张红
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：黄石普仁医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- AlphaLISA法检测乙型肝炎病毒X蛋白方法学的建立被引量：1
- 2014年
- 目的建立新型的均相检测技术AlphaLISA(Amplifed Luminescent Proximity Homogeneous Assay)法,检测原发性肝细胞癌(Hepatocelluar carcinoma,HCC)病人石蜡包埋切片组织(Formalin-fixed and paraffin-embedded tissue,FFPE)中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)。方法采用针对HBx蛋白不同表位的两种单克隆抗体X36C和3F6-G10,将其中一种抗体X36C与受体微珠(Acceptor Beads)连接,另一种抗体3F6-G10生物素化,再将HCC病人FFPE总蛋白提取液、供体微珠(Donor Beads)及上述两种处理后的抗体在23℃共同孵育90min后,用EnSpire2300多功能酶标仪检测信号值。结果 FFPE蛋白提取液检测信号值为4667,HBx蛋白标准品检测信号值为3606;FFPE蛋白提取液样本对照、试剂对照1(Bio-3F6-G10+Acceptor-X36C+Donor Beads)、试剂对照2(buffer)的信号值分别为5、823、79;当生物素化抗体浓度为0.1625nM时,HBX检测信号达到最大峰值,即AlphaLISA出现Hooking Effect;AlphaLISA法检测HBX阈值下限为5pg。结论本实验成功建立了AlphaLISA法,用于检测HCC病人FFPE中的HBX。实验操作过程简单快捷,敏感性高于传统的ELISA技术。
- 刘颖娟夏维刘松梅沈璠周新张红
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白原发性肝细胞癌
- 2型糖尿病患者线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性的临床观察被引量：1
- 2016年
- 目的 建立外周血淋巴细胞线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性的检测方法,观察T2DM患者线粒体呼吸链复合体工活性是否发生改变。方法 收集T2DM患者47例（T2DM组）和健康体检者38名（NC组）临床资料和实验室检查结果。差速离心法分离线粒体,并利用透射电镜观察证实。反复冻融破线粒体膜,酶标仪检测氧化型葵基泛醌（DB）在272~247 nm波长处吸光度（OD）的变化。结果 从外周血淋巴细胞中成功地提取了线粒体,线粒体蛋白质浓度为（0.03010±0.01589）mg/ml,272~247 nm波长的△OD在1 min内随着时间的延长呈增加趋势,且T2DM组复合体Ⅰ活性低于NC组[（16.51±5.45）vs（24.37±8.45）nmol/（min·mg）,P=0.026]。结论 成功建立检测外周血淋巴细胞线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性动力学的方法。线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性的改变可能与T2DM发病相关。
- 杨迎夏维庞志宇张红邓浩华刘松梅
- 关键词：酶活性
