袁小芬
- 作品数：9 被引量：34H指数：3
- 供职机构：山东省医学科学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- VPA增强ORI诱导HL-60细胞凋亡及机制研究
- 2014年
- 目的：探讨VPA与冬凌草甲素（oridonin，ORI）联合诱导HL-60细凋亡的作用及其机制。方法：CCK-8法选取ORI和VPA最佳协同作用剂量；VPA和ORI单独或联合作用于HL-60细胞后，Hoechst33342染色后荧光显微镜下观察细胞核形态学变化；Western blot检测凋亡相关基因caspase-3剪切片段的蛋白表达；预先加入或不加入caspase抑制剂处理HL-60细胞，采用Annexin V／PI流式试剂盒检测两药联合后细胞凋亡的变化。结果：Hoechst33342染色后荧光显微镜下，ORI＋VPA组比单独用药纽核碎裂数目明显增多；ORI和VPA单独作用组caspase-3活性片段表达较对照组高但均不如ORI＋VPA组明显；ORI＋VPA组细胞凋亡率（16．7±2．0）％。与对照组（1．2±1．5）％相比，具有显著差异（P〈0．05）；预先加入caspase抑制剂组细胞几乎没有凋亡，与对照组相比，不具有显著差异（P〉0．05）。结论：VPA确实能增强冬凌草甲素诱导HL-60细胞凋亡，且凋亡机制与caspase凋亡通路密切相关。
- 史美燕任霞袁小芬禹林昌李霞姜国胜毕可红
- 关键词：VPA冬凌草甲素HL-60细胞凋亡
- 白血病的分化中PADI4与信号通路的关系机制研究
- 禹林昌宋冠华史美燕袁小芬姜国胜
- 关键词：HL-60分化PADI4磷酸化P42/44
- EvI1靶向干预Smad3在白血病细胞分化为单核/巨噬细胞中的作用机制研究
- 目的:探讨白血病细胞定向单核/巨噬细胞分化过程中EVI1的表达与作用,及其是否通过招募CtBP和HDAC靶向调控SMAD3而影响该定向分化过程。方法:以CCK8实验测定靶细胞增殖情况,并选取最佳佛波酯(PMA)药物诱导浓...
- 田静袁小芬任霞韩杨张之勇郭强李莲莲张晓瑜张振姜国胜
- 关键词：HDAC1SMAD3K562细胞
- 文献传递
- 黄芩苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡影响机制研究被引量：11
- 2015年
- 目的观察黄芩苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法不同浓度(5、10、20、40、80和160μg/mL)的黄芩苷作用于人宫颈癌HeLa细胞24、48和72h后,采用CCK-8法检测黄芩苷对HeLa细胞增殖的影响;40μg/mL黄芩苷作用于HeLa细胞24h后,采用普通光学显微镜观察细胞形态学变化,Hoechst 33342染色后在荧光倒置显微镜下观察细胞核形态学改变;AnnexinⅤ/PI双染后采用流式细胞术检测细胞凋亡的改变;蛋白质印迹法检测Caspase家族中Caspase-3、-8、-9蛋白表达变化。结果黄芩苷可明显抑制HeLa细胞增殖,随时间延长及剂量增加,细胞增殖抑制率也明显升高,P<0.05;经40μg/mL黄芩苷处理24h的HeLa细胞明显变小、变圆、且有凋亡小体产生,细胞核固缩、碎裂,呈现典型的凋亡形态学改变;40μg/mL黄芩苷处理HeLa细胞24、48h后细胞早期凋亡率分别为(10.5±1.5)%、(21.8±2.4)%,与对照组的(1.3±0.9)%相比,差异均有统计学意义,P<0.05;蛋白质印迹检测法结果表明,黄芩苷处理后Caspase-3蛋白由0.09上调至0.65,Caspase-8蛋白由0.04上调至1.22,Caspase-9蛋白由0.12上调至1.10,提示剪切片段蛋白的表达呈上调趋势。结论黄芩苷可抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与激活Caspase相关。
- 刘峰俞勇禹林昌张之勇张之勇袁小芬任霞袁小芬
- 关键词：黄芩苷宫颈癌增殖凋亡HELA细胞CASPASES
- 厚朴酚对HL-60细胞增殖和凋亡的作用及分子机制研究被引量：9
- 2016年
