目的探讨微小RNA-7156-3p(miR-7156-3p)在乳腺癌中的表达及通过靶向调控Ras相关蛋白Rab-1A(Ras-related protein Rab-1A,RAB1A)对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测miR-7156-3p在乳腺癌患者血清、人正常乳腺上皮细胞MCF10A及乳腺癌细胞株HCC1937、MCF7、MB-MDA-468、SKBR3、BT549中的表达水平。选择miR-7156-3p表达水平最少的乳腺癌细胞株,分别转染miR-NC和miR-7156-3p,标记为miR-NC组和miR-7156-3p组。分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和Transwell小室实验检测过表达miR-7156-3p对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。通过生物信息学网站预测和双荧光素酶报告基因系统检测miR-7156-3p与靶基因的靶向关系。采用qPCR和Western blotting检测乳腺癌细胞中靶基因的表达水平。结果乳腺癌患者血清中miR-7156-3p的表达水平低于健康体检者(P<0.01)。与MCF10A细胞相比,HCC1937、MCF7、MB-MDA-468、SKBR3、BT549细胞中miR-7156-3p的表达水平均下降(P<0.05),HCC1937细胞中的变化最为明显(P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-7156-3p组HCC1937细胞的增殖能力和迁移能力明显降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因系统结果证实miR-7156-3p的靶基因是RAB1A(P<0.01)。qPCR和Western blotting结果显示,miR-7156-3p负向调控RAB1A的表达(P<0.01)。结论miR-7156-3p在乳腺癌中低表达,过表达miR-7156-3p可通过靶向调控RAB1A抑制乳腺癌细胞HCC1937的增殖和迁移。
目的 观察长链非编码RNA CTC-459F4.3在肝癌组织和肝癌细胞中的表达,探索过表达CTC-459F4.3对肝癌细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法 qPCR检测CTC-459F4.3在28例肝癌组织和肝癌细胞株(Huh7、SMMC-7721、MHCC-97H和BEL-7404)中的表达。选择CTC-459F4.3表达最低的肝癌细胞株,分为阴性对照组(转染阴性质粒)和CTC-459F4.3组(转染CTC-459F4.3质粒)。MTT法和Transwell迁移实验分别检测过表达CTC-459F4.3对细胞增殖能力和迁移能力的影响。免疫组化检测肝癌组织中羧基末端区域小磷酸化酶样蛋白(CTDSPL)的表达。qPCR和Western blot分别检测过表达CTC-459F4.3对CTDSPL基因表达的影响。结果 与癌旁组织相比,CTC-459F4.3在肝癌组织呈低表达( P <0.01)。与人正常肝细胞相比,CTC-459F4.3在肝癌细胞株呈低表达( P <0.05),CTC-459F4.3在SMMC-7721细胞中的表达最低( P <0.01)。与阴性对照组相比,CTC-459F4.3组SMMC-7721细胞的增殖能力明显下降( P <0.05),细胞迁移能力明显降低( P <0.05)。与癌旁组织相比,CTDSPL蛋白在肝癌组织中的表达明显降低。与阴性对照组相比,CTC-459F4.3组SMMC-7721细胞中CTC-459F4.3表达明显增加( P <0.01)。结论 CTC-459F4.3在肝癌组织和肝癌细胞中呈低表达,过表达CTC-459F4.3可显著抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖能力和迁移能力,其作用机制可能是上调CTDSPL基因的表达。
