王小龙
- 作品数：19 被引量：16H指数：2
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- sIL-4R-NAP融合基因
- 本发明涉及基因领域，提供了一种融合基因，用于抗哮喘，该基因包含编码可溶性白介素4受体sIL-4R的片段a和编码中性粒细胞激活蛋白HP-NAP的片段b。该基因可连入载体，起到很好的抗哮喘效果。
- 刘鑫康巧珍傅国汲振余王婷曲晓丽王小龙杜明萱
- 文献传递
- 兔抗鼠IL-12p35多克隆抗体的制备及应用
- 2017年
- 利用分子克隆方法构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化后,获得重组融合蛋白GST-IL-12p35。以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体。采用ELISA法评估抗体效价,Western blot检测抗体特异性。LPS刺激小鼠脾细胞,ELISA法检测IL-12抗体阻断后细胞培养上清中的IFN-γ的分泌量。结果:成功构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,并获得重组融合蛋白GST-IL-12p35(约48kDa)。抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体,ELISA法测得IL-12p35多克隆抗体效价为1256 000,Western blot证实制备的多克隆抗体能够识别结合重组蛋白。IL-12p35多克隆抗体能够有效地抑制LPS诱导的脾细胞IFN-γ的表达。
- 门颖丽康巧珍王小龙江慧刘诗梦汲振余王婷刘鑫
- 关键词：LPSIFN-Γ
- HSP70、JNK和p38在放线菌素D诱导的A549细胞凋亡中的作用被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨HSP70、JNK和p38在放线菌素D(Act D)诱导的人肺腺癌A549细胞凋亡中的作用。方法:采用MTT法确定Act D对A549细胞的染毒剂量。将对数生长期的A549细胞分为DMSO对照组、Act D染毒组、热处理(42℃,30 min)+Act D组、JNK抑制剂SP600125+Act D组和p38 MAPK抑制剂SB203580+Act D组进行处理。采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,Western blot检测各组细胞中HSP70、p-JNK、p-p38和Caspase-3的表达水平。结果:热处理、SP600125和SB203580均能降低Act D诱导的A549细胞的凋亡率(F=7 904.576,P<0.001)。热处理+Act D组的HSP70表达水平高于其余各组(F=46.640,P<0.001),而p-JNK、p-p38和Caspase-3的表达水平均低于Act D处理组(F=122.381、44.104和50.650,P<0.05)。Act D能提高Caspase-3的表达水平,且热处理、SP600125和SB203580均能降低Act D引起的Caspase-3的高表达状态。结论:热处理诱导产生的HSP70、JNK通路抑制剂SP600125和p38 MAPK通路抑制剂SB203580均可以抑制由Act D诱导的A549细胞凋亡。
- 王小龙冯斐斐孙鹏辉李杰陆皓泉阙菡雅徐小艳姚武周舫
- 关键词：凋亡热休克蛋白70放线菌素DJNKP38MAPK
- 肺腺癌组织中HSP70多肽复合物的分离及纯化被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨肺腺癌组织中HSP70多肽复合物分离及纯化的可行性方案。方法:采用裂解液裂解、超声破碎、ConA-sepharose亲和层析和DEAE阴离子交换层析方法,从肺腺癌组织中分离纯化HSP70蛋白复合物;通过SDS-PAGE电泳、Westernblot检测获得蛋白;运用Bradford法对其进行定量分析。结果:通过该实验方法可以从1g肺癌组织中获取110μg左右的HSP70多肽复合物,其相对分子质量为70000。结论:采用ConA-sepharose亲和层析和DEAE阴离子亲和层析相结合的蛋白纯化法可以获取高纯度的HSP70多肽复合物。
- 李杰梁守沛陆皓泉孙鹏辉王小龙许东姚武周舫
- 关键词：肺腺癌
- 一种多糖纳米剂型的制备方法和应用
- 一种多糖纳米剂型的制备方法和应用，属于食品与医药领域，具体方案包括以下步骤：步骤一、将多糖溶于去离子水中得到溶液A；步骤二、在搅拌的条件下将无水乙醇逐滴加到溶液A中，继续搅拌，得到悬浮液B；步骤三、将悬浮液B离心分离，沉...
