查雨锋
- 作品数：8 被引量：49H指数：3
- 供职机构：贵阳医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目贵州省社会发展科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 取代非环核苷混膦酸酯类衍生物的合成及生物活性
- 2014年
- 为寻找抗乙肝病毒(HBV)取代非环核苷混膦酸酯有效的结构优化策略。以阿德福韦单L-氨基酸酯和单非甾体药物羧酸酯为先导化合物,结合核苷类似物阿巴卡韦与阿拉莫韦的结构特征,采用亚结构拼合原理设计并合成了6-取代嘌呤非环核苷膦酸单L-氨基酸酯、单非甾体药物羧酸酯前药(9a^9l),其结构经1H NMR,ESI-MS,ESI-HRMS确证。采用HepG2 2.2.15细胞株、HK-2细胞株进行了目标化合物抗HBV活性以及肾细胞毒性评价。结果表明,化合物9a具有较强的抗病毒活性与作用选择性(EC500.48μmol/L,SI 763.72),具有较低的肾细胞毒性以及较高的化学与酶学稳定性,值得进一步深入研究。
- 欧瑜傅晓钟查雨锋张顺苏航董永喜
- 关键词：阿巴卡韦非甾体抗炎药抗病毒活性
- 不同温度及pH值对人结肠腺癌细胞模型的影响
- 2012年
- 目的:建立人结肠腺癌细胞系(Caco-2)细胞模型并对其药物研究的方法进行初步探讨。方法:通过测定跨细胞膜电阻(TEER)、荧光素通透量及碱性磷酸酶(AKP)评价Caco-2细胞模型,用MTT法考察HBSS缓冲液在不同pH值、不同温度及不同时间条件下对Caco-2细胞的毒性。结果:各项指标的测定值符合要求,表明本实验建立的Caco-2细胞模型的完整性、紧密性和通透性良好;进行药物Caco-2细胞吸收潜性研究时,药物作用4 h之内对Caco-2细胞模型没有影响。结论:建立的Caco-2细胞模型可用于药物吸收机制研究。
- 刘影李月婷查雨锋王静娴肖婷婷李靖董莉傅晓钟黄勇王永林
- 关键词：结肠腺癌碱性磷酸酶毒性试验
- 黔产钩藤药材茎枝和叶的HPLC指纹图谱比较被引量：5
- 2014年
- 目的：比较黔产钩藤带钩茎枝和叶的HPLC指纹图谱,分析二者化学成分的差异,为钩藤叶的后续研究提供实验依据.方法：采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版计算钩藤带钩茎枝和叶各10批样品的HPLC指纹图谱的相似度,以钩藤碱和异钩藤碱为指标成分进行指纹图谱比较,色谱条件为Kromasil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相甲醇（A）-0.02％氨水（B）梯度洗脱（0 - 45 min,30％ - 60％A;45 - 75 min,60％ - 64％A;75 - 90 min,64％ - 70％A;90-95 min,70％ - 70％A）,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长245 nm,进样量10 μL.结果：确定了16个共有峰构成10批钩藤茎枝药材的特征指纹图谱,各批样品的相似度均＞0.87;16个共有峰构成10批钩藤叶特征指纹图谱,各批样品的相似度均＞ 0.80.结论：钩藤叶中异钩藤碱含量高于钩藤茎枝,但二者含有的钩藤碱含量相差不大.建立的指纹图谱条件能用于比对钩藤茎枝和叶中主要化学成分,为钩藤叶的药用研究提供参考.
- 崔桂琴查雨锋王克英
- 关键词：相似度评价钩藤碱异钩藤碱
- 一种高纯度和高活力的大鼠脑微血管内皮细胞的提取及原代培养方法被引量：12
- 2014年
- 目的：建立一种纯度和活力较高、简单实用的大鼠脑微血管内皮细胞分离及原代培养方法,为建立体外血脑屏障提供材料。方法采集1-2周SD大鼠大脑皮质,应用Ⅱ型胶原酶和分散酶/胶原酶连续消化法,筛网过滤法及20%BSA和44%Percoll两次梯度离心法获得脑微血管段后,接种于培养瓶中进行原代培养,采用倒置显微镜对所培养的细胞进行形态学观察,以Ⅷ因子相关抗原免疫染色法对其进行鉴定。结果体外培养2h后,微血管内皮细胞爬出血管段进行贴壁生长,3～4 d呈典型的铺路卵石样结构,Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测内皮细胞表达呈阳性,可见细胞胞质呈棕色,阳性细胞占99%以上。结论该方法能成功地分离并培养出高纯度的大鼠脑微血管内皮细胞,对体外血脑屏障的建立以及脑微血管内皮细胞的生物学特性和功能的深入研究具有重要意义。
- 查雨锋张顺苏航刘亭傅晓钟董永喜王爱民王永林
- 关键词：脑微血管内皮细胞原代培养血脑屏障免疫染色
- 阿德福韦膦酸酯衍生物的肾毒性及抗HBV活性评价被引量：3
- 2013年
