邹健
- 作品数：13 被引量：31H指数：3
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省医学重点学科基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- GRβ shRNA稳定表达胶质瘤细胞株的构建及功能初探
- 2014年
- 目的:构建并鉴定糖皮质激素受体β(GRβ)RNA干扰稳定表达胶质瘤细胞株,研究GRβ对胶质瘤细胞周期及增殖的影响。方法:根据GRβmRNA序列设计特异性小干扰RNA(siRNA),以LipofectamineTM 2000转染人胶质瘤细胞,RT-PCR及Western blot鉴定其有效性;体外合成该siRNA插入序列小发卡RNA(shRNA)并定向克隆至真核表达载体pGPH1/GFP/Neo,转染后,通过G418筛选稳定表达细胞株(G0306),Western blot检测GRβ表达、MTS和流式细胞术检测GRβ干扰对胶质瘤细胞增殖及细胞周期的影响。结果:GRβsiRNA能有效抑制GRβ的表达,DNA测序证实合成并克隆入真核表达载体pGPH1/GFP/Neo的shRNA序列完全正确;GRβshRNA稳定表达人胶质瘤细胞株阻滞于G1期、细胞增殖能力显著下降。结论:成功构建人GRβshRNA稳定表达胶质瘤细胞株(G0306),初步表明GRβ影响胶质瘤细胞的增殖,为后期研究GRβ在中枢神经系统肿瘤中的作用及机制奠定了基础。
- 王倩邹健谢平
- 关键词：糖皮质激素受体Β小干扰RNA胶质瘤
- GCS通过MEK/ERK通路调控白血病多药耐药细胞凋亡相关基因bcl-2的表达被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)是否通过MEK/ERK信号通路调控凋亡相关基因bcl-2的表达,从而诱导人白血病K562/A02细胞多药耐药。方法:用小干扰RNA(siRNA)靶向干扰K562/A02细胞中GCS的表达,real-time PCR、Western blotting检测Bcl-2、磷酸化及总ERK水平;用MEK特异性化学抑制剂U0126抑制MEK/ERK信号通路的活化,real-time PCR与Western blotting技术分别检测Bcl-2 mRNA与蛋白水平;CCK-8试剂盒检测细胞存活情况。结果:与阴性对照组比较,GCS siRNA明显抑制K562/A02细胞GCS和Bcl-2的表达,并抑制MEK/ERK信号通路的活化;U0126使Bcl-2 mRNA及蛋白水平呈浓度依赖性下降,并使K562/A02细胞ADM敏感性增加。结论:GCS通过MEK/ERK信号通路调控K562/A02细胞株中凋亡相关基因bcl-2的表达,从而诱导白血病细胞多药耐药。
- 王倩邹健张秀芬穆会君殷莹谢平
- 关键词：葡萄糖神经酰胺合成酶BCL-2
- 小鼠胚胎心内膜细胞的分离及鉴定
- 2015年
- 目的:分选胚胎发育第11.5天小鼠胚胎心内膜细胞(embryonic endocardial cell,ECC)并培养及鉴定。方法:取胚胎发育第11.5天ICR系孕小鼠10~20只,取胚胎小鼠心脏,制成单细胞悬液,应用免疫磁珠方法分选出ECC,培养并传代,通过形态学及免疫荧光方法测定活化T细胞核因子c1(NFATc1)阳性细胞进行鉴定。结果:传代至第5代的ECC中基本不含杂细胞,ECC形态较小,呈扁平形或类圆形,增殖活跃,生长迅速;ECC表达胚胎心内膜特异的NFATc1蛋白,纯度>98%。结论:应用免疫磁珠法能分选出纯度较高的小鼠ECC,可为ECC功能研究提供基础。
- 罗园园殷莹蒋孟军邹健龚杰
- 关键词：免疫磁珠分选
- RAGE基因-429T＞C多态性与无锡汉族人群糖尿病视网膜病变的相关性被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨晚期糖基化终末产物受体（RAGE）基因启动子区-429T＞C多态性与无锡地区汉族人群糖尿病视网膜病变（DR）的相关性.方法 横断面研究.收集无锡地区120例汉族正常人及185例汉族2型糖尿病患者,包括DR患者92例,无糖尿病视网膜病变（NDR）患者93例.运用聚合酶链式反应-直接测序法检测这些对象基因型.采用χ^2检验及独立样本t检验比较各组基因型和基因频率及生化指标.结果 DR组与NDR组间临床特征比较显示,DR组糖尿病病程明显长于NDR组（t=2.25,P＜0.05）,2组间其他临床特征差异无统计学意义（P＞0.05）;DR组、NDR组及对照组CC基因型频率分别为3.3％、1.1％、1.7％,C等位基因频率分别为17.5％、13.4％、15.4％,DR组CC基因型频率分布显著高于NDR组及对照组,差异有统计学意义（χ^2=7.938、6.119,P＜0.05）;DR组C等位基因频率分布明显高于NDR组及对照组,差异有统计学意义（χ^2=7.317、5.456,P＜0.05）.NDR组与对照组的各基因型和等位基因频率分布比较,差异无统计学意义（χ^2=0.295、0.329,P＞0.05）.单因素logistic回归分析示,C等位基因是2型糖尿病人群DR发病的危险因素（OR=2.085,95％CI：1.216～3.574）.结论 -429T＞C多态性与无锡地区DR的发生有一定的相关性,且C等位基因可能是其危险因素。
