董金兰
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
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- 相关领域：轻工技术与工程化学工程农业科学生物学更多>>
- 插入烟草叶绿体启动基因片段的重组质粒转化大肠杆菌和枯草杆菌感受态与原生质体的比较
- 1990年
- 大肠杆菌(E.coli)N100携带的pK01-26质粒插入烟草(Nicotiana tobacHm var.)叶绿体启动基因片段的重组质粒。该质粒以大肠杆菌HB101为受体可以再转化,转化频率为4.93×10^(-6),以枯草杆菌168为受体不能实现转化。上述两种受体菌株的原生质体,经处理,再生细胞壁后,分别获得转化子。经原生质体转化,以大肠杆菌HB101为受体的转化频率为2.7×10^(-4),而枯草杆菌168为受体也能转化,转化频率为2.6×10^(-5)。以HB101为受体的转化子在麦康凯半乳糖选择平板上呈红色菌落。证明pKO1-26质粒在新受体中叶绿体启动基因仍可启动半乳糖激酶基因表达。获得的转化菌株经测定,以HB101为受体的,遗传性稳定;而以168为受体的,部分菌株遗传性稳定。
- 董金兰张士文王茜李洪泉刘国平
- 关键词：烟草叶绿体基因原生质体
- d－生物素代替玉米浆发酵生产谷氨酸的研究被引量：7
- 1996年
- 用ｄ－生物素代替玉米浆的摇瓶发酵实验，筛选出高产酸菌株，测定了ｄ－生物素的亚运量可变范围。比较了单一玉米浆、单一ｄ－生物素与两者各半量发酵结果及不同接种量对产酸的影响。采用ｄ－生物素代替半量玉米浆的中糖发酵工艺应用于生产。结果证明此工艺可行，降低了成本，提高了产酸率，平均产酸率达７．８１％，平均转化率达５３．２％。
- 梁新梅孙吉臻张跃庆王丽谦董金兰徐娉婷
- 关键词：谷氨酸发酵D-生物素玉米浆
- Ri质粒介导的DNA转移及诱发甘草毛根再生植株被引量：4
- 1991年
- 本文报道了通过三亲交配将PB1121双元中间载体从大肠杆菌C600转移到发根农杆菌R1000(PRiA4b)中,在含Km、Sm的MinA选择平板上获得了转移子,上述转移子菌液用注射法感染甘草胚轴、茎等外植体,在无激素含1mg/mlcb,0.1mg/mlkm的MS培养基上培养,两周后诱发出毛根,切下毛根在同上培养基上6周长出不定芽,继续培养长成再生植株,经检测转化株毛根中存在甘露碱和GUS基因产物,具有Km抗性和激素自主性生长特性,证明Ri质粒不仅可介导GUS基因转移还可诱发毛根再生植株,提供了简化、高效的植物遗传转化系统。
- 董金兰李洪泉李红卫
- 关键词：RI质粒发根农杆菌甘草
- 产谷氨酸棒杆菌B9和T6—13的原生质体融合被引量：2
- 1994年
- 棒杆菌Ｂ９和Ｔ６—１３两菌株经ＵＶ变处理得到Ｂ９—２（ＳｍＲ）和Ｔ６—１３—３（ＲｉｆＲ）两菌株，以此两菌株做为出发菌株。将对数前期的培养细胞经青霉素予处理及酶解制备原生质体，用４０％ＰＥＧ６０００为助融剂，进行原生质体融合。用间接法检出具有Ｓｍ、Ｒｉｆ抗性的融合子。融合频率为６．５５×１０－６－１．６４×１０－５，融合子双抗性稳定，产谷氨酸，经摇瓶实验筛选出一株产谷氨酸明显高于亲本的融合子ｆｕ３６。
- 董金兰金刚杜文翠李洪泉李琦染新梅张晓君王忠心胡艳平魏福荣
- 关键词：谷氨酸棒杆菌原生质体融合发酵
- 大豆启动功能片段的克隆及在转化甘草中启动β-葡糖苷酸酶基因的表达被引量：3
- 1993年
- 将大豆DNA的HindⅢ和BamHⅠ酶切片段连接到pBⅠ101载体缺启动子的GUS基因上游,构建了含有不同DNA片段的重组质粒,转化大肠杆菌C600,获得了具Km抗性的转化子。通过三亲交配将上述重组质粒转移至发根农杆菌R1000(PRiA4b)中,用注射法,将各含重组质粒的发根农杆菌菌液感染甘草外植体,在含cb的无激素MS培养基上诱发毛状根并再生成植株。转化甘草具Km抗性,有甘露碱和农杆碱存在。经组织化学法检测,在转化株C2和C13的毛根、茎、叶中有靛蓝色沉淀物产生。证明大豆启动功能片段在转化甘草中启动了GUS基因表达。重组质粒的酶切分析证明C2和C13大豆DNA插入片段均约为0.8kb。DNA分子杂交也证明C2、C13 DNA与大豆DNA和转化株DNA有同源性。
- 董金兰李洪泉乔景波李红卫刘国平李集临
- 关键词：大豆