- 伊娟娟鲁吉珂刘永奇刘可可康巧珍王小龙李雪高航
- 肺癌中热休克蛋白70-2基因多态性对其mRNA转录及蛋白表达水平的影响
- 2012年
- 目的探讨肺癌组织中热休克蛋h70-2（heatshockprotein70-2，HSP70-2）1267A／G位点基因多态性对HSP70-2mRNA转录及蛋白表达水平的影响。方法以郑州市某医院2008年2-8月经组织病理学确诊的46例肺癌患者为对象，应用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测其HSP70-21267A／G位点多态性，应用RT-PCR法检测HSP70-2mRNA水平，应用Westernhlt，tting测定HSP70水平。。结果肺癌组织中，HSP70-2mRNA转录水平（1．02±0．30）和HSP70表达水平（0．44±0．12）均高于癌旁止常组织（分别为0．19±0．04、0．12±0．02）（P值均〈0．01）。肺癌患并HSP70-21267A／G位点携带AA基因型者其HSP70-2mRNA水平（1．32±0．22）高于携带AG、GG基因型者（分别为0．95±0．17、0．70±0．16）（P〈0．01）；HSP70-21267A／G位点各基因型携带者HSP70水平分别为：0．47±0．13（AA型）、0．42±0．11（AG型）、0．45±0．11（GG型），其差异无统计学意义（P〉0．01）。结论HSP70-21267A／G位点多态性影响肺癌组织内HSP70mRNA转录水平，但对HSP70的表达水平无影响。
- 陆皓泉王玉珍孙鹏辉梁守沛李杰王小龙许东姚武吴逸明周舫
- 关键词：HSP多态性单核苷酸肺肿瘤
- rMBP-NAP依赖IL-12/IL-23轴对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究r MBP-NAP在肝癌H22荷瘤小鼠模型中的肿瘤生长抑制作用以及IL-12/IL-23在其发挥抗肿瘤作用中的角色。方法 BABL/c小鼠左前肢腋下皮下注射2×106个H22肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,荷瘤后第2天将小鼠随机分为两组,PBS组和r MBP-NAP组,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行治疗,期间监测肿瘤体积。取荷瘤小鼠脾脏制成单细胞悬液,分为对照组和抗体阻断组,同时加入丝裂霉素C处理过的H22细胞和r MBP-NAP与脾细胞共培养,抗体阻断组中分别加入anti-IL-12抗体和anti-IL-23抗体,对照组中加入同型抗体。于培养3 d和7 d后检测IFN-γ的表达。结果相对于PBS组,r MBP-NAP治疗组小鼠的肿瘤生长显著减缓。r MBP-NAP刺激后,荷瘤小鼠脾细胞分泌大量IFN-γ,共培养3 d和7 d后,IFN-γ表达持续累积。anti-IL-12抗体和anti-IL-23抗体阻断后,均可导致IFN-γ的表达量显著性下降。结论 r MBP-NAP能够显著性抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。
- 王小龙康巧珍门颖丽黄夏冰张亚萌刘鑫
- 关键词：IL-12IL-23IFN
- 一种多糖纳米剂型的制备方法和应用
- 一种多糖纳米剂型的制备方法和应用，属于食品与医药领域，具体方案包括以下步骤：步骤一、将多糖溶于去离子水中得到溶液A；步骤二、在搅拌的条件下将无水乙醇逐滴加到溶液A中，继续搅拌，得到悬浮液B；步骤三、将悬浮液B离心分离，沉...
- 伊娟娟鲁吉珂刘永奇刘可可康巧珍王小龙李雪高航
- MBP在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用被引量：1
- 2016年
- 目的：探讨大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（MBP）在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用及可能机制。方法：将12只6～8周龄的BALB/c小鼠皮下注射2×10^6个H22细胞,建立荷瘤模型,荷瘤后第2天将小鼠分为PBS组和MBP组,每组6只,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行干预,期间监测肿瘤体积和小鼠体重变化,测量肿瘤和各脏器质量,ELISA法检测脾细胞分泌IL-12和IFN-γ的水平,Real-time PCR检测肿瘤组织中IFN-γ和IL-17A mRNA的相对表达量。结果：MBP能抑制肿瘤的生长（P〈0.05）。与PBS组相比,MBP组小鼠脾细胞中IL-12、IFN-γ分泌量上升,肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达量上升,IL-17A mRNA的表达量下降（P〈0.05）。结论：MBP能够有效抑制肝癌H22肿瘤生长,其作用可能是通过激活Th1型免疫反应和抑制Th17型免疫反应。
- 门颖丽康巧珍王小龙杜明宣黄夏冰张亚萌汲振余王婷刘鑫
- 关键词：麦芽糖结合蛋白TH1TH17
- 抑制NOX1表达对A549细胞增殖与凋亡的影响
- ：探讨抑制非吞噬氧化酶1(NOX1)的表达对A549细胞增殖与凋亡的影响. 方法：实验分为Mock组、NC组和NOX1siRNA组,采用实时定量PCR法检测各组细胞中NOX1mRNA的表达量,采用MTT法检测不同组...
- 阙菡雅王小龙李杰徐小艳夏艳秋周舫
- 关键词：肺癌基因表达A549细胞细胞增殖细胞凋亡
