夏烨
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金云南省应用基础研究基金云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗VEGF与IL-10主动免疫对HPV感染肿瘤模型的作用及碳、氮源对酵母高密度发酵与不同启动子指导的HPV16 L1表达的影响
- 本文从以下几部分进行论述： 第一部分 抗VEGF与IL-10主动免疫对HPV感染肿瘤模型的作用 肿瘤免疫抑制微环境显著抑制抗肿瘤免疫，促进肿瘤的发生发展，并阻碍肿瘤免疫治疗取得疗效。IL-10是重要的免疫抑制分子，可...
- 夏烨
- 关键词：白介素-10主动免疫氮源
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- 鲍曼不动杆菌亚单位疫苗抗原蛋白与应用
- 本发明涉及分子生物学及免疫学领域，具体的说，本发明提供了一种鲍曼不动杆菌的亚单位疫苗抗原蛋白与其应用方法。鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpW的基因核酸序列如序列表SEQ？IDNO:1所示，其编码的蛋白即为鲍曼不动杆菌亚单位疫苗...
- 马雁冰黄惟巍姚宇峰王世杰杨旭夏烨孙文佳刘存宝白红妹
- 文献传递
- 利用不同碳源进行毕赤酵母高密度发酵及TEF-1启动子指导下的HPV16_L1蛋白表达被引量：3
- 2015年
- 目的:研究不同碳源对于毕赤酵母菌株在发酵罐中高密度生长,以及对组成型翻译延伸因子-1(TEF-1)启动子指导下HPV16_L1蛋白表达的影响。方法:利用1.5L发酵罐使用不同碳源进行毕赤酵母的高密度发酵,检测在不同碳源利用情况下菌体的增殖动力学,并以Western blot动态分析HPV16_L1蛋白的表达水平。结果:以甘油作为碳源,菌体细胞湿重可达到510g/L(OD600为189.4),HPV16_L1的表达在72h之前保持高水平;在甲醇和葡萄糖中菌体细胞湿重都可达到220g/L左右(OD600分别为75.3和77.3),甲醇利用下HPV L1蛋白在144h后仍保持较高水平表达,葡萄糖中60h HPV L1表达开始显著下降;在山梨醇作为碳源情况下菌体未能在发酵罐中获得高密度生长;总体上,甘油作为碳源在72h左右可获得最高的目的蛋白收获总量。结论:为实现毕赤酵母高密度生长与异源基因在TEF-1启动子指导下高效表达,以及HPV L1蛋白的简易、有效制备提供了基础。
- 夏烨黄惟巍杨旭孙鹏艳姚月婷王世杰刘存宝孙文佳白红妹姚宇峰马雁冰
- 关键词：碳源毕赤酵母高密度发酵L1蛋白
- 重组人VEGF多肽肿瘤疫苗
- 本发明公开了一种重组人VEGF多肽肿瘤疫苗，利用人工合成的方法获得人VEGF抗原表位核酸序列，将其插入噬菌体Qβ外壳蛋白基因的C末端，利用共表达系统在大肠杆菌BL21（DE3）中同时表达噬菌体Qβ外壳蛋白以及C末端插有人...
- 马雁冰白红妹黄惟巍夏烨刘存宝孙文佳杨旭
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- 新型抗原递送载体:细胞溶素A融合目的蛋白整合的重组外膜囊泡的构建与鉴定被引量：1
- 2016年
- 细菌外膜囊泡(OMVs)是革兰氏阴性菌以出芽方式分泌的一种蛋白脂质体,可通过基因工程改造成为外源大分子抗原蛋白的载体。成孔蛋白细胞溶素A(Cly A)可作为引导序列将C-端融合的外源蛋白质定位在菌体及其所分泌的OMVs外膜上。利用Cly A融合蛋白重组的OMVs可介导抗原呈递,制备疫苗。为验证这一假说,本研究拟以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为目的蛋白,采用重组技术,构建Cly A-EGFP融合蛋白表达载体,转化E.coli DH5α,获得Cly A-EGFP融合蛋白整合的重组细菌OMVs,探索Cly A/EGFP融合蛋白整合的OMVs作为一种制备新型疫苗载体的可行性。重组OMVs分别经蛋白酶K和/或EDTA处理后,蛋白质印迹分析显示,Cly A-EGFP融合蛋白有效地整合在重组的OMVs中,且EGFP呈现于表面。重组OMVs与小鼠巨噬细胞Raw264.7共同孵育后,以EGFP作为标记,荧光显微镜观察显示,OMVs可被巨噬细胞吞噬、摄取。进而,荧光显微镜及流式细胞术分析证明,重组的OMVs可被骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)有效摄取,并促进BMDCs表达CD86和CD80,说明重组的OMVs可激活树突状细胞,促进其成熟。本研究结果提示,利用Cly A融合特异目的蛋白整合的重组OMVs,可作为外源蛋白质的载体,介导抗原呈递作用,在设计与制备疫苗中具有潜在的应用价值。
- 王世杰黄惟巍舒聪妍黎奎夏烨李扬李慧孙鹏艳杨旭白红妹孙文佳刘存宝褚晓杰冯雪军马雁冰
- 关键词：疫苗抗原递呈细胞
- 人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白L1在大肠埃希菌中的表达
- 2015年
- 目的探讨在大肠埃希菌中不同因素对高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)L1蛋白表达的影响,为研发针对多型别HPV的低价、广谱疫苗奠定基础。方法通过采用非融合、不同融合蛋白形式,不同基因型HPV L1序列,以及同一基因型但不同序列特征等构建HPV L1非融合及融合表达重组质粒及HPV L1谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione-S-transferase,GST)融合表达质粒,转化不同宿主菌(大肠埃希菌DH5α、BL21),在不同的温度下(37、20℃)进行IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE分析融合蛋白的表达及其可溶性,Western blot鉴定表达的融合蛋白。结果 HPV 16 L1蛋白在GST融合蛋白形式下获得了高效表达,而非融合表达或硫氧还蛋白融合表达未见明显目的条带;不同的宿主菌未对GST融合蛋白表达水平产生明显影响;在37℃培养条件下,表达的GST融合蛋白以包涵体形式存在,而在20℃培养条件下,部分表达的蛋白以可溶性形式存在;HPV 16 L1基因不同序列获得了类似的表达水平;经酵母密码子优化的HPV 18 L1与HPV 58 L1基因均能以GST融合表达形式获得与HPV 16 L1相似的高效表达。结论在大肠埃希菌中以GST融合形式可获得多基因型别HPV L1蛋白的高效可溶性表达,为病毒样颗粒体外折叠制备奠定了基础,也为其他外源基因在大肠埃希菌中的高效表达提供了参考。
- 杨旭夏烨李亚东金晓媚龙琼孙文佳黄惟巍刘存宝姚宇峰马雁冰
- 关键词：乳头瘤病毒衣壳蛋白大肠埃希菌
- 乙肝核心抗原病毒样颗粒作为肿瘤治疗性疫苗载体的应用
- 本发明涉及分子生物学及免疫学领域，具体的说，本发明提供了一种乙肝核心抗原病毒样颗粒（HBcAg）作为宫颈癌治疗性疫苗载体的应用。其制备方法：选择HPV16？E7<Sub>49-57</Sub>CTLs表位肽段，经基因重组...
- 马雁冰褚晓杰李杨龙琼夏烨黄惟巍
- 文献传递
