唐娜
- 作品数：24 被引量：27H指数：3
- 供职机构：石河子大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- TRPC1与Orai1的相互作用参与人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导的钙内流及一氧化氮生成
- 2018年
- 本研究旨在探讨Ca^(2+)感受蛋白经典瞬时感受器电位蛋白1(canonical transient receptor potential channel 1,TRPC1)与钙释放激活钙通道调节分子1(calcium release-activated calcium modulator 1,Orai1)的相互作用在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)钙敏感受体(Ca-sensing receptor,Ca R)介导的Ca^(2+)内流和一氧化氮(NO)生成中的作用。取2~3代HUVECs,单独或联合用Ca R激动剂精胺[Spermine,激活钙库活化的钙通道(store-operated calcium channels,SOC)和受体活化的钙通道(receptor-operated calcium channels,ROC)]、ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)+Ca R负性变构调节剂Calhex231(阻断SOC,激活ROC)、PKC抑制剂Ro31-8220(激活SOC,阻断ROC)以及经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967(激活SOC,阻断ROC)处理。用免疫荧光技术检测HUVECs中TRPC1和Orai1的蛋白表达、共定位;用免疫共沉淀法检测TRPC1和Orai1之间的相互作用模式;随后用TRPC1和Orai1干扰质粒联合转染HUVECs,采用荧光探针同时检测HUVECs中[Ca^(2+)]i和NO生成的变化。结果显示,HUVECs中TRPC1和Orai1蛋白表达共定位于胞膜。与Spermine+Ca^(2+)组相比,Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组HUVECs中定位于胞浆中的TRPC1、Orai1蛋白表达均显著降低,二者的结合也减少。免疫共沉淀结果显示,Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组TRPC1/Orai1和Orai1/TRPC1相对比值百分数均明显低于对照组以及Spermine+Ca^(2+)组(均P<0.05),表明Orai1和TRPC1相互作用均减弱。联合转染质粒敲低TRPC1和Orai1显著降低Spermine+Ca^(2+)组、Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组的HUVECs中[Ca^(2+)]i和NO生成。以上结果提示,TRPC1与Orai1以二元复合物的形式激活SOC和ROC,介导Ca^(2+)内流及NO生成。
- 王腊梅唐娜钟华庞丽娟张春军何芳
- 关键词：钙敏感受体一氧化氮
- 新疆哈萨克族原发性高血压患者人巨细胞病毒流行基因型及变异分析
- 2021年
- 目的为了解新疆地区哈萨克族及原发性高血压(EH)患者人巨细胞病毒(HCMV)感染流行株的分子流行病学特征,并确定该人群中EH患者HCMV的易感基因型。方法采用病例-对照研究方法,采集新疆塔城地区沙湾县博尔通古乡800例哈萨克族(467例EH患者,333例健康参与者)的外周血标本。使用Real-time PCR、PCR限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及测序技术检测HCMV-DNA,鉴别gB基因型并构建进化树。结果107例HCMV活动性感染患者中EH患者占65.4%(70/107),明显高于健康对照组34.6%(37/107)。