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沉默JP2基因对小鼠心肌细胞SK2通道的影响被引量：2: 2015年; 目的:探讨心肌细胞JP2与SK2通道的相互作用。方法:构建靶向小鼠JP2基因的siRNA慢病毒载体(LV-JP2-RNAi-1、LV-JP2-RNAi-2),将其转染至小鼠心肌细胞,以转染空载体(LV-NC-EGFP)和未转染细胞(CtrlNC)作对照。采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测各组心肌细胞JP2 mRNA和SK2蛋白的表达。结果:转染48 h后,各组小鼠心肌细胞JP2 mRNA表达的差异有统计学意义(F=31.775,P<0.001),LV-JP2-RNAi-1、LV-JP2-RNAi-2组较Ctrl-NC及LV-NC-EGFP组细胞降低。小鼠心肌细胞感染LV-JP2-RNAi-2 72 h后,SK2通道蛋白表达被抑制。结论:沉默小鼠心肌细胞JP2基因可抑制SK2通道的功能。; 郭文静樊红琨郑春光张桂红段萍杨阳罗天霞章茜; 关键词：RNA干扰心肌细胞小鼠

大鼠H9c2心肌细胞中SK2通道和JP2蛋白的表达及定位: 2019年; 目的:研究大鼠H9c2心肌细胞中SK2通道和JP2蛋白的表达及定位,探讨二者的相互作用。方法:采用Western blot检测SK2通道及JP2蛋白在H9c2细胞中的表达,免疫共沉淀鉴定JP2与SK2通道之间的相互作用,免疫荧光标记观察SK2通道和JP2蛋白在H9c2细胞的定位。结果:心肌细胞H9c2表达SK2通道及JP2蛋白,SK2通道和JP2蛋白可形成免疫复合物,SK2通道和JP2蛋白存在部分共定位。结论:心肌细胞H9c2中SK2通道与JP2蛋白存在相互作用。; 罗天霞樊红琨李立人闫宁宁章茜; 关键词：H9C2心肌细胞免疫共沉淀

慢性心衰大鼠心肌2型小电导-Ca^(2+)-激活K^+通道及Junctophilin 2表达的改变被引量：3: 2017年; 目的:检测慢性心力衰竭模型大鼠心肌细胞膜2型小电导-Ca^(2+)-激活K^+(SK2)通道和Junctophilin 2(JP2)蛋白表达的变化,为人类心力衰竭机制的研究和针对性的治疗提供新思路。方法:10只健康成年SD大鼠随机分为假手术组(5只)和手术组(5只),手术组采用腹主动脉缩窄的方法制备慢性心衰模型,假手术组大鼠分离腹主动脉后不进行缩窄术。每周观察各组大鼠心电图的变化,称量大鼠的体重,之后杀死大鼠取心脏和肺称重,计算心脏重量指数和肺系数;提取心脏组织蛋白,用Western blot的方法检测心肌SK2通道和JP2蛋白的表达水平。结果:术后第8周,手术组大鼠心电图ST段抬高或T波高耸;并且与假手术组相比,手术组大鼠心脏重量指数和肺系数均显著增加;心肌组织SK2通道的表达显著增加,JP2表达下降(P均<0.05)。结论:慢性心衰模型大鼠心肌JP2蛋白表达减小,SK2通道表达增加。; 樊红琨罗天霞杨阳王国庆常欢马小芳乔鹏章茜; 关键词：慢性心衰

