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脂多糖对大鼠胰岛素瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响被引量：1: 2012年; 目的研究脂多糖（LPS）对大鼠胰岛素瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响及其可能机制。方法取处于对数期生长的INS-1细胞用于实验，分别用0．1、1．0、10．0mg／LLPS处理细胞，24h后用磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测LPS对INS-1细胞增殖的影响，用二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）作为荧光探针检测细胞内活性氧的水平变化，应用Western blotting法检测细胞自噬体膜上自噬标志分子微管相关蛋白1的轻链3-Ⅱ（Map1LC3-Ⅱ）和凋亡标志蛋白聚腺苷二磷酸-核糖多聚酶（PARP）切割带的变化。将INS-1细胞的自噬必需基因7（A增7）通过siRNA介导的RNA干扰手段进行沉默，然后以1．0mg／LLPS处理细胞，24h后应用Western blotting检测细胞中Atg7、Map1LC3-Ⅱ和PARP切割带的水平。先用400μmoL／L的活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）处理INS-1细胞，1h后加入10．0mg／L的LPS，24h后应用Western blotting法检测细胞Map1LC3-Ⅱ蛋白和PARP切割蛋白的水平。组间数据比较采用方差分析和t检验。结果与对照组（0．755±0．030）比较，0．1、1．0、10．0mg／LLPS组INS-1存活率降低，差异有统计学意义（分别为0．658±0．042、0．658±0．015、0．634±0．029，F=30．98，P〈0．01）；与对照组（0．447±0．012）相比，0．1、1．0、10．0mg／LLPS组Map1LC3-Ⅱ蛋白水平增加，差异有统计学意义（分别为0．992±0．030、0．949±0．020、0．982±0．013，F=525．79，P〈0．01）；与对照组（0．055±0．001）相比，0．1、1．0、10．0mg／LLPS组PARP切割蛋白水平增加，差异有统计学意义（分别为0．313±0．007、0．390±0．011、0．500±0．033，F=327．09，均P〈0．01）；与对照组比较，10mg／LLPS组活性氧产生明显增多。与对照组比较，转染Atg7siRNA组Atg7、Map1LC3-Ⅱ和PARP切割蛋白水平均显著下降，差异均有统计学意义（t=156．069、123．154、103．246，均P〈0．01）。与LPS1; 刘兴艳苏华季虹张丽辛衍代荣海钦; 关键词：脂多糖自噬凋亡

磺脲类药物对成骨细胞MC3T3-E1自噬、凋亡和分化功能的影响被引量：5: 2013年; 目的探讨磺脲类药物对成骨细胞自噬、凋亡及分化功能的影响。方法用磺酰罗丹明B染色检测不同浓度的格列本脲(GLB)、格列齐特(GLC)和格列吡嗪(GLP)对成骨细胞存活率的影响;Western blot分析3种磺脲类药物对细胞中自噬、凋亡标志蛋白表达的变化;Hoechst染色镜下观察上述药物对细胞凋亡的影响;通过对骨钙素(OCN)和碱性磷酸酶(ALP)的测定研究药物对细胞分化功能的影响。结果中、高浓度的GLB、GLC和GLP使MC3T3-E1细胞存活率降低。在药物干预下,MC3T3-E1细胞自噬和凋亡标志蛋白表达增加,mTOR信号途径无明显变化。3种药物可使细胞分泌OCN和ALP的能力下降。结论 GLB、GLC和GLP可诱导成骨细胞MC3T3-E1发生自噬和凋亡,降低成骨细胞分化功能,且可能通过mTOR-非依赖途径诱导细胞自噬。; 张丽季虹苏华刘兴艳辛衍代荣海钦; 关键词：成骨细胞自噬凋亡分化功能

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苏华

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