陈亚坤
- 作品数：11 被引量：14H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人UGT1A3重组酶催化芹菜素葡醛酸结合反应被引量：2
- 2006年
- 目的旨在了解人UGT1A3重组酶与芹菜素的有关代谢及其酶动力学参数,并阐述不同有机溶剂对酶动力学参数测定的影响。方法采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶与芹菜素37℃共孵育,用HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度,利用Lineweaver Burk法计算酶动力学参数,并进一步进行代谢物的确认。同时考察了用不同有机溶剂溶解底物对酶动力学参数测定的影响。结果采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶,测得其催化芹菜素的Km为(28.88±2.47)μmol.L-1,Vmax为(224.19±21.11)nmol.m in-1.g-1,Vmax/Km为(7.75±0.29)mL.m in-1.g-1。不同有机溶剂对酶动力学参数测定无显著影响。结论芹菜素可被人UGT1A3重组酶催化,进行葡醛酸结合反应。
- 谢升谷陈亚坤陈枢青曾苏
- 关键词：芹菜素动力学参数
- N^+-葡萄糖醛酸缀合反应的物种差异
- 2004年
- 目的 综述N+ 葡萄糖醛酸缀合反应的物种差异。方法 根据底物的结构分类 ,将脂肪叔胺、哌啶、哌嗪、吡啶、咪唑和三嗪的N+ 葡萄糖醛酸缀合反应在各物种间进行比较 ,并运用分子生物学的方法对此类反应物种差异的可能遗传学基础进行解释。结果 N+ 葡萄糖醛酸缀合反应具有明显的物种差异性 ,常被认为是高等灵长类所独有 ,但也有个别此类反应在低等实验动物中进行的报道。结论 物种差异的研究对动物实验数据的正确挖掘解释十分重要。
- 陈亚坤李新曾苏
- 关键词：葡萄糖醛酸实验动物遗传学基础灵长类
- 细菌碱性磷酸酶-人甾体受体辅活化因子-1的表达及应用
- 从E.coli JM83基因组和人肝总RNA中分别扩增获得细菌碱性磷酸酶(BacterialAlkaliile Phosphatase,BAP)基因和人甾体受体辅活化因子-1(Steroid Receptor Coact...
- 陈亚坤陈枢青曾苏
- 关键词：蛋白质相互作用
- 文献传递
- 手性药物的研究策略被引量：10
- 2004年
- 钱鸣蓉陈亚坤曾苏
- 关键词：手性药物给药对映体新药半合成手性分子
- 活性指导下的鸡肝散提取物及其制剂的质量研究
- 目的：研究鸡肝散提取物及其制剂的体内外吸收、代谢作用特点，为新药质量控制提供科学依据。
方法：将鸡肝散提取物分别与Caco-2细胞、鼠肝微粒体共孵育，测定鸡肝散提取物中主要成分木犀草素苷和苷元的体外吸收转运和葡...
- 应景艳麻佳蕾徐亚萍曾苏王以陈亚坤姚彤炜
- 关键词：鸡肝散CACO-2细胞药代动力学
- 文献传递
- 人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶UGT1A3的异源表达及活性测定
- 目的:在中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)中异源表达,获得活性人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A3(UGT1A3),并以已知底物槲皮素为底物测定该异源表达酶的体外活性.方法:人肝组织的总RNA经TRIzol试剂提取获得总RNA....
- 陈亚坤李新陈枢青曾苏
- 关键词：槲皮素异源表达活性测定成纤维细胞药物代谢
- 文献传递
- 活性指导下的鸡肝散提取物及其制剂的质量研究
- 目的研究鸡肝散提取物及其制剂的体内外吸收、代谢作用特点,为新药质量控制提供科学依据。方法将鸡肝散提取物分别与Caco-2细胞、鼠肝微粒体共孵育,测定鸡肝散提取物中主要成分木犀草素苷和苷元的体外吸收转运和葡醛酸结合代谢活性...
- 应景艳麻佳蕾徐亚萍曾苏王以陈亚坤姚彤炜
- 关键词：鸡肝散CACO-2细胞药代动力学
- 文献传递
- BAP-SRC-1融合蛋白的表达及其在药物代谢酶调控研究中的应用
- 2005年
- 目的获得活性表达的细菌碱性磷酸酶(bacterial alkaline phosphatase,BAP)基因和人甾体受体辅活化因子-1(steroid recep- tor coactivator-1,SRC-1)的融合蛋白,应用于辅活化因子与核受体的结合研究。方法从Escherichia coli JM83基因组和人肝总RNA中分别扩增获得BAP基因和SRC-1的186个氨基酸对应的基因序列(简称SRC186)。用重组技术,构建BAP-SRC186- pET28a融合基因表达载体,在Escherichia coli Rosetta(DE3)中,以IPTG低温诱导表达。以对硝基苯磷酸盐(p-nitrophenyl-phos- phate,PNPP)为底物进行活性测定。活性表达的BAP-SRC186融合蛋白被应用于辅活化因子与核受体的结合研究。结果获得可溶性融合蛋白BAP-SRC186。该融合蛋白的BAP比活为(0.176±0.013 4)μmol·min-1·mg(pro)-1 在利福平存在的情况下,BAP-SRC186能与孕烷X受体配体结合域(pregnane X receptor ligand binding domain,PXRLBD)发生利福平剂量依赖性的相互作用,作用强度通过BAP的显色反应可方便地检测结论BAP融合蛋白与核受体的结合研究为药物代谢酶调控的体外研究开辟了新的思路。
- 陈亚坤陈枢青曾苏
- 关键词：核受体
- 中药与天然药物代谢活性筛选技术平台研究
- 姚彤炜曾苏陈枢青蒋惠娣陈亚坤王以钱鸣蓉徐亚萍阮昊麻佳蕾
- 一、建立模拟人肠道的Caco-2细胞和P-gp转基因细胞，模拟人肝药物代谢酶的CYP和UGT转基因细胞，作为体外药物吸收代谢研究试验模型。培养21天的Caco-2细胞单层跨膜电阻达500Wcm2；标志性药物Lucifer...
- 关键词：
- 关键词：天然药物中药
- 人UGT1A3催化黄酮类化合物葡醛酸结合反应定量构效关系研究被引量：2
- 2007年
- 目的建立人UGT1A3催化黄酮类化合物定量构效关系,考察不同结构参数对葡醛酸结合反应的影响。方法采用半经验量子化学计算法MOPAC-AM1及逐步回归方法对11个黄酮类化合物的结构参数和UGT1A3催化葡醛酸反应的Km值进行定量构效关系研究。结果所建立的QSMR模型(pKm=-2.207 07+0.002 56HOF+3.212 90 QC5)具有较好的拟合性。结论分子生成热(HOF)和5位C上的静电荷这两个结构参数是影响其葡醛酸结合活性的主要结构因素。
- 谢升谷陈亚坤张伟陈枢青曾苏
- 关键词：黄酮类化合物定量构效关系