- 顾喆瑶姚勇谢田华曹葭邹健
- 关键词：晚期糖基化终末产物受体基因多态性糖尿病视网膜病变
- Treg细胞和Thl7细胞在1型糖尿病中的表达及相互作用被引量：1
- 2016年
- 调节性T细胞（Treg）和辅助性T_17细胞（Thl7）分别是两类功能独特的T细胞亚群,在自身免疫性疾病、感染、肿瘤等疾病及排斥反应中有重要的作用。
1型糖尿病是一种选择性自身免疫性疾病,针对胰岛β细胞的自身反应性免疫细胞的激活及自身抗体分泌的增加可能与胰岛细胞的免疫炎症损伤有关。
- 乔伟振李另另邹健韩振格
- 关键词：调节性T细胞1型糖尿病免疫平衡
- 糖尿病与肝外胆管癌发病关系的Meta分析被引量：3
- 2011年
- 目的:用Meta分析法探讨糖尿病是否增加肝外胆管癌发病风险。方法:利用中国学术期刊全文数据库、万方全文数据库及Medline,EMBASE数据库检索国内外公开发表的从建库至2010年9月的所有关于糖尿病与肝外胆管癌发病关系的中英文文献;利用随机效应模型计算纳入文献的合并RR值及其95%CI值;进行亚组分析以探究异质性来源并分析出版偏倚。结果:纳入分析的文献共7篇(病例对照研究4篇,队列研究3篇)。经Meta分析,与未患糖尿病者相比,糖尿病患者肝外胆管癌发病的风险增加,相对风险值分别为OR=1.62(95%C1=1.05～2.49)(病例对照研究);RR=1.54(95%C1=1.06～2.23)(队列研究);亚组资料分析显示研究有显著异质性,但无明显发表偏倚(Egger检验,P=0.798;Begg检验,P=0.548)。结论:本研究提示糖尿病可能是肝外胆管癌的致病危险因素。
- 刘春兴邹健
- 关键词：糖尿病肝外胆管癌病例对照研究队列研究META分析
- 大鼠谷氨酰胺合成酶RNA干扰表达载体的构建及其影响星形胶质细胞黏附的初探被引量：1
- 2010年
- 目的:构建并鉴定大鼠谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)RNA干扰表达载体,并检测GS对星形胶质细胞黏附的影响。方法:利用软件根据GS mRNA序列设计特异性siRNA序列,与GS真核表达载体GS-EGFP以LipofectamineTM2000试剂联合转染Hela-G细胞,以GFP为指标鉴定其有效性;体外合成该siRNA插入序列,将其定向克隆至真核表达载体pRNATH1.l/Neo中并转染至大鼠星形胶质细胞中,以免疫细胞化学方法鉴定GS的表达;通过免疫化学法对actin特异性染色分析GSRNA干扰后对星形胶质细胞黏附的影响。结果:GS siRNA能有效抑制GS-EGFP在Hela-G细胞中的表达;DNA测序证实合成并被克隆入真核表达载体pRNAT HI.1/Neo的siRNA插入序列完全正确,GS siRNA表达载体可特异性抑制星形胶质细胞中GS的表达;GS RNA干扰导致细胞黏附力显著降低。结论:成功构建大鼠GS siRNA真核表达载体,初步表明GS影响星形胶质细胞的黏附,为后期研究GS在中枢神经系统损伤后反应性星形胶质细胞中的功能奠定了基础。
- 刘春兴张滨邹健
- 关键词：反应性星形胶质细胞谷氨酰胺合成酶RNA干扰细胞黏附SIRNA表达载体免疫细胞化学方法
- 无锡地区2型糖尿病患者RAGE基因Gly82Ser多态性与糖尿病视网膜病变的关联性研究被引量：3
- 2016年
- 背景 晚期糖基化终末产物特异性受体（RAGE）在2型糖尿病及其微血管并发症的发病过程中发挥重要作用.RAGE基因Gly82Ser存在多态性,但其与糖尿病视网膜病变（DR）的相关性有待进一步研究.目的 探讨无锡地区汉族人群RAGE基因Gly82Ser多态性与DR的关系. 方法 采用横断面研究方法,于2013年3月至2014年2月在无锡纳入汉族无亲缘关系的2型糖尿病患者185例,依据2002年DR国际临床分型标准将患者分为非DR（NDR）组（93例）和DR组（92例）,同期纳入健康体检对照者120名.各位受检者均行眼部检查、血液生物化学指标及血脂等实验室检查和血压、体质量指数（BMI）及空腹血糖水平检测.