自发性高血压大鼠心肌小电导钙激活钾通道蛋白的表达: 2014年; 目的探讨高血压心脏功能的变化与小电导钙激活钾通道（sK）的关系。方法自发性高血压大鼠作为实验组（雄性，n=15），SKY大鼠作为对照组（雄性，n=11），采用尾套法和标准Ⅱ导联测定2组大鼠的动脉血压（ABP）和心电图；采用免疫印迹检测2组大鼠心脏组织SK2通道蛋白的表达；采用免疫细胞化学观察实验组大鼠心房和心室细胞SK2通道的分布。结果与对照组比较，实验组大鼠血压明显升高[（161．91±2．15）mmHg比（109．67±2．65）mmHg（1mmHg=0．133kPa），P〈0．05）]，P波时长和R．R间期延长[P波：（29．27±0．74）ms比（26．60±0．24）ms，R．R间期（161．64±8．78）ms比（131．40±1．65）ms，均P〈0．05]，而QRS波长和P．R间期与对照组相比差异无统计学意义。与对照组比较，实验组大鼠心房组织SK2蛋白表达降低（P〈0．05），心室组织SK2蛋白表达量与对照鼠差异无统计学意义。SK2通道分布于高血压大鼠心房细胞膜，心室细胞的SK2阳性免疫反应略弱。结论自发性高血压大鼠心脏SK2通道表达下调。; 孙宝全穆永慧罗天霞郑春光杨阳樊红琨章茜; 关键词：小电导钙激活钾通道免疫印迹法免疫组织化学

SK2和JPH2双基因重组真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达被引量：4: 2016年; 目的:构建SK2和JPH2双基因重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2,并检测其在转染后HEK293细胞中的表达。方法:以p CMV6-entry/SK2为模板,PCR扩增出SK2片段,通过BgⅢ/HindⅢ酶切位点克隆入真核表达载体p IRES-EGFP,将JPH2序列插入构建的SK2表达载体p IRES-EGFP-SK2,并通过酶切及测序鉴定。脂质体转染法将重组质粒p IRES-EGFP/SK2+JPH2转染HEK293细胞,采用Western blot法检测SK2通道蛋白和JPH2蛋白的表达。结果:构建的重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2经酶切和测序鉴定,证实插入的序列与Gen Bank中的SK2和JPH2基因序列完全相同。p IRES-EGFP/SK2+JPH2质粒转染HEK293细胞48 h后,SK2和JPH2蛋白均能成功表达。结论:成功构建了重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2。; 罗天霞樊红琨芮丹丹孙佳翕马小芳章茜; 关键词：真核表达载体 HEK293

Interactions of Junctophilin-2 with SK2 channel and Ryanodine Receptor Type 2 in Myocardium: Aim:Junctophilins(JPs)are main membrane-binding proteins that are associated with the functions of junctional ...; 樊红琨罗天霞郑春光杨阳涂会引章茜; 文献传递

JP2敲减抑制H9c2心肌细胞Caveolin-1膜蛋白的表达: 2018年; 目的探讨JP2敲减对H9c2心肌细胞Caveolin-1表达的影响.方法构建靶向大鼠JP2基因的siRNA重组腺病毒载体(Ad-JP2-siRNA)和对照腺病毒载体(Ad-NC-siRNA),分别感染H9c2细胞.Real-Time PCR检测各组细胞JP2 mRNA水平,Western blotting结合表面生物素检测JP2蛋白和Caveolin-1总蛋白及膜蛋白的表达,免疫细胞化学检测Caveolin-1在H9c2细胞中的亚细胞定位.结果与control组相比,转染Ad-JP2-siRNA 48 h后H9c2细胞中JP2 mRNA(1.000±0.000 vs 0.2939±0.0796,P<0.05)及蛋白(0.806±0.144 vs 0.233±0.101,P<0.05)的表达水平显著下降.Caveolin-1总蛋白表达水平无显著改变(1.797±0.082 vs 1.157±0.134,P>0.05),膜蛋白表达显著降低(1.156±0.132 vs 0.196±0.059,P<0.05).Caveolin-1主要分布于H9c2细胞膜,与转染Ad-JP2-siRNA细胞比较,Caveolin-1的膜分布明显减弱.结论敲减JP2抑制H9c2细胞Caveolin-1蛋白表达.; 罗天霞樊红琨彭阳豪谢荣荣章茜; 关键词：膜蛋白质类腺病毒

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罗天霞