- 目的研究单非甾体抗炎药羧酸酯衍生物阿德福韦单硫代L-氨基酸酯的肾细胞毒性及抗HBV活性。方法采用HK-2人肾小管上皮细胞株,从细胞形态学、细胞生长和增殖活性及细胞结构损伤检测几方面评价了目标化合物的肾细胞毒性;采用HepG2.2.15细胞株,从细胞毒性与HBV-DNA抑制率方面评价了目标化合物抗HBV的作用效果。结果化合物均具有不同程度抗HBV的活性,其中,5a、5c、5e活性较强(EC50为22.73～29.72μmol.L-1);化合物5c、5d作用24、48 h后对HK-2细胞产生的形态学改变、细胞毒性(IC50>1 mmol.L-1)及不同浓度下LDH释放率均明显优于阳性对照Adefovir dipiv-oxil作用细胞24、48 h后的形态学、细胞毒性(827.18、446.99μmol.L-1)及LDH释放率。结论设计的化合物5c、5d具有抗病毒活性及较低的肾细胞毒性,有进一步研究的价值。
- 刘影裴健颖李靖董永喜傅晓钟查雨锋兰燕宇王永林
- 关键词：阿德福韦HK-2细胞非甾体抗炎药
- 大鼠脑微血管内皮细胞与周细胞、星形胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型被引量：28
- 2015年
- 目的应用原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞(brainmicrovessel endothelial cells,BMECs)与脑微血管周细胞(brain-microvessel pericytes,BMPC)、星形胶质细胞(astrocytes,AS)共培养建立可模拟在体状态的体外血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)模型。方法原代分离、纯化和培养大鼠BMECs、BMPC和AS,通过细胞形态学和免疫细胞化学染色方法鉴定原代培养的细胞,应用Millicell细胞培养插(孔径0.4μm)建立5种不同类型的体外BBB模型,经跨内皮电阻值(transendothelial electrical resistance,TEER)、荧光素钠通透性(sodium fluorescent,Na-FLU)、碱性磷酸酶(AKP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT1)的表达测定以及阳性药在体内和体外BBB通透量的相似性,比较评价其屏障功能。结果原代培养的BMECs呈典型的铺路卵石样结构,BMPC胞体较大且呈分枝状,AS有细长突触,胞质较浅;免疫细胞化学染色证实原代细胞为目标细胞;BMECs与BMPC、AS共培养后TEER值可达(478±25)Ω·cm2,Na-FLU的表观渗透系数为[(8.23±0.78)×10-6]cm·s-1,AKP和γ-GT1表达分别为(6.90±0.27)金氏单位·g-1Pro,(4.39±0.32)μg·g-1Pro;阳性药在体外BBB的表观渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp)与在体数据具有较好的相关性(R2=0.92)。结论原代培养的大鼠BMECs与BMPC、AS共培养建立的体外BBB模型在形态、结构及屏障功能方面具备BBB的基本特征,为研究BBB的生理学、病理学以及筛选化合物提供了一种有用工具。
- 查雨锋傅晓钟张顺罗敏欧瑜董永喜王爱民王永林
- 关键词：原代培养脑微血管内皮细胞周细胞星形胶质细胞免疫细胞化学
- 灯盏乙素苷元4'-N-取代氨甲基苯甲酸酯-7-取代烟酸酯衍生物的合成与体外抗氧化活性研究被引量：1
- 2015年
- 本研究以灯盏乙素苷元,N-取代氨甲基苯甲酸以及6-取代烟酸为原料,在偶联剂DCC/DMAP的作用下经4步反应制备了灯盏乙素苷元4'-N-取代氨甲基苯甲酸酯-7-取代烟酸酯衍生物1a^1f,并经1H NMR,ESI-MS以及HRMS确证结构。对化合物1a^1f进行了神经细胞氧化损伤保护活性与理化性质研究,结果显示,烟酸酯结构的引入能够提高化合物抗氧化活性以及水溶性,其中化合物1d具有较高的水溶性、体外稳定性及抗氧化活性,值得进一步研究。
- 张顺查雨锋傅晓钟董永喜王永林
- 关键词：PC12细胞烟酸
- 基于抗氧化活性增强的新型灯盏乙素苷元烟酸酯类衍生物的设计与合成被引量：1
- 2013年
- 目的:合成并设计具有较好清除自由基作用及较好理化性质的灯盏乙素苷元4'-烟酸酯类衍生物。方法:灯盏乙素苷元与二氯二苯甲烷在二乙二醇二甲醚为溶剂,加热条件下制备6,7-二苯缩酮保护灯盏乙素苷元,所得产物与取代烟酸在偶联剂DCC/DMAP的条件下缩合制备6,7-二苯缩酮保护灯盏乙素苷元4'-烟酸酯(5a～5e),后者经过乙酰氯/甲醇体系脱去保护基,获得目标化合物。结果:合成了5个未见报道的灯盏乙素苷元4'-烟酸酯(6a～6e),合成的化合物及重要中间体均经过1HNMR,ESI-MS以及ESI-HRMS进行了结构表征,确证结构与目标产物一致。结论:该方法具有较好的实用性,能用于灯盏乙素苷元4'-烟酸酯的制备。
- 徐青云傅晓钟杨果董永喜刘影查雨锋兰燕宇王永林郑林
- 关键词：前药烟酸
