钟云平
- 作品数:4 被引量:6H指数:2
- 供职机构:浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金浙江省教育厅科研计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 纳米羟基磷灰石携载lefty-1基因对人乳腺癌细胞的杀伤效应被引量:2
- 2016年
- 采用聚乙烯亚胺为调控剂,氯化钙和磷酸氢二钠为原料,共沉淀法合成一种长梭状纳米羟基磷灰石。通过场发射扫描电镜、X射线粉末衍射、红外吸收光谱和热重分析仪对材料性能进行表征。体外降解实验表明羟基磷灰石颗粒具有可降解性,在弱酸性条件下更容易降解,具有pH值响应性。颗粒与质粒DNA体外负载曲线及基因释放曲线结果表明,长梭状羟基磷灰石颗粒能够有效地携载并且表现对质粒DNA的持续释放。体外转染实验证实颗粒携载pEGFP-C1-lefty-1质粒后在细胞中成功表达绿色荧光蛋白。MTT结果表明所制备的羟基磷灰石颗粒对人乳腺上皮细胞表现极低的细胞毒性,具有良好的生物相容性,携载pEGFP-C1-lefty-1质粒后对人乳腺癌细胞具有良好的杀伤效果。
- 钟云平姚晨雪宋国龙赖文陈岑解纯刚孔祥东
- 关键词:羟基磷灰石人乳腺癌细胞杀伤效应聚乙烯亚胺
- 纳米羟基磷灰石携载lefty-1基因对人乳腺癌细胞的杀伤效应
- 基因治疗的关键是在于选择合适的基因载体。纳米羟基磷灰石(HAp)具有良好的生物相容性和生物降解性在基因载体中有着广泛的运用。本课题通过水热共沉淀法合成了三种纳米HAp颗粒,并将颗粒负载质粒DNA(pDNA),研究其基因负...
- 钟云平
- 关键词:乳腺癌纳米羟基磷灰石细胞凋亡杀伤效应
- A组轮状病毒结构蛋白VP6在家蚕杆状病毒表达系统中的表达被引量:2
- 2012年
- A组轮状病毒(rotavirus,RV)是婴幼儿严重病毒性腹泻的主要病原,VP6为轮状病毒的主要结构蛋白之一,天然VP6具有很强的抗原性和免疫原性。通过基因重组技术将A组轮状病毒T114中国地方株VP6基因克隆入转移载体质粒pBacPAK8中,并将重组质粒pBacPAK8-VP6与线性化家蚕杆状病毒Bm-BacPAK6DNA共转染BmN细胞,获得重组病毒BmNPV-VP6。用BmNPV-VP6感染BmN细胞和家蚕5龄幼虫,Western blotting检测表明在BmN细胞和家蚕5龄幼虫的血淋巴中均可检测到120 kD的特异性条带,提示重组VP6蛋白在家蚕中获得表达,与VP6三体形式的大小相符合。ELISA检测结果显示,重组VP6蛋白在BmN细胞和家蚕5龄幼虫血淋巴中的表达分别在感染后第4天和第6天达到最高水平。VP6在家蚕杆状病毒表达系统中的成功表达可为新型轮状病毒疫苗的研制提供新的途径。
- 李司钟云平张海花应慧慧于威张耀洲
- 关键词:A组轮状病毒
- CTB-Aβ42融合蛋白的原核表达条件优化及鉴定被引量:2
- 2012年
- 目的探索融合基因CTB-Aβ42在大肠杆菌中表达的最适条件,并纯化得融合蛋白。方法设置不同的诱导温度、诱导时间、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度,在大肠杆菌中表达融合基因CTB-Aβ42,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定表达产物,GST亲和色谱柱纯化目的蛋白,Western blot鉴定目的蛋白免疫原性。结果 SDS-PAGE结果显示,GST-CTB-Aβ42融合蛋白分子质量约为45 kD,与预期结果一致;Western blot结果表明,纯化得到的目的蛋白具有免疫原性。在诱导条件为30℃,0.1 mmol/L IPTG诱导2 h表达的可溶性蛋白所占比例最高;在37℃,0.1mmol/L IPTG诱导4 h表达的融合蛋白总量最高,小部分可溶性表达,大部分以包涵体的形式存在。结论本实验对CTB-Aβ42融合蛋白的原核表达条件进行了优化,经GST亲和色谱柱纯化获得具有免疫原性的融合蛋白。
- 程晶晶潘斯科钟云平张涵铭王驰余帅于威李司
- 关键词:Β-淀粉样蛋白可溶性表达胞内表达