孙慧莹
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种人工合成的阳离子肽及其在制备抗肿瘤药物中的用途
- 本发明公开了一种人工合成的阳离子肽(命名为AIK)及其在制备抗肿瘤药物中的用途，本发明的阳离子肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。研究表明AIK对各种实体肿瘤细胞，特别是白血病细胞、肺巨细胞癌细胞，腹水性肝癌细...
- 周春水范芳芳徐晖孙慧莹傅松滨白静刘佳玮张海员宁雪莲李亦兰
- 文献传递
- 新人工阳离子多肽AIK抗肿瘤活性的初步研究被引量：1
- 2014年
- 目的:研究新发现的人工阳离子多肽AIK在体内外对肿瘤细胞的抑制作用和杀伤机制。方法:MTS方法检测AIK对急性早幼粒白血病细胞HL-60的抑制作用,确定AIK最佳作用浓度及作用时间,并以此条件测定其对10株人肿瘤细胞(95C、95D、HL-60、He La、B95-8、HO-8910PM、HO-8910、SMMC-7721、U2OS和A549细胞)及人正常肝细胞HL-7702的抑制效应。流式细胞术检测AIK对宫颈癌He La细胞凋亡的影响,并经DAPI染色后荧光显微镜下观察细胞的形态学变化。制备小鼠荷肝癌H22细胞皮下移植瘤模型,将36只模型小鼠随机分为PBS阴性对照组、AIK低剂量组[8 mg/(kg·d)]、高剂量组[15 mg/(kg·d)]以及MTX阳性对照组[1 mg/(kg·d)],给予连续10 d瘤旁注射治疗,记录小鼠体质量并观察其活动状态;用药结束后,脊椎脱臼法处死小鼠,比较肿瘤质量及体积。结果:AIK对10种肿瘤细胞均有不同程度的杀伤活性,600μg/ml AIK作用24 h后对肺巨细胞癌95C、白血病HL-60和宫颈癌Hela细胞生长的抑制分别达(90.33±0.75)%、(89.06±1.28)%和(76.09±3.68)%。AIK处理组He La凋亡细胞[(4.88±0.57)%vs(0.51±0.19)%,P<0.05]及坏死细胞比例[(2.96±0.50)%vs(1.87±0.27)%,P<0.05]均显著高于对照组,400μg/ml AIK处理组50%以上的H22细胞出现胞膜破碎、细胞裂解等坏死表型。AIK高剂量组、低剂量组和MTX阳性对照组的移植瘤体积和质量均显著低于PBS阴性对照组(P<0.01)。4组小鼠体质量在治疗期间没有显著差异,但MTX组小鼠体质量在治疗第5天开始出现下降,其余3组在药物处理期间呈上升趋势。结论:AIK能够抑制多种肿瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡和坏死;显著抑制肝癌H22细胞小鼠皮下移植瘤的生长,无明显不良反应。
- 范芳芳徐晖孙慧莹刘佳玮张海员李亦兰宁雪莲白静傅松滨周春水
- 关键词：肿瘤细胞凋亡细胞坏死
- 重组阳离子抗肿瘤肽AIK的原核表达、纯化及活性测定被引量：5
- 2015年
- 利用Gateway克隆技术构建重组抗瘤肽AIK的原核表达体系,建立表达及纯化重组AIK的最优条件,为深入研究和利用AIK奠定基础。首先,设计含AttB重组位点的引物,通过重叠PCR技术扩增出Att B-TEV-FLAG-AIK序列,利用BP重组反应将目的序列TEV-FLAG-AIK克隆到供体载体pDONR223中,构建入门载体,再通过LR重组反应,将目的序列转移到目的载体pDEST15中,构建GST-AIK融合蛋白原核表达质粒。随后,在BL21(DE3)工程菌中优化诱导融合蛋白表达的条件。以谷胱甘肽磁珠纯化GST-AIK融合蛋白,再以rTEV酶切除GST,获得FLAG-AIK重组蛋白。最后以MTS法检测FLAG-AIK对白血病细胞HL-60的细胞毒性。菌液PCR验证和测序分析表明成功构建了重组抗瘤肽AIK的入门质粒和原核表达质粒。在BL21(DE3)工程菌中实现了GST-AIK融合蛋白的高效可溶性表达。并测得在37℃下以0.1 mmol/L IPTG诱导工程菌(OD600=1.0)4 h,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的30%以上。经GST亲和层析、rTEV酶切除GST标签及二次GST亲和层析获得纯度高于95%的FLAG-AIK蛋白。MTS法测得所制备的FLAG-AIK蛋白抑瘤活性与化学合成的AIK相当。总之,本课题应用Gateway克隆系统成功构建了抗瘤肽AIK的原核表达质粒,实现了GST-AIK融合蛋白的高效可溶性表达,经亲和层析获得了有生物活性的重组AIK多肽,为后续深入研究和大规模制备奠定了基础。
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- 关键词：位点特异性重组GST融合蛋白抑瘤活性
- 一种人工合成的阳离子肽及其在制备抗肿瘤药物中的用途
- 本发明公开了一种人工合成的阳离子肽(命名为AIK)及其在制备抗肿瘤药物中的用途，本发明的阳离子肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。研究表明AIK对各种实体肿瘤细胞，特别是白血病细胞、肺巨细胞癌细胞，腹水性肝癌细...
- 周春水范芳芳徐晖孙慧莹傅松滨白静刘佳玮张海员宁雪莲李亦兰
- 文献传递
- 翻译控制肿瘤蛋白在肿瘤靶向治疗中的分子作用机制及应用被引量：2
- 2015年
- 翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）是一种在多种生物中高度保守的小分子蛋白。TCTP在多种肿瘤细胞中高表达，已被证明参与调控细胞凋亡、DNA损伤与修复和耐药性形成等多种复杂功能。近年来，随着TCTP相关的分子作用机制不断被揭示，TCTP已成为肿瘤靶向治疗中的新型重要药物靶点。
- 韩玉婧李亦兰宁雪莲孙慧莹周春水
- 关键词：DNA损伤抗药性肿瘤
- 抗PDCD4抗体在制备预测紫杉醇或其衍生药物个体化用药敏感性的检测试剂中的应用
- 本发明公开了抗PDCD4抗体在制备预测紫杉醇或其衍生药物个体化用药敏感性的检测试剂中的应用，本发明应用定量蛋白组学技术分析紫杉醇处理肿瘤细胞中全细胞蛋白质丰度的变化，发现紫杉醇下调PDCD4的表达水平，且肿瘤细胞对紫杉醇...
- 周春水张海员刘佳玮傅松滨白静徐晖孙慧莹范芳芳李亦兰刘宝刚刘通高民戴绍春宁雪莲孙悦
- 文献传递
