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高表达碳酸酐酶1参与骨化过程的研究: 2012年; 目的碳酸酐酶1不仅可以催化二氧化碳水化反应，还可以加速碳酸钙的形成，而钙沉淀是新骨形成的重要步骤。本研究以培养细胞为模型探索碳酸酐酶1在骨形成过程中的作用。方法用成骨诱导培养基（OM）诱导骨肉瘤细胞Saos-2钙化，然后用茜素红染色法观察细胞矿化结节的形成，用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞骨化标志蛋白核心结合蛋白因子2（Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（OSX）、碱性磷酸酶（AIJP）、骨钙素和骨涎蛋白（BSP）的表达。用蛋白印迹法和荧光定量PCR检测细胞钙化前后碳酸酐酶1的表达量的变化。用碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺处理Saos-2细胞，观察细胞钙化过程是否被抑制。2组间比较采用t检验，不同时间点的统计学分析采用重复测量的方差分析。结果Saos-2细胞在OM诱导后形成大量矿化结节（0．68±0．03与2．76±0．13，P〈0．01），Runx2、ALP、骨钙素、OSX和BSP转录水平明显升高，显示OM可诱导Saos-2细胞钙化和骨化。Saos-2细胞钙化后碳酸酐酶1表达明显增高（0．25±0．03与0．94±0．06，P〈0．01）。Saos-2细胞经乙酰唑胺处理后，碳酸酐酶1的表达量减少（1．09±0．05与0．55±0．07，P〈0．05），矿化结节形成明显减少（2．76±0．13与2．19±0．07，P〈0．01），骨化标志蛋白的表达也明显下降，说明抑制碳酸酐酶1表达可以抑制Saos-2细胞矿化和骨化过程。结论碳酸酐酶1在新骨形成过程中起着重要作用。; 郑亚冰王林赵丹王月俭安琨韩金祥常晓天; 关键词：骨生成成骨诱导生物矿化

维生素D结合蛋白在类风湿关节炎滑膜中表达的研究被引量：6: 2012年; 目的本研究通过蛋白质组学的方法比较类风湿关节炎（RA）、骨关节炎及强直性脊柱炎（AS）滑膜组织中表达的蛋白，筛选RA滑膜中表达特异性下调的蛋白，并通过单核苷酸多态性（SNPs）分析方法分析靶蛋白编码基因对RA的遗传易感性。方法提取RA（10例）、骨关节炎（10例）及AS（10例）滑膜组织总蛋白，每类疾病的样本等比例混合，然后用2．D凝胶电泳进行分析，对RA样本中表达量明显低于骨关节炎和As的蛋白进行飞行时间质谱鉴定，检测结果用蛋白印迹法验证。用Taqman方法对中国人群中267例RA患者和160名健康对照的维生素D结合蛋白（VDBP）编码基因的标签SNPs进行基因分型，并扩大样本量（389例RA和371名健康对照）验证分型结果。采用单因素方差分析和Fisher确切概率法进行检验。结果蛋白质组学研究发现，在RA患者滑膜中VDBP表达量明显下降，蛋白印迹法也验证了这一结果。基因分型研究发现，SNP位点rs2282679与RA密切相关（P=-0．026794）。进一步扩大样本实验也得出了一致结果，rs2282679与RA有相关性[比值比（OR）=0．678639，95％可信区间（凹）0．541113～0．851118，P=O．000776]。结论与骨关节炎和AS患者相比，VDBP在RA患者滑膜中表达量明显下降。VDBP基因上的SNP位点rs2282679与RA有相关性。VDBP在RA中的表达下调及其基因的遗传效应显示VDBP可能参与RA的病理过程。; 王月俭房克华赵丹潘继红赵燕张云忠常晓天; 关键词：蛋白质组学关节炎类风湿单核苷酸

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赵丹

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