引量:0H指数:0
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 造血发育过程中造血祖细胞生物学特性的时空变化
- 2009年
- 本实验以小鼠胚胎主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区、胎肝(fetalliver,FL)以及小鼠骨髓(bonemarrow,BM)为研究对象,研究各阶段造血祖细胞在发育过程中的c-kit的表达变化和部位迁移,以及不同发育阶段、不同造血部位来源c-kit+细胞的生物学特性。用流式细胞术检测小鼠胚胎10.5天(embryonic10.5,E10.5)、E11.5的AGM区,E12.5、E14.5、E16.5、E18的FL以及BM来源的单个核细胞中c-kit+细胞的比例。用磁珠分选法分离E10.5AGM区、E14.5FL以及BM来源c-kit+细胞,贴壁培养法分离小鼠E14.5FL基质细胞。建立体外Transwell共培养体系,比较不同来源的c-kit+细胞增殖、分化、迁移以及集落形成能力。流式细胞术检测发现:相对于BM,E10.5AGM区和E12.5FL中c-kit+细胞比例较高。进行体外培养,AGM区来源c-kit+细胞具有较强的增殖潜能,而FL、BM来源的c-kit+细胞在体外培养中更容易分化;AGM区和FL来源的c-kit+细胞比BM来源的c-kit+细胞在体外培养中具有更强的趋化迁移能力。集落形成能力方面,AGM区来源c-kit+细胞具有较强形成混合集落形成单位(CFU-Mix)的能力;FL、BM来源c-kit+细胞则能形成更多粒单系集落形成单位(CFU-GM)。以上结果表明,和FL、BM来源的c-kit+细胞相比,AGM区来源c-kit+细胞具有更强的体外增殖、多系分化潜能以及趋化迁移能力,在未来可能有着更广阔的应用前景。
- 周琨黄丽芳胡采红刘文励孙汉英
- 关键词:造血祖细胞造血发育主动脉-性腺-中肾区胎肝
- Wnt、Notch信号参与造血微环境调控造血机制的研究
- 2009年
- 目的探讨造血发育过程中Wnt和Notch信号通路参与造血微环境调控造血的机制。方法磁珠分选法分离小鼠骨髓c—kit^+造血干/祖细胞(HSPC)。贴壁培养法分离小鼠孕10.5d主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区,孕12.5d、14.5d、16.5d胎肝以及骨髓来源的基质细胞。通过Transwell共培养以及流式细胞术计数.比较不同来源基质细胞支持HSPC增殖的能力。通过实时定量PCR和免疫荧光动态检测各发育阶段基质细胞中Wnt、Notch mRNA和蛋白的表达。结果体外培养7d,AGM区和胎肝基质细胞培养体系中c-kit^+细胞数由0.4×10^5/孔分别扩增为(19.2±3.2)×10^5/孔和(26.8±5.4)×10^5/孔.明显高于骨髓基质细胞培养体系的(9.6±2.9)×10^5/孔(P〈0.05);其中,AGM区和骨髓基质细胞培养体系中c—kit^+细胞比例分别为(75.2±7.1)%和(74.1±6.2)%,明显高于胎肝基质细胞培养体系的(63.4±5.3)%(P〈0.05)=Wnt、Notch在各阶段基质细胞均有表达,Wnt在ACM区和胎肝基质细胞表达水平较高,Notch在AGM区及骨髓基质细胞表达水平较高(P〈0.05)、结论造血发育过程中,造血微环境通过Wnt与Notch信号通路协作、交替、整合,精密调控HSPC的发育.
- 周琨胡采红黄丽芳刘文励孙汉英
- 关键词:造血微环境造血干细胞造血调控
- 外源性shh蛋白对c-kit^+造血祖细胞增殖分化作用研究
- 2010年
- 目的探讨sonic hedgehog(Shh)信号对小鼠造血祖细胞的扩增分化调控作用。方法取孕14.5天Balb/C小鼠,分离培养小鼠胎肝基质细胞作饲养层。免疫磁珠法分选小鼠骨髓来源c-kit+造血祖细胞,将分选的造血祖细胞在不同实验组培养条件下培养7d(a.对照组;b.Shh组;c.以胎肝基质细胞为饲养层的Transwell共培养组;d.Shh+Transwell共培养组)。通过绘制细胞生长曲线,免疫表型鉴定及功能分析,观察胎肝基质细胞饲养层以及Shh活性肽对细胞增殖、分化、集落形成的调控作用。结果和对照组相比,胎肝基质细胞可以明显促进造血祖细胞增殖(P<0.05);单纯的外源性Shh蛋白可以同时促进造血祖细胞的增殖和分化(P<0.05);在与胎肝基质细胞共培养体系中,外源性Shh蛋白可以明显地促进细胞增殖,经过体外培养7d后,细胞数达80×105,其中c-kit+细胞占(84±9.44)%,集落形成能力亦明显增强。结论 Shh蛋白参与调控造血祖细胞的增殖与分化,在胎肝基质细胞的支持下,Shh蛋白对小鼠c-kit+造血祖细胞的扩增有明显的促进作用,表明Shh蛋白与胎肝基质细胞存在着某种整合作用,这种作用在一定程度上调控着造血祖细胞的增殖与分化。
- 胡采红周琨孙汉英刘文励
- 关键词:造血微环境基质细胞胎肝
- Wnt与Notch信号通路调控造血发育机制研究
- 目的:研究在造血发育过程中不同阶段不同部位,c-kit~+造血祖细胞中Wnt和Notch信号通路中各成分的时空表达变化。
方法:用免疫磁珠阳性分离法分离小鼠孕10.5天/(E10.5/)、E11.5 AGM区,E...
- 胡采红
- 关键词:造血发育WNT通路NOTCH通路
- 文献传递