新疆地区哈萨克族人群中HCMV感染流行株存在3种gB基因型:gB2占37.4%(40/107),混合基因型:gB1+2占47.6%(51/107)、gB2+3占15%(16/107),分布及构成比存在差异;EH患者中存在三种gB基因型:gB2型占37.1%(26/70)、gB1+2占48.6%(34/70)、gB2+3占14.3%(10/70),分布及构成比存在差异;高血压男性中存在三种基因型:gB2型占47.1%(16/34),gB1+2型占47.1%(16/34),gB2+3型占5.8%(2/34);高血压女性中则存在三种基因型:gB2型占27.8%(10/36),gB1+2型占50.0%(18/36),gB2+3型占22.2%(8/36);高血压男性和女性的3种基因型的分布及构成比不存在差异(χ^(2)=5.049,P>0.05);生物信息学结果发现:23例单一gB基因核苷酸序列差异性在0~11.5%,氨基酸序列差异性在0~13.1%。结论新疆哈萨克族人群及高血压患者中易感基因型为gB1+2和gB2型。且新疆哈萨克族人群中单一HCMV gB基因核苷酸以及氨基酸序列存在变异。
- 唐娜钟华王腊梅席冬梅何芳
- 关键词：HCMV高血压
- 疫情背景下留学生《病理生理学》线上教学模式初探
- 2022年
- 病理生理学是连接基础医学与临床医学之间的重要桥梁性课程,难度较大,且有配套机能实验课程,突如其来的新冠肺炎疫情对本课程组留学生教学提出了全新的挑战,也让留学生的课程从线下转移至线上,本课程组通过钉钉线上直播进行线上教学活动。本文通过对留学生线上课程实施过程及效果总结,探索疫情背景下留学生《病理生理学》线上教学模式。
- 席冬梅何芳于洪涛张春军唐娜李新芝章乐吴芳钟华
- 关键词：留学生病理生理学线上教学教学模式
- TRPC1/STIM1复合体调节人脐静脉内皮细胞钙池操纵性钙通道和受体操纵性钙通道介导的钙内流和NO生成被引量：1
- 2017年
- 目的研究瞬时受体电位通道1(TRPC1)/基质交联分子1(STIM1)复合体在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)钙池操纵性钙通道(SOCC)和受体操纵性钙通道(ROCC)介导的钙内流和NO生成中的作用。方法取2~3代HUVEC,将构建的TRPC1和STIM1干扰质粒分别转染HUVEC,观察细胞转染效果的同时采用real-time PCR和Western blot检测TRPC1、STIM1 mRNA和蛋白的表达。将细胞分别与钙敏感受体(CaR)激动剂精胺、ROCC模拟剂(TPA)+CaR负性变构调节剂Calhex231、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro31-8220及经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967孵育后,用荧光探针Fura-2/AM及DAF-FM负载方法同步检测[Ca2+]i和NO生成的变化;随后用TRPC1和STIM1干扰质粒同时转染HUVEC,与精胺孵育后检测[Ca2+]i和NO生成,免疫共沉淀法检测TRPC1和STIM1的相互作用。结果与Control组相比,TRPC1转染组和STIM1转染组TRPC1、STIM1 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05);在四种不同处理作用下,TRPC1转染组和STIM1转染组[Ca2+]i△ratio值和NO净荧光强度值均明显降低(P<0.05);与Control组、TRPC1转染组及STIM1转染组相比,TRPC1和STIM1共转染组[Ca2+]i△ratio值和NO净荧光强度值均明显降低(P<0.05);TRPC1与STIM1相互作用形成复合体,且在CaR激动剂的剌激下作用增强。结论 TRPC1/STIM1复合体共同调节CaR经SOCC和ROCC激活介导的钙内流和NO生成。
- 王腊梅胡清华钟华唐娜孙志萍何芳
- 关键词：一氧化氮人脐静脉内皮细胞
- 鼠巨细胞病毒升高血压并引起血管平滑肌的增殖重塑
- 2020年