- 目的:探讨厚朴酚对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度厚朴酚(5、10、20、40、80和160μg/ml)作用于HL-60细胞24 h和48 h后的细胞增殖情况;应用光学显微镜检观察细胞形态学的变化;DAPI染色后在荧光显微镜下观察细胞核形态学变化;用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡的改变;用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测BCL-2和BAX的mRNA水平;用Western blot检测caspase家族蛋白表达变化。结果:厚朴酚能够明显抑制HL-60细胞的增殖,并随时间延长及剂量增加,细胞增殖抑制率也明显升高(P<0.05);HL-60细胞经厚朴酚处理后体积明显变小、且有凋亡小体产生,细胞核固缩、碎裂,呈现典型的凋亡形态学改变;40μg/ml厚朴酚处理HL-60细胞24 h后细胞早期凋亡率为(11.7±2.4)%,与对照组(1.4±1.1)%相比具有显著统计学差异(P<0.05);RT-PCR检测结果表明,厚朴酚可上调BAX、下调BCL-2的mRNA表达;Western blot检测结果表明,厚朴酚可提高caspase-3、caspase-8和caspase-9的剪切片段表达。结论:厚朴酚对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖具有较明显的抑制作用,并可诱导HL-60细胞凋亡,其机制与caspase激活、促进BAX蛋白表达以及抑制BCL-2蛋白表达相关。
- 方柯袁小芬廖琼张之勇宋冠华郭强任霞姜国胜
- 关键词：厚朴酚细胞增殖HL-60细胞
- 白血病细胞诱导分化过程中nm23-H1表达变化及其分子调控机制被引量：3
- 2017年
- 目的 探讨在白血病细胞HL-60分化过程中nm23-H1、c-Myc、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）的作用机制及相互关系,为临床治疗提供理论依据和治疗靶点.方法 CCK-8实验测定全反式维甲酸（ATRA）作用下的靶细胞增殖情况,瑞士-吉姆萨染色观察细胞形态学变化.反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）或Western blotting测定nm23-H1、c-Myc和G-CSF的基因、蛋白表达水平.酶联免疫吸附试验（ELISA）测定ATRA诱导HL-60细胞分化过程中培养上清G-CSF水平的变化.结果 分别使用药物浓度为0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 μmol/L的ATRA诱导HL-60细胞72 h,细胞增殖抑制率分别为（43.00±0.08）%、（49.55±2.30）%、（58.90±6.70）%、（64.60±4.70）%、（72.70±3.20）%,差异有统计学意义（F=69.887,P=0.000）.在ATRA诱导下,细胞形态学证实HL-60细胞向成熟粒细胞方向分化.nm23-H1的mRNA相对表达量由0.79±0.03逐渐降低到0.52±0.09,差异有统计学意义（F=9.679,P=0.002）,蛋白相对表达量由1.54±0.12逐渐降低到0.40±0.04,差异有统计学意义（F=90.140,P=0.000）.c-Myc的mRNA相对表达量由0.95±0.05逐渐降低到0.46±0.05,差异有统计学意义（F=27.900,P=0.000）,蛋白相对表达量由1.12±0.11逐渐降低到0.14±0.03,差异有统计学意义（F=115.500,P=0.000）.而G-CSF的mRNA相对表达量由0.26±0.07逐渐升高到0.55±0.09,差异有统计学意义（F=7.817,P=0.004）,细胞分泌水平由（13.67±7.51）pg/ml逐渐升高到（128.30±25.77）pg/ml,差异有统计学意义（F=28.020,P=0.000）.结论 nm23-H1可能通过与c-Myc和G-CSF相互作用而发挥其诱导白血病HL-60细胞分化的作用.
- 田静袁小芬韩杨任霞张之勇郭强李莲莲张晓瑜张振李霞姜国胜
- 关键词：白血病细胞分化粒细胞集落刺激因子
- 白血病细胞诱导分化过程中nm23-H1表达变化及分子调控机制的研究
- 白血病是世界范围内常见血液系统的恶性克隆性疾病（HM），尤其是在青少年中的发病率和致死率较高，目前大部分仍无法治愈，临床化疗放疗或者药物诱导并不能完全使患者康复痊愈率低。白血病是由于造血细胞的某一系列或者是某一白细胞前体...
