- 棉酚通过Akt/β-catenin通路抑制胃癌细胞迁移被引量:7
- 2015年
- 目的探讨棉酚(gossypol)对胃癌细胞迁移能力的影响,并探讨相关机制。方法胃癌细胞经不同浓度棉酚处理后,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测丝/苏氨酸激酶/β-链蛋白(Akt/β-catenin)信号通路活性及相关蛋白细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、E-钙黏蛋白(Ecadherin)和波形蛋白(vimentin)的蛋白表达水平。结果MTT实验显示,棉酚对胃癌细胞具有增殖抑制作用,且随浓度增加而增大;Transwell小室实验显示棉酚对胃癌细胞迁移能力具有抑制作用;棉酚对胃癌细胞迁移能力的抑制率高于增殖抑制率;与对照组相比,棉酚可明显下调胃癌细胞的pAkt、β-catenin、cyclin D1、MMP-2和vimentin蛋白表达水平,明显上调E-cadherin蛋白表达水平。结论棉酚通过下调Akt/β-catenin通路活性抑制胃癌细胞迁移。
- 杨丹王丽李珠刘赵阳刘畅郭丽付佳祁荣王俊平
- 关键词:棉酚胃癌Β-链蛋白细胞周期蛋白D1E-钙黏蛋白波形蛋白
- 甲醛固定石蜡包埋胃癌组织中三种DNA提取方法的比较被引量:4
- 2016年
- 目前国内大多数医院均用10%中性福尔马林固定手术标本。随着分子生物学技术的不断发展,这些标本是可靠的分子生物学研究材料来源,在医学检验、法医鉴定、大宗病例回顾性研究等方面得到广泛应用。已有研究证明石蜡包埋组织在制作及保存过程中受多种试剂等因素的影响,
- 郭丽祁荣臧旭郑瑞付佳
- 关键词:甲醛固定石蜡包埋DNA提取聚合酶链式反应
- 胡桃醌对胶质瘤细胞株U-87MG迁移、侵袭能力的抑制作用被引量:1
- 2015年
- 目的探讨肽基脯酰胺顺反异构酶Pin1(peptidyl-prolyl isomerase 1)抑制剂胡桃醌(Juglone)对胶质瘤细胞U-87 MG迁移、侵袭能力的影响并探讨相关机制。方法胶质瘤细胞株U-87 MG经0、0.8、1.6和3.2μmol·L-1胡桃醌处理后,以细胞划痕实验检测细胞迁移能力,transwell小室实验检测细胞侵袭能力,western blot法检测β-链蛋白(β-catenin)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的蛋白表达水平。结果细胞划痕实验结果显示1.6μmol·L-1和3.2μmol·L-1胡桃醌组U-87 MG细胞划痕创面愈合率分别为46.04%±6.25%和30.05%±13.35%,与0μmol·L-1组比较明显下降(P<0.05);transwell小室实验结果显示1.6μmol·L-1和3.2μmol·L-1胡桃醌组穿膜细胞数平均为(103.67±5.69)个和(77.33±7.77)个,与0μmol·L-1组比较明显减少(P<0.05);western blot实验结果显示胡桃醌可显著下调U-87 MG细胞β-catenin、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,作用随浓度增加而增大。结论胡桃醌可通过下调β-catenin及其下游MMP-2、MMP-9和VEGF的蛋白表达而抑制胶质瘤细胞迁移、侵袭能力。
- 杨丹王丽李珠刘赵阳孙燕郭丽付佳祁荣王俊平
- 关键词:胡桃醌胶质瘤Β-链蛋白血管内皮细胞生长因子基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9
- 石蜡包埋胃癌组织中DNA四种提取方法的探讨被引量:1
- 2016年
- 目的探讨提取石蜡包埋胃癌组织中DNA的最佳方法。方法用蛋白酶K消化氯化钠盐析方法、蛋白酶K消化酚氯仿抽提方法、试剂盒方法及改良试剂盒方法,提取石蜡包埋胃癌组织中DNA,进行PCR扩增,应用凝胶电泳成像检出率(检出率=检出数/总例数)比较4种方法提取DNA质量的情况。结果改良试剂盒方法,凝胶电泳成像检出率95.5%(151/158),分别与蛋白酶K消化氯化钠盐析方法15.3%(4/26)、蛋白酶K消化酚氯仿抽提方法8.3%(1/12)、试剂盒方法19.2%(11/57)凝胶电泳成像检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 4种提取DNA方法中改良试剂盒方法,是提取石蜡包埋胃癌组织中DNA的最佳方法。
- 郭丽祁荣郑瑞付佳李子怡
- 关键词:DNA提取聚合酶链式反应凝胶电泳
- Chelex100法提取的口腔黏膜细胞DNA在STR分析中的研究被引量:3
- 2017年
- 目的探讨Chelex100法提取口腔黏膜细胞DNA在STR分析中应用的可靠性。方法优化采集口腔黏膜细胞,Chelex100法提取DNA,检测OD260/OD280比值及浓度,以DNA为模板,荧光标记法进行PCR扩增,基因分析仪上电泳,E-seq分析软件进行基因型分析。结果 Chelex100法提取口腔黏膜细胞DNA,OD260/OD280比值:1.397±0.0062(1.23~1.52),浓度:63.039±3.116 ng/μL(26.7~315.9ng/μL),PCR扩增电泳无非特异性带,在Li-COR 4300基因分析仪上电泳,E-seq分析软件进行基因型分析,满足了STR基因型分析研究。结论优化采集口腔黏膜细胞及DNA提取方法,具有快速、简便、经济特点,其提取到DNA的纯度及产量,通过对STR基因型分析结果验证本研究样本DNA是可靠的。
- 李子怡田秀荣付佳祁荣郭丽
- 关键词:口腔黏膜细胞DNA提取基因频率