范文胜
- 作品数：46 被引量：100H指数：6
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 鸡传染性支气管炎病毒纳米PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3
- 2019年
- 根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的3′端非编码区保守区域,设计并合成一对特异性引物,建立IBV纳米PCR检测方法,并进行了特异性、灵敏性和重复性试验,然后将建立的方法进行初步应用。结果显示:该方法特异性良好,能从4种不同基因型IBV核酸样品中检测到约346bp的目的条带,而对禽偏肺病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、马立克氏病病毒、禽白血病病毒、鸭肝炎病毒等其他病原检测结果均为阴性;敏感性试验表明,纳米PCR的最低检测浓度为1.01×10^-4ng/μL,其敏感性是普通PCR的10倍;重复性试验显示3次均能检出IBV核酸。纳米PCR方法的临床应用表明,送检样品及攻毒鸡样品的检出率分别达到50%(10/20)和60%(30/50),与普通PCR方法检测结果符合率为100%。研究建立的IBV纳米PCR检测方法具有较高的敏感性和良好的特异性,为IBV的临床诊断、病原检测和流行病学调查提供了新的技术手段。
- 张文赵长润陈基明朱丹张愉王露范文胜磨美兰韦平
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒特异性敏感性
- 鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原表位多肽的预测、鉴定及免疫效果的初步研究被引量：4
- 2020年
- 旨在对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120株S1蛋白的B细胞及T细胞可能的表位进行预测并合成相应的多肽,然后免疫小鼠,并分析其免疫效果,以验证候选表位多肽的免疫原性。利用表位预测软件筛选并化学合成针对IBV H120株S1蛋白的5条表位多肽,然后免疫小鼠,通过间接ELISA、中和试验和流式细胞技术检测各表位多肽诱导的特异性抗体、中和抗体和外周血T细胞亚群。ELISA检测结果显示,5条表位多肽均具有良好的反应原性,免疫小鼠的血清效价高低顺序依次为Pep76-106>Pep240-257>Pep511-537>Pep403-421>Pep135-172;中和试验结果表明,5条多肽免疫小鼠的血清中和滴度均高于空白对照组,其高低顺序依次为Pep240-257=Pep403-421=Pep511-537>Pep76-106=Pep135-172;流式检测结果表明,5条多肽免疫小鼠在CD3^+、CD4^+CD8-、CD8^+CD4-T淋巴细胞水平上均极显著高于空白对照组(P<0.01),CD3^+T及CD4^+CD8-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421>Pep240-257>Pep76-106>Pep511-537>Pep135-172,CD8^+CD4-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421>Pep76-106>Pep511-537>Pep240-257>Pep135-172。合成的5条表位多肽中,Pep240-257、Pep76-106和Pep403-421可以诱导体液免疫,Pep403-421可以诱导细胞免疫,其中,Pep403-421可以同时诱导细胞免疫及体液免疫。本研究结果为深入了解S1蛋白的免疫学特性以及研发诊断试剂和有效表位疫苗奠定了基础。
- 范文胜朱丹张愉廖健淇王露雍璐韦平磨美兰
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白特异性抗体中和抗体T淋巴细胞亚群
- 几种基因型鸡传染性支气管炎病毒重要生物学特性的比较研究
- 磨美兰韦平李孟韦正吉陈秋英黄柏成范文胜王秀英郎亚辉韦天超李康然
- 课题来源与背景：鸡传染性支气管炎（IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触传染性的呼吸道疾病，给养禽业带来严重的经济损失。IBV基因组容易发生突变和重组，导致IBV血清型、基因型、致病性、免疫...
