陈焱
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：解放军第401医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 纳米纤维仿生支架可诱导iPSC向心肌细胞分化
- 2018年
- 目的利用诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)与纳米纤维仿生支架构建人工心肌,探讨纳米纤维支架用于诱导多能干细胞心肌特异性分化的可行性及潜在作用,为构建组织工程心肌提供参考。方法采用静电纺丝技术制作聚己内酯/明胶复合纳米纤维仿生支架,接种鼠源Oct4-GFP+iPSCs培养分化15 d。鼠源Oct4-GFP+iPSCs同样接种于组织培养皿,培养分化15 d作为对照组。免疫荧光染色检测心肌细胞特异性标志物,流式细胞计数统计心肌细胞分化效率。结果 Oct4-GFP+iPSCs能够在聚己内酯/明胶复合纳米纤维仿生支架上正常增殖、分化;培养15 d后,Oct4-GFP+iPSCs在支架上分化出心肌细胞特异性标志物cTnT/MLC2a双染阳性的心肌细胞;而且支架组心肌细胞分化效率显著高于对照组(P<0.05)。结论聚己内酯/明胶纳米纤维仿生支架支持iPSCs增殖,且能够促进其向心肌细胞分化,适用于组织工程心肌构建。
- 刘雄涛陈焱曾迪李军廉诚郑强荪
- 关键词：诱导多能干细胞细胞分化心肌细胞
- 静电纺丝聚己内酯纳米纤维支架支持小鼠诱导多能干细胞表达心肌细胞标志物被引量：3
- 2016年
- 目的利用多能干细胞与仿生材料支架构建人工心肌,探讨仿生材料支架本身对多能干细胞心肌特异性分化的直接作用,为构建组织工程心肌提供理论支持。方法采用静电纺丝聚己内酯纳米纤维仿生支架,接种小鼠i PSCs(mi PSCs)细胞培养分化15 d,免疫荧光染色与Western blot法检测多能干细胞与心肌细胞特异性标志物。结果mi PSCs特异性表达多能干性标志物Oct4和Nanog,而且能够在聚己内酯纳米纤维支架上集落样增殖、分化;培养15 d后,mi PSCs在支架上分化出心肌特异性标志物c Tn T和MLC2a双重免疫荧光染色阳性的细胞;心肌细胞特异性结构蛋白c Tn T、α-MHC和MLC2的表达水平,支架组全面高于对照组。结论聚己内酯纳米纤维仿生支架支持mi PSCs生长与心肌细胞特异性分化。
- 陈焱何顺舟李晓莉曾迪丁璐谢江徽季滨龙郑强荪
- 关键词：诱导多能干细胞聚己内酯心肌细胞
- 聚己内酯静电纺丝纳米纤维支架用于小鼠诱导多能干细胞培养被引量：6
- 2015年
- 干细胞联合生物支架材料体外构建功能性组织与器官,成为当前组织再生研究的重要策略,而探求具有良好生物相容性的支架材料是其关键.本研究采用扫描电镜、噻唑蓝(MTT)法、荧光显微染色等方法检测小鼠诱导多能干细胞(murine induced pluripotent stem cells,mi PSCs)在聚己内酯(polyε-caprolactone,PCL)静电纺丝纳米纤维支架上的粘附、增殖等生物学特性,探究聚己内酯纳米纤维支架与mi PSCs的生物相容性.结果显示,mi PSC在PCL纳米纤维支架上具有良好粘附性并呈集落样生长,其增殖能力及干性标记物(Oct4-GFP+)的表达均不亚于标准对照组;扫描电镜显示,mi PSC在PCL纳米纤维支架材料上呈现出绒毛状突起的表面结构.上述结果表明,PCL纳米纤维支架可促进mi PSCs的粘附、自我增殖以及干性维持,两者具有良好的生物相容性,为下一步联合生物支架材料与干细胞构建功能性组织奠定了基础.
