- 高效液相色谱法同时检测小鼠血浆中皮质酮和去氢皮质酮的浓度
- 2012年
- 目的:建立HPLC法测定血浆中的皮质酮和去氢皮质酮浓度。方法:小鼠血浆样品在酸性条件中用乙酸乙酯萃取;采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离,流动相为乙腈-水-0.1%三氟乙酸,流速为1 mL·min-1,柱温25℃,检测波长为246 nm。结果:皮质酮浓度在0.05～8 mg·L-1;范围内线性关系良好(r=0.9995),定量下限为0.05 mg·L-1。去氢皮质酮浓度在0.05～8 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9994),定量下限为0.05 mg·L-1。结论:本方法准确可靠,适用于皮质酮及其代谢产物去氢皮质酮的血药浓度检测。
- 李婉姝钱建畅胡利明徐涛胡国新
- 关键词：高效液相色谱法皮质酮代谢产物血药浓度检测
- 中国汉族人群细胞色素P4502D6(CYP2D6)基因多态性研究
- 钱建畅
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- 结直肠癌淋巴结转移与APC、p53和K-ras基因变异的相关性研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨结直肠癌淋巴结转移与APC、p53和K-ras基因变异的相关性。方法用组织DNA抽提试剂盒提取32例淋巴结转移和20例无淋巴结转移的结直肠癌组织DNA,用DHPLC法对APC基因第15号外显子突变富集区(mutation clus-ter region,MCR)和p53基因的第4～9外显子进行基因变异初筛,对K-ras第12、13和61密码子采用PCR产物直接测序进行基因变异初筛,并用基因克隆测序法进行各变异位点确认。结果 APC基因在淋巴结转移患者癌组织中的突变频率显著高于无淋巴结转移患者(53.1%vs 15.0%P=0.006),在Ⅲ和Ⅳ期患者癌组织中突变频率显著高于Ⅰ和Ⅱ期患者(60.0%vs 10.5%,P=0.001),在肝转移患者癌组织中的突变频率显著高于无肝转移患者(85.7%vs 31.1%,P=0.006)。结论本研究结果显示APC基因MCR的基因变异可能是结直肠癌淋巴结转移的重要生物标志,也可能是临床分级及肝转移的重要生物标志。
- 徐新民邓周录钱建畅王鹏蔡哲蔡剑平
- 关键词：结直肠癌淋巴结转移APC基因
- miR-21,miR-31,miR-96和miR-135b在结直肠癌组织中的表达及其临床意义研究
- 目的:探讨结直肠癌组织及其正常对照组织中miR-21,miR-31,miR-96和miR-135b的表达及其与临床特征之间的相关性.方法:选取2009年10月至2010年12月在中日友好医院经手术切除的原发性结直肠癌组织...
- 徐新民邓周录钱建畅王鹏蔡哲张可华蔡剑平
- 关键词：结直肠癌MICRORNA实时定量PCR
- 秀丽隐杆线虫NDX-4蛋白的体外表达及酶学活性研究
- 2014年
- 目的构建秀丽隐杆线虫NDX-4基因的克隆载体和表达载体,诱导NDX-4蛋白表达,研究NDX-4的体外酶学活性。方法构建NDX-4的克隆载体,将NDX-4的开放阅读框架(ORF)插入PGEM-T载体中扩增;采用双酶切将NDX-4ORF连入表达载体pET-30a(+)中;将连接质粒转入BL21(DE3)感受态细胞后,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)对NDX-4蛋白进行表达诱导,并进行树脂纯化;用SDS-PAGE和Western blot检测以评价NDX-4体外表达和纯化的质量;采用高效液相色谱-紫外检测技术(HPLC-UV)检测NDX-4蛋白水解8-oxodGTP和8-oxoGTP的活性。结果 SDS-PAGE和Western blot检测均在经IPTG诱导的蛋白提纯物泳道上出现单一条带,分子质量约为24kDa,而未诱导的和空载体均未见条带。HPLC-UV检测结果显示加入NDX-4蛋白的8-oxodGTP和8-oxoGTP均被水解为相应的单磷酸和二磷酸氧化核苷,并且随着蛋白量的增加,两种产物的量逐渐增多。结论秀丽隐杆线虫的NDX-4蛋白具有水解8-oxodGTP和8-oxoGTP的双重功能,可能对抑制DNA和RNA的氧化损伤具有重要意义。
- 郭娇徐新民干伟史飞钱建畅周晓阳蔡剑平
- 关键词：HPLC-UV酶活性