- 目的通过构建鼠巨细胞病毒(MCMV)腹腔感染小鼠模型,探讨鼠MCMV与血管平滑肌增殖重塑的关系。方法通过MCMV腹腔感染7月龄C57BL/6J小鼠模型,将C57BL/6J小鼠分为对照组与实验组(MCMV感染组),每组10只;在9月龄及12月龄时使用颈动脉测压比较两组血压变化情况,并分别留取胸主动脉组织切片进行HE、Masson染色,观察小鼠主动脉重塑及纤维化程度,利用image pro-plus软件计算主动脉胶原面积占全部面积比值,通过Western Blot检测血管重塑蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨桥蛋白(OPN)、细胞增殖核抗原(PCNA)的表达。结果 MCMV感染组小鼠血压升高,胸主动脉中膜增厚增加,胸主动脉胶原面积百分比增加,血管重塑蛋白由收缩表型向合成表型转化。结论 MCMV感染可引起小鼠血压升高,并导致胸主动脉重塑。
- 黄桢石运忠唐娜陈璋玥徐浩文汤利常红霞李凯芳何芳
- 关键词：MCMV高血压血管重塑
- 钙敏感受体介导的人脐静脉内皮细胞钙内流及一氧化氮生成过程中TRPCI与STIM1的相互作用被引量：1
- 2017年
- 目的探讨经典瞬时受体电位通道1（TRPC1）与基质相互作用分子1（STIM1）在钙敏感受体（CaR）介导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）钙离子（Ca2＋）内流和一氧化氮（NO）生成中的相互作用。
方法取华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科健康孕产妇剖宫产新生儿的新鲜脐带，原代培养HUVEC并传代。将所得HUVEC分别与CaR激动剂精胺[激活钙池操纵性钙通道（SOC）和受体操纵性钙通道（ROC）]、ROC模拟剂12－O－十四烷酰佛波醇－13－乙酸酯（TPA）＋CaR负性变构调节剂Calhex231（阻断SOC阻、激活ROC）、蛋白激酶C（PKC）抑制剂Ro31－8220及经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967（激活SOC、阻断ROC）共孵育。采用免疫荧光技术检测HUVEC中TRPC1与STIM1的蛋白表达，免疫共沉淀法检测TRPC1与STIM1之间的相互作用。取2～3代HUVEC进行分组，将构建的TRPC1、STIM1干扰质粒（shTRPC1、shSTIM1）联合转染HUVEC即shTRPC1＋shSTIM1组 （实验组）、vehicle－shTRPC1＋vehicle－shSTIM1组 （空质粒组）和对照组，将3组细胞分别加入上述4种不同的药物进行干预。采用荧光探针Fura－2/AM检测HUVEC细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）的变化，NO荧光探针DAF－FM负载方法同步检测HUVEC中NO生成的变化。
结果（1） HUVEC中TRPC1与STIM1的蛋白表达：激光共聚焦显微镜下观察，正常对照组HUVEC中TRPC1和STIM1蛋白的表达呈阳性，二者共定位于胞浆。Calhex231＋TPA＋精胺＋Ca2＋组、Ro31－8220＋精胺＋Ca2＋组和Go6976＋精胺＋Ca2＋组HUVEC中定位于胞浆中的TRPC1、STIM1均减少，二者结合也减少。（2） HUVEC中TRPC1与STIM1的相互作用：Calhex231＋TPA＋精胺＋Ca2＋组、Ro31－8220＋精胺＋Ca2＋组和Go6976＋精胺＋Ca2＋组STIM1/TRPC1和TRPC1/STIM1的相对比值的百分数分别为（25.98±2.17）%和（44.10±4.01）%、（20.85±1.01）%和（46.31±3.47）%、（23.88±2.05）%和（39.65±2.91）%�
- 王腊梅钟华唐娜庞丽娟张春军何芳
- 关键词：内皮细胞脐静脉受体钙敏感一氧化氮
- 关于如何提升病理生理学实验教学质量的探讨被引量：1
- 2016年
- 病理生理学实验是医学高等院校基础课程中的重要内容之一,本文就针对如何提升其教学质量及学生综合素养的培养提出一些建议。
- 唐娜何芳张万江张春军钟华吴芳李新芝刘永敏章乐
- 关键词：病理生理学实验教学教学质量
- 病理生理学教师走向临床反哺教学的意义
- 2016年
- 病理生理学是基础医学与临床医学之间的桥梁课程,具有明显的临床属性,其教学要求教师既要具有雄厚的理论功底,还要储备丰富的临床知识。作为一名优秀的病理生理学教师,必须坚持基础与临床相结合,定期下临床实践,将临床实践经验潜移默化地运用在理论课堂教学,这对改善教师的知识结构、提高专业素质及教学质量都有积极的促进作用。