- 袁小芬
- 关键词：THP-1细胞白血病诱导分化NM23-H1表达
- 全反式维甲酸诱导HL60细胞分化分子机制探讨被引量：1
- 2015年
- 目的探讨全反式维甲酸(alltrans retinoic acid,ATRA)诱导HL-60细胞分化过程中PADI4的变化与作用机制。方法 ATRA诱导HL-60细胞24、48、72和96h后,采用Wright-Gimesa染色观察细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的表达变化;采用RT-PCR分析PADI4在基因水平的表达趋势,蛋白质印迹法检测PADI4在蛋白水平的表达变化;RNAi技术干扰PADI4后流式细胞仪检测CD11b变化,蛋白质印迹法检测PADI4、p42/44、p65、p105和p55等蛋白水平变化。结果 HL-60细胞经ATRA诱导后与对照组相比,Wright-Gimesa染色显示核质比明显减小,核有凹陷及分叶,杆状核、分叶核现象明显增多。流式细胞术检测结果显示,细胞表面分子CD11b表达由2.1%升高到48.9%,升高了346.8%,t=411.51,P<0.01;RT-PCR结果显示,PADI4在mRNA水平表达随时间延长逐渐升高,F=318.046,P<0.001,r=0.595;PADI4与内参基因GAPDH灰度值的比值从0.122±0.033升高到0.464±0.077,差异有统计学意义,F=16.002,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,PADI4在蛋白水平表达随时间延长逐渐升高,F=16.002,P<0.001,r=0.873;PADI4与内参GAPDH灰度值的比值分析从0.077±0.045升高到0.263±0.095,差异有统计学意义,F=221.8,P<0.000 1。蛋白质印迹法检测结果显示,P-p44/42与内参GAPDH灰度值的比值分析从0.470±0.023下降到0.320±0.012,差异有统计学意义,F=92.942,P<0.001。结论 ATRA诱导HL-60细胞定向粒系分化的过程中,PADI4促进HL-60细胞向粒系分化,而且PADI4可能是通过促进MAPK信号通路中的p42/44磷酸化而发挥作用。
- 禹林昌宋冠华张之勇史美燕袁小芬任霞郭强姜国胜
- 关键词：HL-60PADI4磷酸化P42/44
- 异补骨脂素对HL-60细胞增殖和凋亡影响及其机制探讨被引量：11
- 2015年
- 目的异补骨脂素可抑制多种肿瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡,但是异补骨脂素对白血病细胞是否亦具有同样的作用却不明确。本研究旨在探讨异补骨脂素对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用MTT法检测不同浓度异补骨脂素(10、20、40、80和160μg/mL)作用于HL-60细胞24和48h后对HL-60细胞的增殖抑制作用;光镜观察细胞形态学变化;Annexin V/PI双染后采用流式细胞术检测细胞凋亡的改变;流式细胞术检测细胞周期的变化;分别采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Bcl-2家族Bcl-2和Bax的mRNA水平和蛋白水平表达变化。结果异补骨脂素对HL-60细胞的增殖具有明显的抑制作用,并呈现时间-剂量依赖性。10、20、40、80和160μg/mL异补骨脂素处理24h后,HL-60细胞的抑制率分别为(5.5±4.5)%、(13.7±3.1)%、(20.4±1.9)%、(35.3±5.5)%和(51.7±2.1)%,F=1 465.33,P<0.001;48h后对HL-60细胞的抑制率分别为(21.7±3.2)%、(34.6±5.6)%、(43.3±1.2)%、(61.4±8.76)%和(84.7±4.4)%,F=146.33,P<0.05,差异均有统计学意义。经异补骨脂素处理的HL-60细胞体积明显变小、且有凋亡小体产生,呈现典型的凋亡形态学改变;40μg/mL异补骨脂素处理HL-60细胞24h后细胞早期凋亡率为(16.6±2.7)%,与对照组的(2.8±1.5)%相比,差异有统计学意义,P<0.05;异补骨脂素不引起细胞周期阻滞,G0/G1期前出现典型亚二倍体凋亡峰。RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果表明,异补骨脂素可上调Bax、下调Bcl-2的mRNA水平和蛋白水平表达。结论异补骨脂素可抑制人急性髓系白血病HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制与促进Bax蛋白表达和抑制Bcl-2蛋白表达相关。
- 袁小芬孙亚梅张之勇李翠玲郭强宋冠华史美燕禹林昌任霞姜国胜
- 关键词：急性髓系白血病异补骨脂素细胞增殖HL-60细胞流式细胞术