- 关键词：
- 关键词：传染性支气管炎疾病防治
- 产蛋鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其遗传变异和血清型分析被引量：5
- 2020年
- 【目的】明确产蛋鸡源传染性支气管炎病毒(IBV)分离株(GX-YL170808)的结构基因及抗原变异情况,为广西种鸡场的传染性支气管炎(IB)防控提供科学依据。【方法】通过鸡胚尿囊液血凝试验、鸡胚侏儒化试验及3'端非编码区(3'-UTR)测序对分离株进行鉴定;采用RT-PCR扩增S1、E、M和N基因,以MegAlign和MEGA 6.0分别进行核苷酸序列相似性及系统发育进化树分析,运用RDP4和SimPlot对S1、E、M和N基因进行重组分析,利用NetNGlyc 1.0和NetOGlyc 4.0进行糖基化位点预测分析,并通过中和试验进行血清型鉴定。【结果】分离株的鸡胚尿囊液血凝试验呈阴性,鸡胚盲传5代后出现侏儒胚典型病变,其3'-UTR序列与IBV的3'-UTR序列相似性为99.13%;综合病鸡临床症状及其病理变化可确定该病毒为IBV,命名为GX-YL170808。GX-YL170808分离株S1、E、M和N基因的开放阅读框(ORF)长度分别为1620、327、675和1230 bp,对应编码540、109、225和410个氨基酸残基,与参考株的核苷酸序列相似性分别为60.4%~96.5%、81.8%~97.2%、85.6%~93.5%和85.7%~92.0%;GX-YL170808分离株的S1、M和N基因属于LX4型,而E基因属于LDT3型;4个结构基因内部均无重组区域;除S1基因同时具有N-糖基化和O-糖基化位点外,E、M和N基因均只有N-糖基化位点;S1蛋白裂解位点为HRRRR,与参考株LX4的裂解位点相同。GX-YL170808分离株属于血清4型,不同于常用的疫苗株H120(血清3型)和4/91(血清5型),也不同于广西主要侵害雏鸡的IBV优势血清型。【结论】产蛋鸡源IBV分离株并非疫苗株,其基因型和血清型均已发生变异,且该毒株的血清型不同于广西地区侵害雏鸡的优势血清型,提示了广西地区IB防控的严峻性及新型多价疫苗研发的紧迫性。
- 赵长润张文董志华陈基明范文胜唐宁韦天超磨美兰韦平
- 关键词：产蛋鸡结构基因血清型
- 鸡传染性支气管炎病毒纳米PCR检测方法的建立与应用
- <正>引言鸡传染性支气管炎（infectious bronchitis,IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）引起一种急性高度接触传染性呼吸道疾病,主要侵害1～4...
- 张文陈基明赵长润范文胜何怡宁磨美兰韦平
- 文献传递
- 近十年广西地区鸡传染性支气管炎流行病学调查
- <正>引言鸡传染性支气管炎（infectious bronchitis,IB）是养鸡业的一种急性、高度接触性传染病,常继发细菌感染,导致养殖场的严重经济损失[1]。鸡传染性支气管炎病毒（IBV）容易变异,血清型众多,各血...
- 董志华范文胜唐宁何怡宁韦天超磨美兰韦平
- 文献传递
- GX-YL5株S1蛋白在杆状病毒系统中的表达和免疫原性研究
- <正>引言鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis,IB）是一种急性、高度接触性呼吸道疾病,因其病原传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）基因组变异快,血...
- 袁园苏艳静张韬张丽娟廖健淇范文胜韦天超磨美兰韦平
- 文献传递
- 1985-2017年广西鸡传染性支气管炎病毒流行株演化变异分析
- <正>引言鸡传染性支气管炎(IB)给养禽业造成较大经济损失。鸡传染性支气管炎病毒(IBV)基因组容易发生变异,导致基因型和血清型众多复杂,且不同地区IBV流行株存在差异。因此,非常有必要对特定地区IBV流行株进行长期持续...
- 范文胜唐宁何怡宁董志华赵长润陈基明张文韦天超黄腾磨美兰韦平
- 文献传递
- 警惕黄曲霉毒素
- 2009年
- 范文胜磨美兰
- 关键词：黄曲霉毒素中毒寄生曲霉畜禽饲料饲喂
- 鸡传染性支气管炎病毒广西流行株3种主要结构蛋白基因的遗传变异分析被引量：11
- 2010年
- 为了解鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西流行株的遗传变异情况,应用RT-PCR方法对2004-2007年的7株广西IBV分离株的纤突蛋白S1基因、核(N)蛋白和膜(M)蛋白基因进行扩增、克隆、测序和同源性比较及系统进化分析。结果显示广西IBV分离株S1基因存在广泛的基因点突变,部分毒株出现基因插入和缺失,分离株之间氨基酸同源性为74.2%～98.7%;N基因无插入和缺失,但存在基因点突变,分离株之间氨基酸同源性为91.7%～99.3%;M基因存在点突变和插入现象,分离株之间氨基酸同源性为90.7%～98.2%。以疫苗株H120为参照,广西IBV分离株的S1、N和M基因都出现了变异,其中S1基因变异程度最大。7株广西IBV在S1、N和M基因氨基酸序列系统进化树中分别集中在2、3和3个基因群中,其中4株的S1、N和M基因分型结果不一致。结果表明广西IBV分离株的S1、N和M基因已发生变异,广西IBV存在广泛的基因突变、缺失或插入现象。研究的结果提示流行株的遗传变异可能是目前影响疫苗免疫效果的主要原因。
- 磨美兰李孟韦平范文胜黄柏成郎亚辉陈秋英侯金莲韦天超
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒S1基因N基因M基因系统进化分析
