郑炜
- 作品数：31 被引量：30H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>
- 布鲁氏菌分泌蛋白Bsp J多克隆抗体制备及亚细胞定位分析
- 布鲁氏菌的致病作用主要依靠其毒力因子,包括膜蛋白、脂多糖、分泌蛋白等,具有抵抗宿主杀伤机制和致病的作用。据报道,布鲁氏菌BspJ蛋白是一个分泌蛋白,其可能侵入宿主细胞核发挥作用,进而影响宿主细胞的功能,但其作用机制还不清...
- 马忠臣胡尊楠张超王震郑炜王勇陈创夫
- 文献传递
- 布鲁氏菌分泌蛋白BspJ多克隆抗体的制备被引量：3
- 2020年
- 为获得一定纯度及浓度的布鲁氏菌分泌蛋白BspJ并制备多克隆抗体,本研究通过常规PCR方法扩增BspJ基因,连接至pMD19-T克隆载体并筛选阳性克隆;使用限制性内切酶切下目的片段后连接至pET28a(+)载体,双酶切、菌液PCR验证阳性克隆菌并送测序;表达载体pET28a-BspJ转入大肠杆菌DE3后经IPTG诱导表达,收集表达菌进行SDS-PAGE分析;使用His标签蛋白纯化柱纯化目的蛋白rBspJ;将rBspJ蛋白混入弗氏佐剂分4次免疫实验兔,收集兔血清,Western blot鉴定多克隆抗体,饱和硫酸铵法纯化多克隆抗体.结果显示:PCR方法扩增出大小534 bp的目的片段,测序结果正确,表明成功构建出pMD19-T-BspJ克隆载体及pET28a-BspJ表达载体;表达菌表达出大小约24 kDa的rBspJ,纯化后的rBspJ条带明显,基本无杂带,表明成功纯化出rBspJ;真核表达的rBspJ与制备的多克隆抗体反应,表明成功制备多克隆抗体.本研究结果为BspJ蛋白的亚细胞定位分析、功能研究及布鲁氏菌致病机制的研究积累实验数据和奠定基础.
- 马忠臣胡尊楠王震郑炜郑炜王勇
- 关键词：布鲁氏菌原核表达多克隆抗体
- 绵羊皮肤源EST-SSR标记的功能注释及染色体电子定位被引量：3
- 2011年
- 为了深入研究绵羊皮肤源EST-SSR分子标记的潜在基因功能,文章采用比较基因组学和生物信息学方法对本实验室前期开发的9个绵羊皮肤源EST-SSR多态位点原始EST进行了功能注释和电子定位。研究结果表明,6个位点的原始EST与已知基因高度同源,其中3个基因可能对毛性状具有重要调控作用。通过与牛全基因组cDNA文库的比对,将8个位点初步定位于牛染色体上,并基于牛、绵羊已定位的共用标记计算了染色体间相似系数,分析构建了牛羊染色体NJ聚类图,以此为参考最终将绵羊皮肤源EST-SSR标记电子定位于绵羊染色体上。研究结果不仅可为后期标记的连锁定位及毛性状关键基因的电子克隆提供参考,同时有助于动物染色体的进化研究。
- 王遵宝赵宗胜余鹏吴洪宾班谦梁耀伟郑炜
- 关键词：绵羊EST-SSR染色体
- 基于慕课模式的常用仪器操作与应用混合教学改革
- 2019年
- 常用仪器操作与应用是一门实践性较强的专业选修课,本文以课程中专题3 PCR仪的操作与应用为例进行了混合式教学设计,结合慕课开展线上线下学习模式。经过教学实践,激发了学生的学习兴趣,提高了课堂教学效果。
- 王勇郑炜张辉
- 关键词：混合教学网络平台教学改革
- Solexa测序技术分析鸡与鹌鹑属间杂交雌性和雄性胚胎的差异microRNAs被引量：3
- 2014年
- 分别从孵化3d的已鉴定性别的鸡与鹌鹑属间杂交早期雌性和雄性胚胎组织中提取小RNA,并构建各自的cDNA文库,通过Illumina/Solexa二代测序平台对两样本Small RNA进行高通量深度测序,结合生物信息学的方法对其属间杂交早期的雌性和雄性胚胎中已知的和预测的miRNAs的类型、长度、丰度以及参与的KEGG通路等进行了初步的统计和分析。结果显示,鸡与鹌鹑属间杂交早期雌性胚胎组织的比对序列有16 058 009条,雄性组织有17 943 294条;雌性胚胎预测得到132种miRNA,雄性胚胎预测得到460种miRNA;雌性和雄性样本间差异显著的miRNA有117个(P<0.01);KEGG通路分析表明,这些差异miRNAs的靶基因主要参与了Wnt信号通路、MAPK信号通路、TGF-beta信号通路等与胚胎生长发育相关的途径。结果表明,就已知的miRNAs而言,在鸡与鹌鹑属间杂交雌性和雄性胚胎间存在着一定的差异,这些差异的miRNAs将为后续的功能和调控机理实验研究提供依据。