- 陈焱曾迪丁璐李晓莉谢江徽郑强荪
- 关键词：诱导多能干细胞静电纺丝聚己内酯
- microRNA-1和microRNA-133参与小鼠诱导多能干细胞向心肌的分化被引量：2
- 2015年
- 目的研究microRNA-1(miRNA-1)和microRNA-133(miRNA-133)对小鼠诱导多能干细胞(mi PSCs)向心肌分化的影响。方法 RT-PCR分析mi PSC分化过程中microRNA-1和microRNA-133的表达变化;microRNA-1和micro-133反义寡核苷酸转染mi PSCs,增强miRNA-1和miRNA-133表达;并按照转染分子的不同,将细胞分为对照组(添加miRNA-U6)、miRNA-1组、miRNA-133组和miRNA-1+miRNA-133组。RT-PCR、q-PCR和免疫荧光化学染色检测miRNA转染并诱导mi PSCs分化后,各组细胞内miRNA-1和miRNA-133的表达变化以及心肌细胞相关特异性基因和蛋白的变化。结果 mi PSCs心肌分化过程中miRNA-1,miRNA-133的表达具有差异性,均在后期有显著增高(P<0.01);在分化过程中单独过表达miRNA-1和miRNA-133对心肌的分化并未有促进作用,但共表达miRNA-1和miRNA-133后,却显著增加心肌细胞的搏动数量和心肌基因的表达,并且促进了心肌细胞成熟。结论 miRNA-1和miRNA-133通过协同作用促进mi PSCs体外分化为心肌细胞,显著提高mi PSC向心肌细胞定向分化效率。
- 丁璐李晓莉曾迪陈焱欧东波魏婷郑强荪
- 关键词：MICRORNA诱导性多能干细胞心肌细胞
- 雌激素膜受体GPER1通过调节Nrf2减轻心肌氧化损伤被引量：1
- 2016年
- 目的:观察雌激素膜受体GPER1对心肌细胞氧化损伤的保护作用,并探讨其通过PI3K/Akt信号通路上调Nrf2,减轻心肌氧化损伤的机制。方法:H_2O_2处理原代培养的新生大鼠心肌细胞建立氧化损伤模型,分为对照组、H_2O_2处理组,GPER1受体激动剂G1预处理+H_2O_2处理组和GPER1拮抗剂G15+G1预处理+H_2O_2处理组,MTT检测细胞活性,Hoechst33342染色和cleaved caspase-3免疫荧光染色观察细胞凋亡,并检测细胞内氧自由基,总抗氧化能力,超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平。Western blot测定细胞中p-Akt和细胞核内Nrf2的水平。结果:G1显著抑制H_2O_2导致细胞活性下降和细胞凋亡,并降低细胞内氧自由基水平,提高总抗氧化能力,增加SOD活性,减少MDA含量,但G15能拮抗G1的上述效应。同时G1能增加细胞内Akt磷酸化水平和细胞核内Nrf2的表达,这些效应可被G15和LY-294002阻断。结论:GPER1通过PI3K/Akt信号通路,调节Nrf2的表达,抑制氧化应激导致的心肌细胞损伤。GPER1可以作为开发心肌缺血损伤保护剂的一个潜在靶点。
- 程妮曾迪陈焱丁璐李晓莉赵天智郑强荪
- 关键词：PI3K/AKT信号通路NRF2抗氧化作用
- 甲状腺素促进miPS细胞向心肌细胞分化的非基因机制的作用
- 2016年
- 目的探讨三碘甲腺原氨酸(thyroxine,T3)在诱导小鼠诱导多能干细胞(mi PSC)向心肌细胞分化过程中非基因的机制作用。方法培养Oct4-GFP+mi PS细胞,利用悬滴培养形成拟胚体(embryoid body,EB)的方法诱导mi PSC向心肌细胞分化,在诱导过程中分别添加甲状腺素T3和甲状腺素类似物三碘甲腺乙酸(triiodothyroacetic acid,Triac)。实验共分对照组、T3处理组、T3+Triac处理组。分别在诱导分化第4、6和12天,在倒置显微镜下观察细胞的分化情况,采用免疫荧光染色法检测分化第12天心肌细胞特异性结构蛋白α-actinin及肌钙蛋白(cardiac troponin,c Tn)T的表达,Western blot法检测c Tn T和p-JNK/JNK的表达情况。结果诱导分化第4、6和12天,T3处理组跳动EB数量明显多于对照组和T3+Triac组(P<0.05);免疫荧光染色显示T3处理组的α-actinin和c Tn T表达量较对照组和T3+Triac组明显增强(P<0.05);Western blot结果表明T3显著提高c Tn T的表达量(P<0.05);细胞内信号分子JNK蛋白的磷酸化水平明显大于对照组和T3+Triac组(P<0.05)。结论甲状腺素通过的非基因机制促进mi PS细胞向心肌细胞分化,这种作用机制可能跟JNK信号通路有关。
- 燕松欧东波赵佩李晓莉魏婷陈焱郑强荪
- 关键词：甲状腺素JNK
