孙利
- 作品数：8 被引量：6H指数：1
- 供职机构：石家庄以岭药业股份有限公司更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 当归咖啡酸-O-甲基转移酶基因的克隆与表达分析被引量：5
- 2021年
- 目的:为了研究当归阿魏酸生物合成途径的功能基因,从当归中克隆了一条当归咖啡酸-O-甲基转移酶基因(AsCOMT),进行生物信息学分析、基因表达模式分析及原核表达。方法:首先依据当归COMT基因的序列(GenBank注册号KP188587),利用PCR的方法克隆该基因的cDNA全长。对AsCOMT基因进行实时荧光定量PCR分析。采用无缝克隆技术构建AsCOMT基因的原核表达载体,通过热击法转化大肠杆菌BL21(DE3)。进一步利用异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导大肠杆菌表达重组蛋白,并筛选出最佳IPTG诱导表达条件。结果:AsCOMT基因的开放阅读框为1098 bp,编码365个氨基酸,蛋白分子量约为40.230 kDa,等电点为5.43。AsCOMT蛋白含有1个S-腺苷-L-甲硫氨酸结合位点,属于COMT蛋白家族成员。通过实时荧光定量表达分析表明,AsCOMT基因在当归的不同组织均有表达,根中表达量最高,其次是叶片,叶柄中表达量最低。原核表达载体pGEX-4T-3-AsCOMT在E.coli BL21(DE3)中大量表达当归AsCOMT蛋白,且经SDS-PAGE分析显示其相对分子质量约为40.23 kDa,其最优表达条件为25℃、1.0 mmol/L IPTG终浓度、诱导8 h,得到的当归AsCOMT蛋白主要以可溶性形式存在。结论:本研究成功克隆了AsCOMT基因,且该基因的表达具有组织特异性。构建的AsCOMT原核表达菌株在最适IPTG诱导表达条件下能大量表达当归COMT蛋白,为研究COMT基因在当归阿魏酸生物合成途径中的功能奠定了基础。
- 张培侯云龙苏敏孙利徐登封宋涛周璐恒赵韶华
- 关键词：当归COMT荧光定量PCR原核表达
- 一种中药组合物在制备治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变中的应用
- 本发明公开了一种中药组合物在制备治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变的药物中的应用。本发明中药组合物由赤芍、黄芪、生地黄等12味中药组成，化瘀通络，益气养阴，临床研究表明，本发明中药组合物能够有效治疗中心性浆液性脉络膜视网膜...
- 高学东齐晓琳王宏涛张会欣田野仁君霞杜彦霞谷春华孙利杨立波张永锋
- 文献传递
- 一种中药组合物在制备治疗糖尿病氧化应激药物中的应用
- 本发明公开了一种中药组合物在制备治疗糖尿病氧化应激的药物中的应用。本发明中药组合物由赤芍、黄芪、生地黄等12味中药组成，化瘀通络，益气养阴，临床研究表明，本发明中药组合物能够有效治疗糖尿病氧化应激。
- 齐晓琳高学东张会欣王宏涛杜彦霞谷春华许红辉孙利杨立波张秋艳张永锋
- 文献传递
- 通络明目胶囊治疗糖尿病视网膜病变血瘀络阻、气阴两虚证随机、双盲、多中心Ⅲ期临床试验被引量：1
- 2024年
- 目的:评价通络明目胶囊治疗糖尿病视网膜病变血瘀络阻、气阴两虚证的临床有效性和安全性。方法:采用区组随机、双盲、阳性对照、多中心临床试验设计方法。共纳入4家试验中心416例糖尿病视网膜病变血瘀络阻、气阴两虚证患者(观察组-对照组数量比为3∶1)。在规范降糖治疗基础上,观察组服用通络明目胶囊(4粒/次,3次/d)+羟苯磺酸钙胶囊模拟剂(2粒/次,3次/d),对照组服用羟苯磺酸钙胶囊(2粒/次,3次/d)+通络明目胶囊模拟剂(4粒/次,3次/d)。疗程为12周。通过比较两组患者治疗前后糖尿病视网膜病变综合疗效、中医证候积分、矫正视力、眼底改变、眼底荧光血管造影等疗效指标评价通络明目胶囊疗效。同时进行一般检查、实验室检查和不良事件评价药物的安全性。结果:观察组和对照组患者基线人口学资料和疾病特征差异无统计学意义,均衡可比。治疗12周后,观察组糖尿病视网膜病变综合疗效总有效率(61.0%,189/310)优于对照组(44.1%,45/102),差异具有统计学意义(χ^(2)=8.880,P<0.01)。观察组中医证候总有效率(88.4%,259/293)优于对照组(69.9%,65/93),差异具有统计学意义(χ^(2)=17.927,P<0.01)。与对照组治疗后比较,观察组患者中医证候单项症状“目睛干涩(χ^(2)=8.305)、面色晦暗(χ^(2)=4.053)、倦怠乏力(χ^(2)=10.267)、气短懒言(χ^(2)=8.494)、大便干结(χ^(2)=8.657)”消失率均明显增高,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在改善矫正视力(χ^(2)=8.382)、眼底改变(χ^(2)=6.026)方面,观察组显效+有效率均优于对照组(P<0.05)。试验期间观察组与对照组的不良事件发生率分别为1.3%和2.9%,两组间比较差异无统计学意义,两组均无严重不良事件及导致退出的不良事件发生。结论:通络明目胶囊可以提高糖尿病视网膜病变综合疗效,改善中医证候疗效、视力、眼底改变和眼底荧光血管造影,且安�
- 任君霞王永争刘晓飞孙利杨立波吴烈连凤梅韦企平魏丽娟喻京生韩建科
- 关键词：糖尿病视网膜病变随机双盲多中心
- 一种中药组合物在制备治疗细胞损伤药物中的应用
- 本发明公开了一种中药组合物在制备治疗细胞损伤药物中的应用。本发明中药组合物由赤芍、黄芪、生地黄等12味中药组成，化瘀通络，益气养阴，临床研究表明，本发明中药组合物能够有效治疗细胞损伤。
- 张会欣高学东齐晓琳王宏涛许红辉杜彦霞谷春华张永峰田野仁君霞孙利杨立波
- 文献传递
- 一种中药组合物在制备治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变中的应用
- 本发明公开了一种中药组合物在制备治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变的药物中的应用。本发明中药组合物由赤芍、黄芪、生地黄等12味中药组成，化瘀通络，益气养阴，临床研究表明，本发明中药组合物能够有效治疗中心性浆液性脉络膜视网膜...
- 高学东齐晓琳王宏涛张会欣田野仁君霞杜彦霞谷春华孙利杨立波张永峰
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- 一种中药组合物在制备治疗细胞损伤药物中的应用
- 本发明公开了一种中药组合物在制备治疗细胞损伤药物中的应用。本发明中药组合物由赤芍、黄芪、生地黄等12味中药组成，化瘀通络，益气养阴，临床研究表明，本发明中药组合物能够有效治疗细胞损伤。
- 张会欣高学东齐晓琳王宏涛许红辉杜彦霞谷春华张永锋田野仁君霞孙利杨立波
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- 一种中药组合物在制备治疗糖尿病氧化应激药物中的应用
- 本发明公开了一种中药组合物在制备治疗糖尿病氧化应激的药物中的应用。本发明中药组合物由赤芍、黄芪、生地黄等12味中药组成，化瘀通络，益气养阴，临床研究表明，本发明中药组合物能够有效治疗糖尿病氧化应激。
- 齐晓琳高学东张会欣王宏涛杜彦霞谷春华许红辉孙利杨立波张秋艳张永峰
- 文献传递
