张凤娇
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- ThMYB3和ThDof2对ThVHAc1基因表达的调控被引量：3
- 2015年
- ThVHAc1基因能响应干旱、盐、重金属等胁迫诱导,该基因能有效提高转ThVHAc1基因酵母的多种抗逆能力。为进一步研究ThVHAc1基因的抗逆调控机理,本研究利用酵母单杂交技术钓取ThVHAc1可能的上游调控因子,并利用基因枪瞬时共转化技术进行初步验证。酵母单杂交结果显示,ThMYB3基因能识别ThVHAc1基因上游MYB顺式作用元件和含有MYB元件的启动子片段。ThDof2基因能识别ThVHAc1基因上游DOF顺式作用元件和含有DOF元件的启动子片段。但ThMYB3和ThDof2均不能识别突变后的元件及含对应突变元件的启动子片段。将ThMYB3和ThDof2分别构建成效应载体,各元件、突变元件、启动子片段及突变的启动子片段分别构建报告载体进行共表达验证。结果发现:效应载体ThMYB3和含MYB元件及含MYB元件的ThVHAc1启动子片段的报告载体,ThDof2和含DOF元件及含DOF元件的ThVHAc1启动子片段的报告载体瞬时共表达烟草叶片能观察到GUS染色,且GUS活性较高;而与相应突变元件及片段的共转化则观察不到烟草叶片的GUS染色,且GUS活性很低。说明只有非突变的元件和启动子片段才能与效应载体进行互作识别,激活GUS基因的表达,验证了酵母单杂交获得的上游调控基因的识别特异性。表明ThMYB3和ThDof2可能通过与相应启动子元件的结合调控ThVHAc1基因。
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- 关键词：刚毛柽柳酵母单杂交启动子
- 7个柽柳ThMYB基因的鉴定及表达被引量：2
- 2014年
- 通过对盐胁迫不同时间点柽柳根和叶组织的7个转录组数据进行分析，鉴定了7条MYB基因（命名为ThMYB1～ThMYB7），这些基因编码蛋白氨基酸残基数为206～918 aa，编码蛋白的相对分子质量为22．9～75．9，理论等电点为5．06～9．71。进一步分析了7个ThMYB基因在盐碱胁迫（0．3 mol·L-1NaHCO3）不同时间点柽柳不同组织中的表达谱，结果表明：尽管这7个ThMYB蛋白长度差异较大、同源性较低，但除ThMYB7外的其他7个ThMYB基因的表达均受盐碱胁迫调控，能对盐碱胁迫作出应答。
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- 关键词：柽柳盐胁迫表达谱MYB转录因子
- 刚毛柽柳TheIF1A基因的互作蛋白及其表达模式分析
- 2015年
- 翻译起始因子是一类翻译起始所必需的特异蛋白因子,前期研究表明柽柳翻译起始因子(The IF1A)基因能对外界盐和干旱等非生物胁迫做出响应,且过表达The IF1A基因能提高酵母和烟草的抗旱耐盐能力。为进一步研究The IF1A基因的抗逆机制,本研究通过酵母双杂交对柽柳翻译起始因子(The IF1A)基因的互作蛋白进行了筛选,共获得5个互作蛋白,分别为RNA聚合酶βII亚基(RNA polymerase beta II subunit)、ATP合成酶CF1α亚基蛋白(ATP synthase CF1 alpha subunit protein)、细胞色素b6/f复合物亚基IV(cytochrome b6/f complex subunit IV)、核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶小亚基蛋白(ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit)和组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase)。利用实时荧光定量PCR对这5个蛋白基因及The IF1A基因在盐和干旱胁迫处理下的表达模式进行分析,结果表明:这些蛋白基因在盐和干旱胁迫下的表达模式与The IF1A基因基本一致,表明The IF1A可能通过与这些蛋白相互作用来参与逆境胁迫应答。为进一步研究The IF1A基因的抗逆机理奠定了基础,有利于完善林木抗逆机制的研究,并为通过基因工程手段提高林木抗逆性提供了候选基因。
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- 关键词：刚毛柽柳酵母双杂交植物抗逆性
- 刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用
- 刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用，涉及一种Dof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用。本发明的目的在于提供一种刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用。ThDof基因序列如序列表中SE...
