杨建英
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 全反式维A酸对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖和肺表面活性蛋白C及水通道蛋白5表达的影响
- 2015年
- 目的 探讨全反式维A酸（at-RA）对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（fAECⅡs）增殖和肺表面活性蛋白C（SPC）、水通道蛋白5（AQP5）表达的影响。方法 分离、纯化孕19 d的胎鼠肺组织，得到fAECⅡs。细胞培养1 d后，以at-RA作为干预方式，在at-RA作用1、2、3 d后，使用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况和活力，应用倒置显微镜观察细胞生长状况，采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测 SPC mRNA、AQP5 mRNA 的表达，W estern blot法检测SPC、AQP5蛋白的表达。结果 1.at-RA作用1 d对细胞增殖和活力无影响（P 〉0.05）；而作用2 d后，at-RA明显促进细胞增殖、增强细胞活力（P 〈0.05），且促进作用在第3天最显著（P 〈0.05）。2.与对照组相比，at-RA使得细胞状态更佳，细胞贴壁更紧，折光性更好。3.与对照组相比，at-RA在第1、2、3天均可上调AQP5 mRNA及AQP5蛋白的表达（t= -19.58、-10.44、-16.01、46.25、12.79、-27.96，P均 〈0.05），分别为对照组的281.07% 、766.67% 、1163.33% 和792.65% 、1310.52% 、1561.56% 。4.与对照组相比，at-RA在第1、3天上调 SPC mRNA、SPC 蛋白的表达（蛋白为对照组的615.480% 、369.450% ；mRNA 为对照组的728.33% 、400.83%）（t= -26.34、-25.26、-25.25、-31.71，P均〈0.05），但在第2天，下调 SPC mRNA、SPC蛋白（对照组的66.57% ，11.269%）的表达（t=9.12、13.80，P均〈0.05）。结论 at-RA可促进 fAECⅡs增殖，增强细胞活力；促进SPC和AQP5的表达。
- 高瑞伟杨建英孔祥永祝晓溪朱国青刘秀香
- 关键词：维A酸水通道蛋白5
- Wnt7b/β-catenin信号通路分子在肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化过程中的变化被引量：1
- 2015年
- 目的探讨Wnt7b/β联蛋白(β-catenin)信号通路分子在胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(f AEC2)分化过程中的变化。方法取孕19 d胎鼠肺组织,分离、纯化得到fAEC2。培养细胞48、72、96 h,倒置显微镜观察fAEC2形态变化,免疫荧光染色观察β-联蛋白(β-catenin)的表达,实时定量PCR检测细胞中Wnt7b、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、表面蛋白C(SP-C)和水通道蛋白5(AQP5)的mRNA变化,Western blot法检测cyclin D1、细胞核β-catenin、SP-C、AQP5蛋白的表达。结果 fAEC2培养48 h,β-catenin在细胞膜表达;培养72 h,β-catenin在细胞膜的表达较前减弱,在细胞质、细胞核中表达增强;培养96 h,全细胞β-catenin表达下调。Wnt7b、cyclin D1 mRNA的表达在72 h时显著增高,96 h时下降明显;SP-C mRNA的水平随培养时间的延长逐渐下降,AQP5 mRNA的水平逐渐升高。Cyclin D1、细胞核β-catenin蛋白在72 h时表达上调,96 h时表达下调;SP-C蛋白的表达量逐渐降低;AQP5蛋白的水平逐渐升高。结论 Wnt7b/β-catenin信号通路可能在fAEC2转分化中起重要作用。
- 马金帅刘秀香杨建英万彬李淑兰刘俊燕
- 关键词：细胞周期蛋白D1水通道蛋白5