- 郑炜赵宗胜李青峰班谦李洪涛梁耀伟
- 关键词：性别分化MICRORNAS
- 微卫星标记遗传距离与鸡杂种优势的相关分析被引量：2
- 2010年
- 试验利用微卫星标记技术测定6个亲本群体及其杂交后代间的遗传距离,并结合鸡主要经济性状的杂种优势率进行了相关性分析。结果表明,亲本间遗传距离与7个性能指标杂种优势率的相关系数绝对值在0.0651～0.9344之间,胸宽、腹脂重、半净膛重、全净膛重、腿肌重与遗传距离呈正相关;初生重、胫长与遗传距离呈负相关,获得了全净膛重等3个可用于预测杂交后代生产性能的指标,提示微卫星标记遗传距离对杂种优势的预测有重要的参考价值。
- 赵宗胜李大全李应生王遵宝班谦郑炜
- 关键词：杂种优势微卫星标记
- 发酵牛初乳新产品研制被引量：3
- 2010年
- 以新鲜牛初乳和果蔬为主要原料,研制出发酵初乳果蔬型酸奶。本文以果蔬种类及添加量、菌种、白砂糖加入量为试验因子,进行了L9(34)的正交试验。结果表明:7%的苹果、适量的中粘菌种(新疆石河子市商品酸奶菌种)、3%白砂糖发酵的初乳果蔬酸奶可获得最佳口感。
- 马军德周长路郑炜孔令芳陈瑞花赵宗胜
- 关键词：牛初乳乳成分发酵果蔬酸奶
- 基于慕课的混合式课程改革探讨——以常用仪器操作与应用课程为例被引量：2
- 2019年
- 混合式教学改革是将开放在线课程学习和传统教学模式有机结合的新型授课模式。本文介绍了常用仪器操作与应用课程特点,分析了其传统教学方式,提出了线上自学、线下答疑与现场操作的SPOC混合式教学模式,旨在提高学生的积极性,改善教学效果,同时培养学生良好的学习主动性。
- 郑炜王勇张辉
- 关键词：教学改革网络教学
- 利用配合力分析预测肉杂鸡的杂种优势被引量：1
- 2012年
- 配合力是衡量亲本性状配合效果的一个指标，反映品种或品系通过杂交能够获得杂种优势的程度。在育种过程中，可以作为亲本选配的一个标准。目前，已有许多研究者围绕这一领域开展了理论方法的研究，并进行了许多成功实践，获得估算配合力的数学模型，为育种工作奠定了理论基础。目前，
- 赵宗胜李大全李伟王遵宝郑炜
- 关键词：杂种优势肉杂鸡亲本性状育种过程亲本选配
- 布鲁氏菌分泌蛋白BspI生物信息学分析及多克隆抗体制备
- 2022年
- 【目的】试验旨在对布鲁氏菌分泌蛋白BspI进行生物信息学分析,构建原核表达载体,获得BspI蛋白并制备其多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】使用在线软件对BspI蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,参照布鲁氏菌16M株BspI基因序列(GenBank登录号:DK63_1233)设计引物,PCR扩增目的基因后连接至pMD19-T克隆载体并筛选阳性克隆,将目的基因连接到pET-28a表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,加入IPTG诱导蛋白表达,并进行SDS-PAGE分析,用镍柱亲和层析方法纯化蛋白,纯化后的蛋白与弗氏佐剂混合免疫试验兔,采血分离血清,通过Western blotting、间接ELISA法进行多克隆抗体特异性及抗体效价分析。【结果】BspI蛋白为不稳定亲水性蛋白,存在跨膜结构,无信号肽区域,有13个磷酸化位点和7个抗原决定簇,二级结构主要由α-螺旋、延伸链和无规则卷曲组成。PCR成功扩增出675 bp的BspI基因,成功构建了pET-28a-BspI表达载体。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,成功表达出25.3 ku的蛋白,纯化后无明显杂带,制备的多克隆抗体能够特异性地与BspI蛋白结合。间接ELISA结果显示,BspI蛋白多克隆抗体效价为1∶409600。【结论】制备的兔源BspI蛋白多克隆抗体可以特异性识别BspI蛋白,该蛋白具有较好的反应原性。试验结果为进一步研究BspI蛋白在布鲁氏菌的胞内寄生中发挥的作用提供了参考。
- 肖洋洋马忠臣李芮芮陈创夫郑炜郑炜王鹏雁
- 关键词：布鲁氏菌生物信息分析多克隆抗体