- 刘永敏章乐何芳唐娜张春军钟华吴芳李新芝
- 关键词：病理生理学教学
- 过表达microRNA-29a上调锌脂蛋白91对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响被引量：4
- 2016年
- 目的建立高感染效率、稳定过表达microRNA-29a(mi R-29a)的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12),探索miR-29a对PC12细胞凋亡的影响。方法将miR-29a前体表达载体、空白对照载体进行慢病毒包装,用病毒上清感染PC12并进行抗性筛选。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测miR-29a的表达,流式细胞术检测miR-29a稳定过表达组、空质粒对照组以及未感染组PC12细胞的凋亡情况,利用Target Scan 6.0数据库预测miR-29a的关键靶点,RT-qPCR以及Western blot检测预测的miR-29a下游靶基因mRNA以及蛋白表达的变化。结果经抗性筛选后获得稳定表达miR-29a的PC12细胞系,荧光显微镜下观察各组PC12细胞的感染效率均达80%以上,miR-29a过表达组凋亡率为(5.1±0.92)%,空质粒对照组为(1.832±0.26)%,未感染组为(1.667±0.185)%,miR-29a过表达促进PC12细胞凋亡(P<0.01),空质粒对照组与未感染组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义;RT-qPCR检测miR-29a过表达时锌指蛋白91(ZFP91)的表达量升高,miR-29a过表达组ZFP91 mRNA的表达量是空质粒对照组的1.835倍(P=0.000),空质粒对照组与未感染组ZFP91 mRNA的表达量比较差异无统计学意义;Western blot检测的ZFP91蛋白表达量与空质粒对照组比较也升高。结论在PC12中miR-29a过表达促进PC12细胞凋亡,过表达miR-29a也促进ZFP91表达,其机制仍待进一步阐明。
- 刘永敏段萍鄢文海何芳唐娜钟华
- 关键词：嗜铬细胞瘤细胞实时荧光定量聚合酶链反应
- 黄连素通过PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制高糖条件下的肾脏系膜细胞增殖被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨黄连素（berberine,BBR）对高糖条件下的大鼠肾脏系膜细胞 HBZY-1 cells （MCS）增殖的影响及其作用机制。方法将对数生长期细胞分成正常糖处理组（NG 组）,高糖组（HG组）和黄连素组（BBR组）。NG组细胞体系常规培养培养,HG 组细胞体系加入40 mmol/L 葡萄糖,BBR组细胞培养体系中加入40 mmol/L葡萄糖＋黄连素30μmol/L。各组细胞培养48 h 后,利用MTT检测各组HBZY-1细胞增殖；RT-PCR检测各组细胞p85,Akt和mTOR基因表达；West-ern blotting检测细胞中 p85、p-p85、Akt、p-Akt,mTOR 和 Collagen-Ⅳ蛋白的变化。结果 NG 组与HG组增值率分别为（25%±3%）和（75%±5%）,与 NG组增值率比较,HG组肾脏系膜细胞增殖率明显增高（P〈0.05）,p85与 Akt mRNA表达水平和蛋白水平均无明显变化（P＆gt;0.05）,但 p-p85、p-Akt,Collagen-Ⅳ蛋白表达水平和 mTOR mRNA 表达与蛋白水平均明显增加（P〈0.05）；BBR 组增值率为（42%±5%）,与 HG 组比较,BBR 组肾脏系膜细胞增值率明显降低（P〈0.05）,但 p-p85、p-Akt、Collagen-Ⅳ蛋白表达水平和 mTOR mRNA 表达与蛋白水平均明显下降（P〈0.05）,而 p85和Akt mRNA和蛋白表达水平均无统计学差异（P〈0.05）。结论黄连素能抑制高糖导致的系膜细胞增殖,其作用可能是通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活。
- 张新菊唐娜崔婷婷李融
- 关键词：黄连素