采集受检者外周血各3 ml,采用PCR-直接测序法检测受检者的基因型及等位基因频率并进行组间差异比较.结果 DR组患者糖尿病病程明显长于NDR组,差异有统计学意义（t=2.25,P=0.01）.DR组、NDR组及健康对照组受检者RAGE基因Gly82Ser位点均存在G和A2种等位基因,其多态性分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律（DR组：χ2=0.51,P=0.48;NDR组：χ2=1.38,P=0.24;健康对照组：χ2=0.20,P=0.24）.DR组、NDR组患者和健康对照组受检者AA基因型频率分别为6.5％、3.2％和2.5％,DR组患者AA基因型频率高于NDR组及健康对照组,差异均有统计学意义（χ2=5.146,P=0.023;χ2=5.039,P=0.037）;DR组受检者A等位基因频率分布明显高于NDR组及健康对照组,差异均有统计学意义（χ2=5.494,P=0.019;χ2=5.235,P=0.023）,而GG基因型及G等位基因频率低于NDR组和健康对照组,差异均有统计学意义（GG：χ2=4.260,P=0.039χ2 =4.794,P=0.027;G：χ2 =5.309,P=0.021;χ2=5.476,P=0.032）;NDR组与健康对照组间受检者各基因型及等位基因频率的差异均无统计学意义（AA：χ2=5.346,P=0.127;GG：χ2 =6.981,P=0.137;A;χ2=5.618,P=0.082;G：χ2=4.860,P=0.088）. 结论 RAGE基因Gly82Ser位点单核苷酸多态性与无锡地区2型糖尿病患�
- 曹葭姚勇谢田华顾喆瑶邹健
- 关键词：糖尿病视网膜病变单核苷酸多态性基因频率
- 无锡地区汉族人群RAGE基因启动子区-374T/A多态性与糖尿病视网膜病变的相关研究被引量：3
- 2014年
- 目的探讨无锡地区汉族人群RAGE基因启动子区374T/A多态性与糖尿病视网膜病变（diabetes retinopathy,DR）的相关性。方法 运用聚合酶链反应直接测序法检测120名正常人及185名2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）患者,包括DR患者92例,无糖尿病视网膜病变（non-diabetes retinopathy,NDR）患者93例的基因型。比较各组受检者基因型和基因频率及生化指标。结果 DR组患者糖尿病病程明显长于NDR组（t=2.254,P=0.01）,两组间其他临床特征的差异均无统计学意义（均为P〉0.05）;DR组、NDR组及对照组AA基因型频率为6.5%、2.2%、3.3%,A等位基因频率分别是23.9%、14.0%、15.4%;DR组AA基因型及A等位基因频率分布显著高于NDR组及对照组,其差异有统计学意义（P=0.026、P=0.015;P=0.035、P=0.027）。NDR组与对照组的各基因型和等位基因频率分布比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。单因素Logistic回归分析示,A等位基因是T2DM人群DR发病的危险因素（OR=1.934,95%CI：1.132～3.303）。结论 RAGE基因启动子区374T/A多态性与无锡地区DR的发生有一定的相关性,且A等位基因可能是其危险因素。
- 顾喆瑶姚勇谢田华曹葭邹健
- 关键词：晚期糖基化终末产物受体糖尿病视网膜病变
- 肺移植术后细菌感染的菌群分布及耐药性分析被引量：7
- 2016年
- 目的分析肺移植后细菌感染的菌群分布及耐药性，为临床预防术后感染和合理使用抗菌药物提供依据。方法回顾性分析2009年5月至2012年10月间81例受者肺移植后细菌感染的病原菌分布及耐药情况，细菌鉴定和药物敏感性试验采用法国生物梅里埃公司VITEK-32全自动微生物鉴定仪及配套药物敏感性试剂进行，数据采用SPSS（13．0版）软件进行统计分析。结果肺移植术后81例受者中有67例出现细菌感染，感染率为82．72％（67／81），其中单一菌种感染有20例，2种细菌感染23例，多种细菌混合感染24例。共分离出各类细菌病原体157株，其中革兰阳性菌占12．74％（20／157），革兰阴性菌占87．26％（137／157）。其中最常见的病原菌依次为鲍曼复合醋酸钙不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌，术后细菌感染多发生在术后早期（1个月内），病原菌中非发酵菌多见多重耐药。结论肺移植后细菌感染率高，应注意根据菌群分布特点和耐药情况合理使用抗生素。
- 张纯林李另另邹健陈静瑜殷莹周敏乔伟振
- 关键词：肺移植细菌感染耐药性
