秦贵平 作品数:6 被引量:18 H指数:3 供职机构: 山东农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
产气荚膜梭菌α毒素双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:6 2018年 为建立产气荚膜梭菌α毒素的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,本研究以抗产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体(MAb)为捕获抗体,抗产气荚膜梭菌α毒素多克隆抗体为检测抗体,建立了检测α毒素的DAS-ELISA。通过优化反应条件,建立标准曲线;并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。采用该方法测定产气荚膜梭菌α毒素的最低检测限为0.353倍的小鼠LD_(50),可定量范围为0.353~90.368倍小鼠LD_(50)。结果表明该DAS-ELISA方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,可以用于大批量样品检测。初步应用结果显示:患产气荚膜梭菌病的兔群肠内容物中产气荚膜梭菌的α毒素水平显著高于健康兔群(p<0.05)。本研究检测α毒素的DAS-ELISA建立有助于畜禽产气荚膜梭菌病的诊断及研究。 陈长俊 刘伟 陈端端 秦贵平 林晓佳 王海荣关键词:双抗体夹心ELISA 一种产气荚膜梭菌病α毒素Envision免疫组化的检测方法 本发明涉及动物细菌学领域,提供了一种产气荚膜梭菌病α毒素Envision免疫组化的检测方法,该方法以小鼠抗α毒素单克隆抗体为基础,建立了特异性高、重复性好、背景低,可直观、简便检测α毒素的Envision免疫组化方法。该... 王海荣 秦贵平 柴同杰 陈长俊文献传递 产气荚膜梭菌α毒素免疫组化检测方法的建立 被引量:4 2016年 为建立检测产气荚膜梭菌α毒素的方法,本研究以抗产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体为特异性检测抗体,对人工腹腔注射α毒素的病死兔器官组织进行免疫组化染色,经反应条件优化,建立了产气荚膜梭菌α毒素的免疫组化检测方法。应用该方法对临床16例疑似产气荚膜梭菌病兔组织中的α毒素进行检测,同时进行病原菌分离鉴定。结果显示,该方法可以检测到人工感染兔心脏、肺脏、脾脏、肾脏、膀胱、肝脏、胃、小肠、盲肠和延脑中的α毒素分布,对照组则均为阴性,具有良好的特异性;临床应用检测结果表明:16例疑似病兔胃和肾脏中α毒素的检测均为阳性,检测阳性率高于细菌分离培养。本研究建立的该方法可以用于产气荚膜梭菌病的临床诊断,也为该毒素在动物机体内的分布规律及致病机理的研究提供了可靠的手段。 秦贵平 陈长俊 林晓佳 吴洁 杨文浩 王海荣 柴同杰关键词:产气荚膜梭菌 Α毒素 单克隆抗体 免疫组化 产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体的研制 被引量:2 2015年 为了得到产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体,以重组产气荚膜梭菌β毒素为抗原免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合并筛选出阳性单克隆杂交瘤细胞株,接种至小鼠腹腔,培养后抽取腹水并用正辛酸-硫酸铵纯化法进行纯化,从而获得抗产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体。该单克隆抗体经特异性试验,能与天然β毒素及重组β毒素发生特异性反应,且效价较高,为进一步建立快速有效的临床检测技术奠定了基础。 刘萌萌 樊金 刘雪慧 秦贵平 张慧蓉 柴同杰关键词:产气荚膜梭菌 Β毒素 单克隆抗体 产气荚膜梭菌α毒素免疫组化检测方法的建立及初步应用 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C. perfringens)可产生多种致死性的外毒素,容易引发畜禽的各种产气荚膜梭菌病,以及人们的食物中毒、创伤性气性坏疽,严重影响人们身体健康,给各国的养... 秦贵平关键词:外科感染 产气荚膜梭菌 微生物学检验 D型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的研制及保护效果的评价 被引量:5 2015年 为研制更有效的预防家畜D型产气荚膜梭菌肠毒血症的疫苗,本研究采用D型产气荚膜梭菌标准菌株增菌培养,经自制产毒培养基高效产毒,制备成D型产气荚膜梭菌氢氧化铝类毒素疫苗和白油类毒素疫苗。通过不同剂量疫苗免疫绵羊的攻毒保护试验和免疫绵羊的抗体水平监测,评估疫苗的免疫保护效果。结果表明:D型产气荚膜梭菌类毒素疫苗安全性良好,氢氧化铝苗和白油苗对绵羊有效免疫剂量均为4 m L(外毒素对小鼠半数致死量为2-6.4/m L),绵羊接种一个有效免疫剂量后,氢氧化铝疫苗免疫保护周期为6周以上;白油疫苗免疫保护周期为21周以上。本研究结果表明两种疫苗均具有良好的应用前景。 刘雪慧 王方山 樊金 郭梦娇 艾文豪 秦贵平 吴洁 刘萌萌 王海荣 柴同杰关键词:产气荚膜梭菌 抗体消长规律