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- 文献传递
- 不同长度ThVHAc1基因启动子片段分离及活性分析被引量：2
- 2016年
- [目的]VHAc基因(V-ATPase c亚基)是V-ATPase的重要亚基,能响应盐、重金属等胁迫,过表达刚毛柽柳ThVHAc1基因的酵母能提高抗CdCl_2耐NaCl能力。本研究拟通过分离ThVHAc1基因不同长度启动子片段并对其胁迫后活性进行分析,以进一步探讨ThVHAc1基因响应CdCl_2和NaCl胁迫的机制。[方法]根据ThVHAc1基因启动子中含有的Dof顺式作用元件的分布,将ThVHAc1基因上游启动子分为205 bp(-1—-205),504 bp(-1—-504)和781 bp(-1—-781)3个不同长度片段。将这些不同长度启动子片段分别替换p CAMBIA1301载体上的CaMV35S启动子,以驱动GUS基因表达,构建植物表达载体,利用农杆菌介导法转化拟南芥。对4周龄的T4代转基因拟南芥分别进行H_2O(非胁迫处理,对照)、100 mmol·L^(-1)NaCl和150μmol·L^(-1)CdCl_2胁迫处理,比较不同转基因株系的GUS染色和GUS酶活性。[结果]正常生长条件下,CaMV35S株系在根、茎、叶中均有GUS染色;3个启动子片段转基因株系均能在不同组织观察到GUS染色,且在根、茎、叶中有一定差异,但整体上GUS酶活性表现为781>504>205。NaCl胁迫下,CaMV35S株系的GUS染色及酶活性与正常生长条件相比无明显变化,但3个启动子片段转基因株系的GUS染色及酶活性均显著降低,且781株系的GUS酶活性分别为205和504株系的2.73和2.07倍;同时,3个启动子片段转基因株系的组织表达特性发生了一些改变,如,504株系在老叶中表达明显增强,嫩叶中减弱,根中无明显变化。CdCl_2胁迫下各转基因株系的GUS染色和酶活性变化趋势与NaCl胁迫相似。CdCl_2胁迫下,205,504,781株系的GUS酶活性分别为非胁迫时的52.4%,57.9%和80.9%;胁迫后的组织表达活性也发生了一些改变,205株系的GUS染色在老叶较深、嫩叶较浅,504株系则在各部分的表达较均匀,781株系大多叶片的GUS表达减弱;但781株系的GUS酶活性仍然最高,分别为205和504株系的2.67和2.07倍。[结论]ThVHAc1基因启动�
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- 关键词：刚毛柽柳拟南芥启动子NACL胁迫
- 盐胁迫下TheIF1A基因启动子表达特性分析
- 2015年
- 为探讨刚毛柽柳真核翻译起始因子1A(The IF1A)基因对植物逆境胁迫响应的调控作用,对The IF1A基因启动子盐胁迫下的应答表达情况进行分析,比较转The IF1A基因启动子拟南芥在不同浓度盐胁迫及不同时间后GUS染色和酶活差异。结果显示:The IF1A启动子在短时间内即对400 mmol/L Na Cl胁迫做出应答,主要表现为表达受抑制,各组织中老叶的GUS酶活性最高;100mmol/L Na Cl胁迫下,The IF1A启动子活性也被明显抑制,胁迫20 h后,GUS酶活性恢复到较高水平,各组织中,根中的活性最低。研究表明,The IF1A启动子的表达能对盐胁迫作出应答,但在低盐和高盐胁迫下的应答方式存在一定的差异性。
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- 关键词：刚毛柽柳盐胁迫
- 过表达ThVHAc1对拟南芥V-ATPase各亚基表达的影响被引量：1
- 2015年
- V-ATPase是多亚基复合蛋白,其c亚基负责V-ATPase的组装及质子通道的形成。本研究拟分析盐胁迫下过表达Th VHAc1基因拟南芥V-ATPase各亚基的表达,探讨过表达外源c亚基对拟南芥V-ATPase全酶响应盐胁迫表达模式的影响。实时荧光定量PCR结果显示,盐胁迫下,过表达外源Th VHAc1拟南芥V-ATPase 28个亚基的表达发生了明显改变,且拟南芥5个c亚基的表达均不同程度的被抑制。表明外源Th VHAc1基因能影响拟南芥V-ATPase各亚基的表达以调节V-ATPase全酶的活性,但各亚基的表达模式与V-ATPase活性非简单对应关系,各亚基互相协调决定V-ATPase活性。
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- 关键词：刚毛柽柳C亚基V-ATPASE
- 拟南芥AtDof2.3基因抗逆功能研究
- Dof转录因子是一类高等植物中所特有的转录因子,几乎所有植物中都有发现。Dof转录因子在植物体生长发育过程中具有多种调控功能,如:光信号的传导、激素调节、种子的萌发与生长、植物的抗逆调控等。目前对于Dof转录因子功能研究...
- 张凤娇
- 关键词：拟南芥非生物胁迫
- 文献传递
- 刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用
- 刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用，涉及一种Dof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用。本发明的目的在于提供一种刚毛柽柳ThDof基因、其编码蛋白及其启动子序列和应用。ThDof基因序列如序列表中SE...
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