葛新杰
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 人N端前脑钠肽ELISA定量检测方法的建立及初步应用
- 2015年
- 建立一种检测人血清中N端前脑钠肽含量的双抗体夹心ELISA方法。采用配对人N端前脑钠肽抗体,通过对其包被条件与封闭条件、包被与酶标抗体工作浓度、反应模式、线性范围、批内批间精密性、回收率、干扰因子试验、临床标本检测等研究,建立人N端前脑钠肽ELISA定量检测方法并评价其性能。实验确定了最适包被抗体稀释用缓冲液为0.05mol/L pH9.6CB,温度及时间为4℃18h;最适封闭液为0.6%BSA,温度及时间为4℃18h;包被抗体最适浓度为4μg/ml,酶标抗体最佳浓度为1∶3000;最佳反应模式为37℃样本孵育30min,酶标二抗孵育30min,显色20min的两步法反应模式。性能评价显示建立的检测方法线性范围为50~500pg/ml,批内及批间精密度分别为2.3%和3.4%。高、中、低值回收率分别为101.2%、97.2%、93.7%。干扰因子试验结果显示黄疸、脂血及低浓度溶血对试验结果无较大影响,但标本随溶血程度的增加其影响程度也增大。共做了248份临床血清,200份用来评价试剂盒的临床使用性能,结果显示总体符合率为96.9%,说明可用于临床心衰患者的检测;同时与国外试剂盒对比检测48份临床血清,结果显示两者相关性较好,回归方程：Y=0.8017X＋188.3,R2=0.9027。初步建立了一种检测人血清中N端前脑钠肽含量的ELISA方法,该方法具有较高的准确性和精密度。
- 王云龙葛新杰王翠李玉林王继创程蕾
- 关键词：ELISA
- NT-proBNP单克隆抗体的研制及ELISA定量检测方法的建立
- 目的：心衰是导致多数心脏病人死亡的最终发展阶段，严重影响了患者的生命健康。因此，如何在心衰发病的早期及时诊断、指导临床医生尽早开展抗心衰的治疗一直是人们研究的热点。研究发现：N端前脑钠肽（NT-proBNP）是判定心衰进...
- 葛新杰
- 关键词：单克隆抗体酶联免疫反应心衰
- 文献传递
- 用于定量ELISA方法的抗人β2微球蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的制备抗人β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)特异性单克隆抗体并建立其双抗体夹心定量ELISA免疫检测方法。方法以高纯度的人β2-MG作为免疫原,采用常规免疫和脾内免疫相结合的方法免疫纯系Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗人β2-MG单克隆抗体并鉴定,以此为基础建立双抗体夹心ELISA检测方法。结果制备出5株稳定分泌抗人β2-MG的单克隆抗体,经鉴定5株单抗皆为IgG1类,均为β2-MG抗原特异性抗体。经抗体配对试验筛选出1对可用于ELISA检测的配对抗体,建立了定量ELISA检测方法。结论制备出抗人β2-MG单克隆抗体并建立了双抗体夹心定量ELISA免疫检测方法,与国外试剂盒检测结果相关性良好。
- 王云龙毛烈李玉林王继创程蕾葛新杰邓黎黎
- 关键词：Β2微球蛋白单克隆抗体双抗体夹心ELISA
